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人(ren)視網(wang)膜(mo)內皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)註(zhu)意(yi)事項(xiang):
實(shi)驗進行前(qian),無(wu)菌室及(ji)無(wu)菌操作(zuo)臺(laminarflow)以紫外(wai)燈(deng)照射(she)30-60分(fen)鐘滅菌,以70%ethanol擦(ca)拭(shi)無(wu)菌操作(zuo)擡(tai)面(mian),並(bing)開(kai)啟無(wu)菌操作(zuo)臺風扇運轉(zhuan)0分(fen)鐘後,才開(kai)始實驗操作(zuo)。每(mei)次操作(zuo)只處理(li)壹(yi)株(zhu)細(xi)胞(bao)株,且(qie)即(ji)使(shi)培養(yang)基相同亦不共享培養(yang)基,以避免(mian)失誤混淆(xiao)或(huo)細胞(bao)間汙染(ran)。實驗(yan)完(wan)畢後,將實驗物品(pin)帶出(chu)工(gong)作(zuo)臺,以70%ethanol擦(ca)拭(shi)無(wu)菌操作(zuo)擡(tai)面(mian)。操作(zuo)間隔(ge)應讓無(wu)菌操作(zuo)臺運轉(zhuan)人(ren)視網(wang)膜(mo)內皮(pi)細(xi)胞(bao)無(wu)菌操作(zuo)工作(zuo)區域(yu)應保持清(qing)潔及(ji)寬(kuan)敞,必(bi)要物品(pin),例(li)如試(shi)管架、吸管吸取(qu)器或(huo)吸管盒等可以暫時(shi)放置(zhi),其(qi)它實驗用品(pin)用完(wan)即應(ying)移(yi)出(chu),以利於(yu)氣(qi)流之(zhi)流通。實驗用品(pin)以70%ethanol擦(ca)拭(shi)後才帶入無(wu)菌操作(zuo)臺內。實(shi)驗(yan)操作(zuo)應在(zai)擡(tai)面(mian)之(zhi)無(wu)菌區域(yu),勿在邊緣之(zhi)非(fei)無(wu)菌區域(yu)操作(zuo)。
小心取(qu)用無(wu)菌之實(shi)驗物品(pin),避免(mian)造成(cheng)汙染(ran)。勿碰(peng)觸吸管尖頭(tou)部或(huo)是(shi)容(rong)器瓶口(kou),亦(yi)不要在(zai)打開(kai)之容(rong)器正(zheng)上(shang)方操作(zuo)實驗(yan)。容(rong)器打(da)開(kai)後,以手夾(jia)住(zhu)瓶蓋並(bing)握(wo)住(zhu)瓶身,傾(qing)斜約(yue)45°角(jiao)取(qu)用,盡(jin)量勿(wu)將瓶蓋蓋口(kou)朝(chao)上放置(zhi)桌(zhuo)面(mian)。
工(gong)作(zuo)人員(yuan)應註(zhu)意(yi)自身之安(an)全,須(xu)穿(chuan)戴實(shi)驗(yan)衣(yi)及(ji)手套後才進行實(shi)驗(yan)。對(dui)於(yu)來(lai)自人類(lei)或(huo)是(shi)病(bing)毒(du)感染(ran)之(zhi)細(xi)胞(bao)株應(ying)特(te)別小心操作(zuo),並選(xuan)擇(ze)適(shi)當等級之無(wu)菌操作(zuo)臺(至(zhi)少(shao)ClassⅡ)。操作(zuo)過(guo)程中,應(ying)避免(mian)引起aerosol之(zhi)產生(sheng),小心毒(du)性藥(yao)品(pin),例(li)如DMSO及(ji)TPA等,並避免(mian)尖銳(rui)針(zhen)頭(tou)之傷(shang)害等。
定(ding)期(qi)檢測(ce)下列(lie)項(xiang)目:5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培(pei)養(yang)箱(xiang)之(zhi)CO2濃度(du)、溫度(du)、及(ji)水盤是(shi)否有(you)汙染(ran)(水盤的水用無(wu)菌水,每(mei)周(zhou)更換)。5.3.無(wu)菌操作(zuo)臺內之(zhi)airflow壓力,定(ding)期(qi)更換紫外(wai)線燈(deng)管及(ji)HEPA過(guo)濾膜(mo),預(yu)濾網(wang)(300小(xiao)時(shi)/預(yu)濾網(wang),3000小(xiao)時(shi)/HEPA)。6.水槽可添(tian)加(jia)消毒(du)劑(Zephrin:750),定(ding)期(qi)更換水槽的水
