【概(gai)要(yao)描(miao)述】il-1β elisa試劑盒標本(ben)采(cai)集後盡早(zao)進行提(ti)取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進行，提(ti)取(qu)後應盡(jin)快進行實驗。若不(bu)能馬上(shang)進行試驗，可將標本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復凍融

il-1β elisa試劑盒
使用目的：

本(ben)試劑盒用於(yu)測(ce)定(ding)大(da)鼠(shu)血清，血漿及(ji)相(xiang)關(guan)液(ye)體樣本(ben)中(zhong)含量(liang)。

試劑盒組成：

標本(ben)要(yao)求(qiu)：

1．標本(ben)采(cai)集後盡早(zao)進行提(ti)取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進行，提(ti)取(qu)後應盡(jin)快進行實驗。若不(bu)能馬上(shang)進行試驗，可將標本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復凍融

2．不(bu)能檢測(ce)含NaN3的樣品(pin)，因(yin)NaN3抑制(zhi)辣(la)根過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的（HRP）活(huo)性(xing)。

操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.標準品的稀(xi)釋(shi)：本(ben)試劑盒提供(gong)原倍標準品壹支，用戶可(ke)按照(zhao)下(xia)列(lie)圖表在(zai)小試管(guan)中(zhong)進行稀(xi)釋(shi)。

2.加樣：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白孔(kong)（空(kong)白對(dui)照(zhao)孔不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑，其余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同(tong)）、標準孔、待測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包(bao)被板(ban)上(shang)標準品準確加樣50μl，待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再(zai)加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl（樣品(pin)最(zui)終(zhong)稀(xi)釋(shi)度為5倍）。加(jia)樣將樣品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板(ban)孔底(di)部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

3.溫(wen)育(yu)：用封板(ban)膜(mo)封板(ban)後置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。

4.配液(ye)：將30倍濃(nong)縮洗(xi)滌液(ye)用蒸餾水(shui)30倍稀(xi)釋(shi)後備用

5.洗(xi)滌：小心揭掉封板(ban)膜(mo)，棄去液(ye)體，甩(shuai)幹，每(mei)孔加滿洗(xi)滌液(ye)，靜置30秒後棄去，如此重復(fu)5次，拍(pai)幹。

6.加(jia)酶：每(mei)孔加入(ru)酶(mei)標試劑50μl，空白孔(kong)除外(wai)。

7.溫育(yu)：操(cao)作同(tong)3。

8.洗(xi)滌：操(cao)作同(tong)5。

9.顯(xian)色：每(mei)孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色10分(fen)鐘.

10.終止(zhi)：每(mei)孔加終止液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應（此(ci)時藍(lan)色立轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

11.測(ce)定(ding)：以(yi)空白孔(kong)調零，450nm波(bo)長依(yi)序測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應在(zai)加(jia)終止液(ye)後15分(fen)鐘以內(nei)進行。

操(cao)作程(cheng)序總(zong)結：

il-1β elisa試劑盒計(ji)算

以標準物(wu)的濃(nong)度為橫坐標，OD值為縱坐標，在(zai)坐標紙(zhi)上(shang)繪出(chu)標準曲(qu)線(xian)，根據樣品(pin)的OD值由(you)標準曲(qu)線(xian)查出(chu)相應的濃(nong)度；再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數(shu)；或(huo)用標準物(wu)的濃(nong)度與(yu)OD值計(ji)算出(chu)標準曲(qu)線(xian)的直(zhi)線(xian)回歸(gui)方(fang)程(cheng)式，將樣品(pin)的OD值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式，計(ji)算出(chu)樣品(pin)濃(nong)度，再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數(shu)，即為樣品(pin)的實際(ji)濃(nong)度。

註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)

1．試劑盒從(cong)冷(leng)藏(zang)環境中(zhong)取(qu)出(chu)應在(zai)室(shi)溫平衡15-30分(fen)鐘後方(fang)可(ke)使用，酶標包(bao)被板(ban)開(kai)封(feng)後如未用完，板(ban)條應裝入(ru)密(mi)封(feng)袋(dai)中(zhong)保(bao)存。

2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可能(neng)會(hui)有(you)結晶(jing)析(xi)出(chu)，稀(xi)釋(shi)時可(ke)在(zai)水(shui)浴中(zhong)加溫(wen)助溶(rong)，洗(xi)滌時不(bu)影響結(jie)果。

3．各步(bu)加(jia)樣均應使(shi)用加樣器(qi)，並經(jing)常校對(dui)其準確性，以(yi)避(bi)免試驗誤(wu)差(cha)。壹次加樣時間(jian)最(zui)好控(kong)制在(zai)5分(fen)鐘內，如標本(ben)數量(liang)多(duo)，推薦(jian)使(shi)用排槍加(jia)樣。

4．請(qing)每(mei)次測(ce)定(ding)的同(tong)時做標準曲(qu)線(xian)，最(zui)好做復(fu)孔。如標本(ben)中(zhong)待測(ce)物(wu)質含(han)量(liang)過(guo)高（樣本(ben)OD值大(da)於(yu)標準品孔第(di)壹孔(kong)的OD值），請(qing)先(xian)用樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)壹定(ding)倍數(shu)（n倍）後再(zai)測(ce)定(ding)，計(ji)算時請(qing)最(zui)後乘以(yi)總(zong)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)（×n×5）。

5．封(feng)板(ban)膜(mo)只限(xian)壹次性使用，以避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。

6．底(di)物(wu)請避(bi)光保(bao)存。

7．嚴(yan)格(ge)按(an)照說明(ming)書(shu)的操(cao)作進行，試驗結果判定(ding)必(bi)須以酶(mei)標儀讀數為準.

8．所有樣品(pin)，洗(xi)滌液(ye)和(he)各(ge)種(zhong)廢(fei)棄物(wu)都(dou)應按(an)傳(chuan)染物(wu)處理(li)。

9．本(ben)試劑不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組(zu)分(fen)不(bu)得混用。

保(bao)存條件(jian)及(ji)有(you)效(xiao)期

1．試劑盒保(bao)存：；2-8℃。

2．有(you)效(xiao)期：6個月