【概要描(miao)述】兔(tu)抗(kang)人小鼠(shu)血(xue)清(qing)抗(kang)體,抗(kang)體種類,多種試(shi)劑(ji)現(xian)貨供(gong)應!

兔抗(kang)人小鼠(shu)血(xue)清(qing)抗(kang)體*,兔抗(kang)人小鼠(shu)血(xue)清(qing)抗(kang)體用於免疫(yi)組(zu)化實(shi)驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相(xiang)應的(de)標記抗(kang)體有(you)HRP標記抗(kang)體，FITC標記，BIO等(deng)。

【貯存(cun)條件(jian)】： 貯(zhu)存(cun)於-20℃. 本品(pin)應在(zai)低溫(wen)下(xia)保存(cun)，長時間(jian)在(zai)暴露在(zai)空氣(qi)中，含(han)量(liang)會有(you)所降低(di)。

規格(ge)：0.5ml

材(cai)料(liao)和方(fang)法(fa)

　　. 材(cai)料(liao) 人成骨(gu)肉瘤(liu)MG63細(xi)胞為(wei)本實(shi)驗(yan)室保存(cun)。重組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王巖(yan)教授惠贈。脂質(zhi)體 2000( Invitrogen公(gong)司)。高糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(ji)(美(mei)國(guo)Gibco 公(gong)司)，胎牛(niu)血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司)，和EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫(yi)共沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(邁晨(chen)科技有(you)限(xian)公(gong)司)。

　　.2 蛋白印(yin)跡(ji)實(shi)驗(yan) MG63細胞(bao)鋪(pu)於35 mmol/L培(pei)養(yang)皿中(zhong)，待(dai)細胞(bao)密度達(da)到60%～70%時，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後換(huan)無(wu)血清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分別(bie)加入(ru)濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解(jie)細(xi)胞(bao)，離(li)心(xin)取上清(qing)加入(ru)凝(ning)膠加樣緩沖液,沸(fei)水浴(yu)上(shang)加熱(re)5 min，上(shang)樣、電泳、轉膜(mo)、雜(za)交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體外激(ji)酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變(bian)體MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉染至MG63細胞，48 h後(hou)采用免疫(yi)共沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒的(de)方法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶反(fan)應緩(huan)沖液中，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電泳、轉膜(mo)，應用放射自顯影技術(shu)檢(jian)測(ce)32P 標記的(de)SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷(lin)酸(suan)酶活性(xing)測(ce)定(ding)實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)，采用免疫(yi)共沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒的(de)方法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應緩(huan)沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電泳、轉膜(mo)、雜(za)交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯色。

本公(gong)司更多產(chan)品(pin)優惠(hui):

鼠(shu)抗(kang)人PTEN/MMAC單克(ke)隆(long)抗(kang)體    PTEN/MMAC        小鼠(shu)降鈣(gai)素(su)基(ji)因(yin)相(xiang)關肽(tai)CGRP抗(kang)體    0.5ml
459    鼠(shu)抗(kang)人ras蛋白（p2）單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    ras Protein       小鼠(shu)降鈣(gai)素(su)CT抗(kang)體    0.5ml
460    鼠(shu)抗(kang)人視(shi)網膜(mo)母細(xi)胞(bao)瘤基(ji)因(yin)蛋(dan)白單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    Rb Gene Protein        小鼠(shu)堿(jian)性(xing)磷(lin)酸(suan)酶ALP抗(kang)體     0.5ml
46    鼠(shu)抗(kang)人ret癌基(ji)因(yin)蛋(dan)白單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    ret Oncoprotein      小鼠(shu)甲狀(zhuang)腺素(su)抗(kang)體TAb抗(kang)體    0.5ml
462    鼠(shu)抗(kang)人視(shi)網膜(mo)母細(xi)胞(bao)瘤蛋(dan)白單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    Retinoblastoma Protein (Rb)      小鼠(shu)甲狀(zhuang)腺素(su)T4抗(kang)體    0.5ml
463    兔抗(kang)牛(niu)S-00多克(ke)隆(long)抗(kang)體    S-00       小鼠(shu)甲狀(zhuang)腺球(qiu)蛋白TG抗(kang)體    0.5ml
464    鼠(shu)抗(kang)人S-00蛋白單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    S-00 Protein       小鼠(shu)甲狀(zhuang)腺過(guo)氧化物酶TPO抗(kang)體    0.5ml
465    兔抗(kang)人S-00蛋白多克(ke)隆(long)抗(kang)體    S-00 Protein       小鼠(shu)甲狀(zhuang)旁腺(xian)激(ji)素(su)相(xiang)關蛋白PTHrP抗(kang)體    0.5ml
466    兔抗(kang)人S-00α蛋白多克(ke)隆(long)抗(kang)體    S-00α Protein       小鼠(shu)甲種胎兒球(qiu)蛋白/甲胎(tai)蛋白AFP抗(kang)體    0.5ml
467    鼠(shu)抗(kang)人S-00β蛋白單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體    S-00βProtein       小鼠(shu)甲基(ji)化酶Methylase抗(kang)體    0.5ml
468    鼠(shu)抗(kang)人肺小細(xi)胞癌(ai)單克隆(long)抗(kang)體    SCLC       小鼠(shu)己糖激(ji)酶HK抗(kang)體    0.5ml