【概(gai)要(yao)描(miao)述(shu)】兔抗人(ren)白蛋(dan)白抗體,抗體種類(lei),多種試劑現(xian)貨供應(ying)!

兔(tu)抗人(ren)白蛋(dan)白抗體*,兔(tu)抗人(ren)白蛋(dan)白抗體用於(yu)免疫組(zu)化(hua)實驗(yan)，WB實驗(yan)，相應的標(biao)記(ji)抗體有(you)HRP標(biao)記(ji)抗體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存(cun)條(tiao)件】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本(ben)品應(ying)在低溫下(xia)保存，長(chang)時(shi)間在暴露在空(kong)氣中，含量(liang)會(hui)有(you)所降(jiang)低。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材料(liao)和方(fang)法(fa)

　　. 材料(liao) 人(ren)成骨(gu)肉瘤MG63細(xi)胞為本(ben)實驗(yan)室(shi)保存。重(zhong)組(zu)質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖(yan)教授(shou)惠贈(zeng)。脂質體 2000( Invitrogen公司(si))。高(gao)糖DMEM培(pei)養基(美國(guo)Gibco 公司(si))，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(Hyclone公司(si))，和EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨(chen)科(ke)技(ji)有(you)限公司(si))。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印跡實驗(yan) MG63細(xi)胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養皿(min)中，待細(xi)胞密(mi)度(du)達到60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後換無血(xue)清培(pei)養基培養3 h，分(fen)別加入(ru)濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後裂(lie)解細(xi)胞，離(li)心(xin)取(qu)上(shang)清加(jia)入凝膠加樣緩沖(chong)液(ye),沸(fei)水(shui)浴上(shang)加(jia)熱5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹抗分(fen)別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外(wai)激酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其突變(bian)體MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染至MG63細(xi)胞，48 h後采用免疫共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同時(shi)加入(ru)抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶(mei)反應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)中，30℃反應(ying)40 min。反應產(chan)物進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜，應(ying)用放(fang)射(she)自(zi)顯(xian)影技(ji)術(shu)檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水平。

　　.4 體外(wai)SSHL磷酸酶(mei)活性測(ce)定(ding)實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細(xi)胞，48 h後，采用免疫共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體，對照組為抗IgG抗體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或(huo)同時(shi)加入(ru)抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(ying)2 h。反應產(chan)物進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹抗分(fen)別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公司(si)更多產(chan)品優惠:

小(xiao)鼠抗內皮(pi)細(xi)胞抗體AECA抗體    00mg
43    鼠抗人(ren)p57kIP2單克(ke)隆抗體    p57kIP2        小(xiao)鼠抗利尿(niao)激素(su)/血(xue)管(guan)加壓(ya)素(su)/加(jia)壓(ya)素(su)ADH/VP/AVP抗體     000mg
    小(xiao)鼠抗酒石(shi)酸酸性磷酸酶(mei)5bTRACP-5b抗體    0mg/ml
432    兔(tu)抗人(ren)p57Kip2多克(ke)隆抗體    p57kIP2        小(xiao)鼠抗甲狀(zhuang)腺(xian)過氧(yang)化(hua)物酶(mei)抗體TPO-Ab抗體     50mg/2-3ml
433    鼠抗人(ren)p63單克(ke)隆抗體    p63        小(xiao)鼠抗肌內(nei)膜(mo)抗體IgAEMA IgA抗體    00mg/2-5ml
434    兔(tu)抗人(ren)鈣粘(zhan)附蛋白(bai)（廣譜）多克(ke)隆抗體    Pan Cadherin       小(xiao)鼠抗紅(hong)細(xi)胞抗體RBC抗體     0mg
435    兔(tu)抗人(ren)胰多肽(tai)多克(ke)隆抗體    Pancreatic Polypeptide      小(xiao)鼠抗核膜糖蛋(dan)白(bai)20抗體gp20抗體     50mg
436    兔(tu)抗牛(niu)乳頭(tou)狀(zhuang)瘤病(bing)毒(du)多克(ke)隆抗體    Papilloma Virus      小(xiao)鼠抗核抗體ANA抗體     00mg
     小(xiao)鼠抗單鏈DNA抗體/變(bian)性DNA抗體ssDNA抗體     0mg/ml
437    兔(tu)抗牛(niu)乳頭(tou)瘤病(bing)毒(du)多克(ke)隆抗體    Papilloma Virus(PV)       小(xiao)鼠抗單鏈DNA抗體/變(bian)性DNA抗體ssDNA抗體     50mg/2-3ml