【概要(yao)描述】兔抗(kang)人IgG-F免疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體(ti),抗(kang)體(ti)種類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑現貨(huo)供(gong)應!

兔抗(kang)人IgG-F免疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體(ti)*,兔抗(kang)人IgG-F免疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體(ti)用於(yu)免疫(yi)組(zu)化(hua)實驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相(xiang)應的標記抗(kang)體(ti)有HRP標記抗(kang)體(ti)，FITC標記，BIO等(deng)。

【貯存(cun)條(tiao)件】： 貯存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品(pin)應在低溫下保存，長時間在暴(bao)露(lu)在空氣中(zhong)，含量(liang)會有(you)所(suo)降低。

規格：0.5ml

材料(liao)和方法

　　. 材料(liao) 人成骨(gu)肉瘤(liu)MG63細胞(bao)為本(ben)實驗(yan)室(shi)保存。重組質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由王巖(yan)教(jiao)授(shou)惠(hui)贈(zeng)。脂質體(ti) 2000( Invitrogen公司(si))。高糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(ji)(美(mei)國(guo)Gibco 公司)，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司)，和EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑盒(he)(邁(mai)晨科(ke)技有限(xian)公(gong)司(si))。

　　.2 蛋白印跡(ji)實驗(yan) MG63細胞(bao)鋪於35 mmol/L培(pei)養(yang)皿(min)中，待(dai)細胞(bao)密(mi)度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換無血清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分(fen)別加(jia)入濃(nong)度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵(fu)育0 min後(hou)裂解細胞(bao)，離(li)心(xin)取上清(qing)加(jia)入凝膠(jiao)加(jia)樣緩沖(chong)液(ye),沸(fei)水浴上加(jia)熱5 min，上樣、電泳、轉膜(mo)、雜(za)交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體(ti)外激酶(mei)測定(ding) MycSSHL(WT)及其(qi)突變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分別轉染至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采用免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑盒(he)的方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回(hui)收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同時加(jia)入抑(yi)制劑KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶(mei)反應緩沖(chong)液(ye)中，30℃反應40 min。反應產物進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳、轉膜(mo)，應用放射自(zi)顯(xian)影技(ji)術檢測32P 標記的SSHL水(shui)平。

　　.4 體(ti)外SSHL磷(lin)酸酶(mei)活(huo)性(xing)測定(ding)實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采用免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑盒(he)的方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回(hui)收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同時加(jia)入抑(yi)制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應緩沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產物進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳、轉膜(mo)、雜(za)交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色。

本(ben)公司更(geng)多(duo)產(chan)品(pin)優(you)惠(hui):

 鼠(shu)抗(kang)人p27蛋(dan)白單克隆(long)抗(kang)體(ti)    p27 Protein        小鼠(shu)抗(kang)血小(xiao)板(ban)抗(kang)體(ti)IgG/M/APA-IgG/M/A抗(kang)體(ti)     0mg/ml
424    鼠(shu)抗(kang)人p27Kip蛋(dan)白單克隆(long)抗(kang)體(ti)    p27Kip        小鼠(shu)抗(kang)心(xin)磷(lin)脂抗(kang)體(ti)IgMACA-IgM抗(kang)體(ti)    50mg/2-3ml
    小鼠(shu)抗(kang)心(xin)磷(lin)脂抗(kang)體(ti)IgGACA-IgG抗(kang)體(ti)    0mg
425    鼠(shu)抗(kang)人p34cdc2單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)    p34 cdc2/Serine-Threonine Kinase      小鼠(shu)抗(kang)心(xin)磷(lin)脂抗(kang)體(ti)IgAACA-IgA抗(kang)體(ti)    50mg
    小鼠(shu)抗(kang)心(xin)肌抗(kang)體(ti)AMA抗(kang)體(ti)    00mg
426    鼠(shu)抗(kang)人p53基(ji)因(yin)（組(zu)合(he)型）單克隆(long)抗(kang)體(ti)    p53        小鼠(shu)抗(kang)小核(he)糖(tang)核(he)蛋白/Sm抗(kang)體(ti)snRNP/Sm抗(kang)體(ti)     000mg
427    鼠(shu)抗(kang)人p53單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)    P53 Oncoprotein       小鼠(shu)抗(kang)小核(he)糖(tang)核(he)蛋白/Sm抗(kang)體(ti)snRNP/Sm抗(kang)體(ti)     0mg/ml
428    鼠(shu)抗(kang)人p53單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)    p53 Protein 80        小鼠(shu)抗(kang)透明(ming)帶(dai)抗(kang)體(ti)aZP抗(kang)體(ti)     50mg/2-3ml
429    鼠(shu)抗(kang)人p53單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)    p53 Protein BP53.2        小鼠(shu)抗(kang)平滑(hua)肌(ji)抗(kang)體(ti)ASMA抗(kang)體(ti)    00mg/2-5ml
    小鼠(shu)抗(kang)受體(ti)ATR抗(kang)體(ti)    0mg
430    鼠(shu)抗(kang)人p53單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)    p53 Protein DO-7       小鼠(shu)抗(kang)Ⅲ抗(kang)體(ti)AT-Ⅲ抗(kang)體(ti)    50mg