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人(ren)角(jiao)膜(mo)細胞具體操作(zuo)
取(qu)出(chu)凍存(cun)管: 根據細胞凍存(cun)記(ji)錄按標(biao)簽找(zhao)到(dao)所需細(xi)胞的編(bian)號。
從(cong)液氮罐中取出(chu)細胞盒,取(qu)出(chu)所需的(de)細(xi)胞,同(tong)時核(he)對(dui)管外(wai)的編(bian)號。
初(chu)學(xue)者易(yi)犯錯誤(wu):水浴(yu)鍋(guo)未預(yu)熱或者未預(yu)熱到(dao)37℃。
水浴(yu)鍋(guo)內凍(dong)存(cun)管太(tai)多(duo),導(dao)致傳熱不佳(jia),使融(rong)化時間(jian)延(yan)長(chang)。
離心(xin)前忘(wang)記(ji)平衡,導(dao)致離心(xin)機(ji)損壞和細(xi)胞丟失(shi)。
壹次(ci)復蘇(su)細(xi)胞過(guo)多(duo),忘(wang)記(ji)更(geng)換(huan)吸頭(tou)和吸管,導(dao)致細(xi)胞交叉(cha)汙染。
實驗前準備(bei):將水浴(yu)鍋(guo)預(yu)熱至37℃
人(ren)角(jiao)膜(mo)細胞用(yong)75%酒精擦(ca)拭(shi)紫外(wai)線照(zhao)射30min的超(chao)凈工作(zuo)臺臺面(mian)。
在(zai)超(chao)凈工作(zuo)臺中按次(ci)序(xu)擺放好消(xiao)過(guo)毒的(de)離心(xin)管、吸管、培(pei)養(yang)瓶 等(deng)。
迅速(su)解(jie)凍:
迅速(su)將凍存(cun)管投(tou)入(ru)到(dao)已經預(yu)熱的水浴(yu)鍋(guo)中迅速(su)解(jie)凍,並要不斷(duan)的(de)搖動(dong),使(shi)管中(zhong)的(de)液體迅速(su)融(rong)化。
.約(yue)-2min後
凍存(cun)管內液體*溶解,取出(chu)用(yong)酒精棉球擦(ca)拭(shi)凍存(cun)管的(de)外(wai)壁,再(zai)拿入超(chao)凈臺內。
平衡離心(xin):用(yong)架盤(pan)天平平衡後,放入(ru)離心(xin)機(ji)中3000r/min 離心(xin)3min
制備(bei)細胞懸(xuan)液:吸棄上清(qing)液。
向離心(xin)管內加(jia)入0ml培(pei)養(yang)液,吹打(da)制(zhi)成(cheng)細(xi)胞懸(xuan)液。
活化與(yu)細胞復蘇(su) 收到(dao)細(xi)胞株(zhu)包裹(guo)時, 請檢查細胞株(zhu)冷凍管是(shi)否(fou)有解凍情形(xing), 若(ruo)有請立(li)即(ji)通知(zhi)。細(xi)胞株(zhu)請盡(jin)速(su)開始培(pei)養(yang), 或立(li)即(ji)冷凍(dong)保(bao)存(cun)(置(zhi)於–70 °C, 隔夜(ye)後, 移(yi)到(dao)liq N2)。
細胞復蘇(su)的(de)原(yuan)則(ze)-快速(su)融(rong)化:必須(xu)將凍存(cun)在(zai)-96℃液氮中(zhong)的(de)細胞快速(su)融(rong)化至37℃,使細胞外(wai)凍存(cun)時(shi)的(de)冰(bing)晶(jing)迅速(su)融(rong)化,避(bi)免冰(bing)晶(jing)緩慢融(rong)化時進入細(xi)胞形成(cheng)再(zai)結(jie)晶(jing),對細(xi)胞造成(cheng)損(sun)害(hai)。
細胞計數(shu):細(xi)胞濃度(du)以(yi)5×05/ml為宜。
培(pei)養(yang)細胞將復合細胞計數(shu)要(yao)求的細胞懸(xuan)液分裝(zhuang)入培(pei)養(yang)瓶內,將培(pei)養(yang)瓶放入(ru)37℃和5%CO2的培(pei)養(yang)箱內2-4小(xiao)時(shi)(或者24-48小(xiao)時(shi))後換液繼續(xu)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang),換液的時(shi)間(jian)由細胞情況(kuang)而(er)定(ding)。
公司(si)其他(ta)銷量(liang)大產(chan)品信(xin)息(xi): 0308 尿素(su)瓊脂(zhi)基(ji)礎(chu)(pH7.) 50g/瓶(ping) 用(yong)於細(xi)菌尿素(su)酶(mei)試驗
0306 40%尿素(su)溶液 5ml×0 支(zhi)/盒 每(mei)支(zhi)用(yong)於 00ml 0308 中(zhong)
033 尿素(su)瓊脂(zhi)斜(xie)面(mian)(pH7.) 4ml×0 支(zhi)/盒 用(yong)於細(xi)菌尿素(su)酶(mei)試驗
0307 三(san)糖鐵(tie)(TSI)瓊脂(zhi) 50g/瓶(ping) 用(yong)於細(xi)菌生(sheng)化試驗(yan)
03 三(san)糖鐵(tie)(TSI)瓊脂(zhi)斜(xie)面(mian) 4ml×0 支(zhi)/盒 用(yong)於細(xi)菌生(sheng)化試驗(yan)
4 單核細胞增生(sheng)李(li)斯特(te)氏(shi)菌套裝(zhuang)生(sheng)化鑒定(ding)管 種(zhong)(SN084) 支(zhi)/套×0 套 含過(guo)氧化氫(qing)酶(mei)、動力、硝(xiao)酸鹽、葡(pu)萄(tao)糖(tang)、MR、VP、鼠(shu)李(li)糖、木(mu)糖、 、麥(mai)芽(ya)糖(tang)、七(qi)葉苷、尿素(su)酶(mei)
"SN/T 0475—95 糞(fen)鏈(lian)球菌群(qun)檢驗(yan)"
500 無(wu)菌采(cai)樣袋(dai)/均質袋(dai) 00 個(ge)/袋(dai) 用(yong)於采(cai)集、儲存(cun)、運(yun)輸(shu)及(ji)均質樣品
3004 無(wu)菌生(sheng)理(li)鹽水 5ml×0 瓶(ping)/箱 含 0.85%NaCl,用(yong)於樣品稀釋(shi)
0907 *葡(pu)萄(tao)糖(tang)肉(rou)湯 50g/瓶 用(yong)於糞(fen)鏈(lian)球菌增菌
0908 Pfizer 腸球菌選(xuan)擇(ze)性(xing)瓊脂(zhi)(PSE 瓊(qiong)脂(zhi)) 50g/瓶(ping) 用(yong)於糞(fen)鏈(lian)球菌選(xuan)擇(ze)性(xing)分離
0904 腦-心(xin)浸萃(cui)液態(tai)培(pei)養(yang)基 50g/瓶 用(yong)於糞(fen)鏈(lian)球菌確(que)證(zheng)
0905 腦-心(xin)浸萃(cui)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養(yang)基 50g/瓶 用(yong)於糞(fen)鏈(lian)球菌確(que)證(zheng)
企業(ye)信(xin)息(xi)
ENTERPRISE INFORMATION上海(hai)谷(gu)研(yan)實業有限(xian)公(gong)司
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