【概要描(miao)述(shu)】兔(tu)抗(kang)人小鼠IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體(ti),抗(kang)體(ti)種(zhong)類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑現貨供應!

兔(tu)抗(kang)人小鼠IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體(ti)*,兔(tu)抗(kang)人小鼠IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體(ti)用於(yu)免疫組化(hua)實驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相(xiang)應的標記(ji)抗(kang)體(ti)有HRP標(biao)記抗(kang)體(ti)，FITC標記(ji)，BIO等。

【貯存(cun)條件(jian)】： 貯存(cun)於-20℃. 本(ben)品(pin)應在低(di)溫(wen)下保存(cun)，長(chang)時(shi)間(jian)在(zai)暴露(lu)在(zai)空(kong)氣中，含量會有所(suo)降低(di)。

規格(ge)：0.5ml

材料(liao)和(he)方(fang)法

　　. 材料(liao) 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤(liu)MG63細(xi)胞為本(ben)實驗(yan)室(shi)保存(cun)。重組質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖(yan)教授惠贈。脂質體(ti) 2000( Invitrogen公司)。高(gao)糖DMEM培養(yang)基(ji)(美(mei)國Gibco 公(gong)司)，胎牛血(xue)清(Hyclone公司)，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫(yi)共沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁晨科(ke)技(ji)有限(xian)公(gong)司)。

　　.2 蛋白印跡實(shi)驗(yan) MG63細(xi)胞鋪(pu)於35 mmol/L培(pei)養(yang)皿(min)中，待(dai)細胞密(mi)度達(da)到60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後換(huan)無(wu)血清培養(yang)基(ji)培(pei)養3 h，分(fen)別加(jia)入濃(nong)度(du)為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後裂(lie)解細胞，離心取(qu)上(shang)清加(jia)入凝膠(jiao)加(jia)樣(yang)緩沖(chong)液,沸水浴(yu)上(shang)加(jia)熱5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交〔壹抗(kang)分別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體(ti)外(wai)激(ji)酶測(ce)定 MycSSHL(WT)及其突變體(ti)MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後采(cai)用免疫(yi)共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照(zhao)組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重組(zu)活性(xing)CaMKⅡ(單獨或同(tong)時加(jia)入抑(yi)制劑KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反(fan)應緩沖(chong)液中，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產(chan)物進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)，應用放(fang)射(she)自顯影技(ji)術(shu)檢測32P 標記的SSHL水平(ping)。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷(lin)酸(suan)酶(mei)活(huo)性(xing)測定實驗(yan) MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後，采(cai)用免疫(yi)共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照(zhao)組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同(tong)時加(jia)入抑(yi)制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產(chan)物進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(壹抗(kang)分別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯色(se)。

本(ben)公司更多(duo)產(chan)品(pin)優惠:

鼠抗(kang)人孕激(ji)素(su)受體(ti)單克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Progesterone Receptor (PR)        小鼠巨(ju)噬細(xi)胞集落刺(ci)激(ji)因子M-CSF抗(kang)體(ti)    50mg
449    兔(tu)抗(kang)人孕激(ji)素(su)受體(ti)單克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Progesterone Receptor (PR)        小鼠解(jie)整(zheng)合(he)素(su)樣(yang)金屬蛋(dan)白酶9ADAM9抗(kang)體(ti)     0mg
450    兔(tu)抗(kang)人催乳(ru)素(su)多克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Prolactin(PRL)        小鼠解(jie)整(zheng)合(he)素(su)樣(yang)金屬蛋(dan)白酶8ADAM8抗(kang)體(ti)    50mg
45    小鼠抗(kang)人增殖細(xi)胞核抗(kang)原單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)        Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA)     小鼠解(jie)脲(niao)脲(niao)原(yuan)體(ti)抗(kang)體(ti)UU-Ab抗(kang)體(ti)     0mg
452    兔(tu)抗(kang)人前(qian)列腺特異(yi)性(xing)抗(kang)原多(duo)克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Prostate Specific Antigen      小鼠結(jie)合珠蛋白/觸珠蛋白Hpt/HP抗(kang)體(ti)    0mg
453    鼠抗(kang)人前(qian)列腺特異(yi)性(xing)抗(kang)原單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Prostate Specific Antigen (PSA)       小鼠角(jiao)化(hua)細胞內分(fen)泌因子KAF/雙調(tiao)蛋(dan)白AR抗(kang)體(ti)     
454    鼠抗(kang)人前(qian)列腺酸(suan)性(xing)磷(lin)酸(suan)酶(mei)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Prostatic Acid Phosphatase (PsAP)     小鼠角(jiao)化(hua)細胞內分(fen)泌因子KAF/雙調(tiao)蛋(dan)白AR抗(kang)體(ti)    
455    兔(tu)抗(kang)人前(qian)列腺酸(suan)性(xing)磷(lin)酸(suan)酶(mei)多(duo)克(ke)隆抗(kang)體(ti)    Prostatic Acid Phosphatase (PsAP)       小鼠膠(jiao)原酶(mei)IICollagenase II抗(kang)體(ti)     
456    鼠抗(kang)人雌(ci)激(ji)素(su)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白單克(ke)隆抗(kang)體(ti)    pS2 Peptide        小鼠膠(jiao)原酶(mei)ICollagenase I抗(kang)體(ti)     
457    兔(tu)抗(kang)人PTEN多(duo)克(ke)隆抗(kang)體(ti)    PTEN       小鼠降(jiang)鈣(gai)素(su)原PCT抗(kang)體(ti)     0.5ml