粉(fen)末(mo)培(pei)養(yang)基配(pei)制(zhi)好(hao)後(加(jia)了血(xue)清(qing)),壹般在(zai)4度(du)盡量不要超過(guo)個月(yue),如在-20度(du)存放(fang)時(shi)間可長壹(yi)些(xie),但(dan)也(ye)不要超過(guo)3-4個月(yue),可能(neng)對(dui)於(yu)永(yong)生(sheng)化(hua)細(xi)胞株來(lai)說要求(qiu)不是(shi)太高,細(xi)胞嬌(jiao)弱(ruo),放置(zhi)時(shi)間不宜(yi)過(guo)長。
開(kai)紫外線照射(she)臺(tai)的時(shi)候,就(jiu)將培(pei)養(yang)基、酶、DHANKS液那(na)到(dao)室外讓它(ta)自(zi)然(ran)升(sheng)溫。這(zhe)樣40分(fen)鐘後,溫度(du)也(ye)升上(shang)來(lai)了。有(you)很(hen)多(duo)人將(jiang)他(ta)放(fang)到(dao)37度(du)水浴鍋(guo)裏(li)加(jia)熱。壹(yi)定(ding)要(yao)註(zhu)意(yi)水浴鍋(guo)的衛生(sheng),有(you)的常年不清(qing)洗(xi),裏面(mian)很(hen)臟,容(rong)易在外(wai)面瓶身上吸(xi)附(fu)大量細(xi)菌。因(yin)此用它(ta)的也(ye)壹定(ding)要(yao)勤(qin)換水。從水浴鍋(guo)拿出(chu)後,找個毛巾(jin)擦(ca)幹上(shang)面(mian)的水。
細(xi)胞 停(ting)滯(zhi)期(qi)(Stagnate phase) 細(xi)胞數量達(da)到(dao)飽和(he)密度(du)後,如不及(ji)時(shi)進行(xing)傳代(dai),細胞就會停(ting)止(zhi)增(zeng)殖,進入(ru)停止(zhi)期(qi)。此時(shi)細胞(bao)數持平(ping),故(gu)也(ye)稱平臺(tai)期(qi)(Plateau phase)。停(ting)滯(zhi)期(qi)細(xi)胞(bao)雖不增殖,但(dan)仍(reng)有(you)代謝(xie)活(huo)動(dong)。如不進行(xing)分離(li)傳(chuan)代,細(xi)胞會因(yin)培(pei)養(yang)液中營(ying)養(yang)耗(hao)盡(jin)、代(dai)謝(xie)產(chan)物積聚(ju)、pH 下降(jiang)等因(yin)素中毒(du),出(chu)現(xian)形(xing)態改變,貼(tie)壁細胞(bao)會脫落,嚴重的會發(fa)生(sheng)死亡(wang),因(yin)此,應及(ji)時(shi)傳代(dai)。
公司更(geng)多(duo)產品(pin)信(xin)息:0903 KF 鏈(lian)球(qiu)菌瓊脂(zhi)培養(yang)基 000ml/瓶 含 TTC,用於糞鏈(lian)球(qiu)菌濾膜(mo)計(ji)數
0706 3% ml×0 支/盒 用於過(guo)氧化(hua)氫(qing)酶試(shi)驗(yan)
"SN/T 0477—95 B 群鏈球(qiu)菌檢驗(yan)"
09 牛心湯(tang)培(pei)養(yang)基 50g/瓶 用於鏈球(qiu)菌增菌
093 選(xuan)擇(ze)性牛心湯(tang)增(zeng)菌培養(yang)基 50g/瓶 用於鏈球(qiu)菌選(xuan)擇(ze)性增(zeng)菌
094 牛心湯(tang)瓊(qiong)脂 50g/瓶 用於綿羊血(xue)瓊(qiong)脂平(ping)板制(zhi)備(bei)
095 Todd-Hewitt 肉(rou)湯(tang) 50g/瓶 用於 β-溶血(xue)素制(zhi)備(bei)
00 革(ge)蘭氏染(ran)色(se)液 0ml×4 支/盒 用於細(xi)菌的革蘭氏染(ran)色(se)
"SN/T 933—007 腸(chang)球(qiu)菌檢驗(yan)"
030 緩(huan)沖(chong)蛋(dan)白腖(dong)水(BPW) 50g/瓶 用於細菌增菌
3005 無(wu)菌生(sheng)理(li)鹽水 9ml×0 支/箱 含 0.85%NaCl,用於樣品(pin)稀(xi)釋
0903 KF 鏈(lian)球(qiu)菌瓊脂(zhi)培養(yang)基 000ml/瓶 含 TTC,用於糞鏈(lian)球(qiu)菌濾膜(mo)計(ji)數
090 腸球(qiu)菌瓊脂(zhi)(膽汁(zhi)七(qi)葉苷疊氮(dan)鈉(na)瓊(qiong)脂) 50g/瓶 用於腸球(qiu)菌計(ji)數
0909 膽汁七(qi)葉苷瓊脂 50g/瓶 用於腸球(qiu)菌確(que)證
0904 腦-心浸萃液態培(pei)養(yang)基 50g/瓶 用於確(que)證試(shi)驗(yan)
企業信(xin)息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海(hai)谷(gu)研(yan)實業有(you)限公司
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