【概要(yao)描(miao)述】兔抗(kang)豬(zhu)IgG免疫(yi)血(xue)清抗體,抗體(ti)種類,多種試劑現(xian)貨(huo)供應!

兔(tu)抗(kang)豬(zhu)IgG免疫(yi)血(xue)清抗體*,兔(tu)抗(kang)豬(zhu)IgG免疫(yi)血(xue)清抗體用於免疫(yi)組(zu)化(hua)實驗，WB實驗，相(xiang)應的(de)標(biao)記抗(kang)體(ti)有(you)HRP標(biao)記抗(kang)體(ti)，FITC標(biao)記，BIO等(deng)。

【貯存(cun)條件(jian)】： 貯存(cun)於-20℃. 本品應在(zai)低(di)溫(wen)下(xia)保(bao)存(cun)，長時間(jian)在暴露在空(kong)氣(qi)中，含(han)量(liang)會有所(suo)降(jiang)低。

規格(ge)：0.5ml

材(cai)料和方(fang)法(fa)

　　. 材(cai)料 人成骨(gu)肉瘤MG63細胞(bao)為(wei)本實驗室保(bao)存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖教授惠(hui)贈。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高(gao)糖DMEM培養(yang)基(美國Gibco 公(gong)司(si))，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(Hyclone公(gong)司(si))，*和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁(mai)晨科技有(you)限公(gong)司(si))。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡實驗 MG63細胞(bao)鋪(pu)於35 mmol/L培養皿中(zhong)，待細胞(bao)密(mi)度(du)達到(dao)60%～70%時，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換無(wu)血(xue)清培養基培(pei)養(yang)3 h，分別加入濃度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育0 min後(hou)裂解細胞(bao)，離(li)心取上(shang)清加入凝膠加樣緩(huan)沖(chong)液(ye),沸水浴(yu)上(shang)加熱5 min，上(shang)樣(yang)、電泳、轉膜、雜(za)交(jiao)〔壹(yi)抗分別為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體(ti)外(wai)激酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變體(ti)MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuan)染至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采用免疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加入抑制(zhi)劑KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶反應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)中，30℃反應40 min。反應(ying)產(chan)物進行SDSPAGE電泳、轉膜，應(ying)用放射(she)自(zi)顯(xian)影技術(shu)檢測(ce)32P 標(biao)記的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷酸酶(mei)活性(xing)測(ce)定(ding)實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采用免疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加入抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應緩(huan)沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應(ying)產(chan)物進行SDSPAGE電泳、轉膜、雜(za)交(jiao)(壹(yi)抗分別為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色。

本(ben)公(gong)司(si)更(geng)多產(chan)品優惠(hui):

 鼠(shu)抗(kang)人金(jin)屬蛋白酶組(zu)織(zhi)抑制(zhi)因(yin)子(zi)單(dan)克隆抗體(ti)    TIMP-      小(xiao)鼠骨(gu)特異(yi)性(xing)堿性(xing)磷酸酶(mei)BALP-B抗體    0.5ml
497    鼠抗人(ren)金(jin)屬蛋白酶組(zu)織(zhi)抑制(zhi)因(yin)子(zi)2單(dan)克隆抗體(ti)    TIMP-2        小(xiao)鼠骨(gu)橋(qiao)素OPN抗(kang)體(ti)    0.5ml
498    鼠抗(kang)人(ren)拓(tuo)撲異(yi)構酶(mei)Ⅱα單(dan)克隆抗體(ti)    Topoisomerase II α     小(xiao)鼠骨(gu)膠(jiao)原交(jiao)聯(lian)Cr抗(kang)體(ti)    0.5ml
499    鼠(shu)抗人TRA cP單(dan)克隆抗體(ti)    TRAcP       小(xiao)鼠骨(gu)鈣(gai)素/骨(gu)蛋(dan)白OT/BGP抗(kang)體(ti)    
500    鼠抗人(ren)轉化(hua)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)α單(dan)克隆抗體(ti)    Transforming Growth Factor α        小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)受(shou)體(ti)ⅡBMPR-Ⅱ抗體(ti)    
50    兔(tu)抗(kang)人(ren)轉化(hua)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)β多克隆抗體(ti)    Transforming Growth Factor β       小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)受(shou)體(ti)ABMPR-A抗體(ti)    0.5ml
502    兔(tu)抗(kang)人(ren)轉化(hua)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)β2多克隆抗體(ti)    Transforming Growth Factor β2     小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)7BMP-7抗(kang)體(ti)    ml
    小鼠(shu)骨(gu)成型蛋白(bai)4BMP-4抗(kang)體(ti)     5ml
503    兔抗(kang)人(ren)轉(zhuan)化(hua)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)β3多克隆抗體(ti)    Transforming Growth Factor β3       小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)4BMP-4抗(kang)體(ti)    0.5ml
504    鼠抗(kang)人(ren)轉(zhuan)谷酰(xian)氨(an)酶II單(dan)克隆抗體(ti)    TransglutaminaseII(TGaseII)        小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)2BMP-2抗(kang)體(ti)     ml
505    鼠抗(kang)人(ren)肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)C單(dan)克隆抗體(ti)    Troponin C       小(xiao)鼠骨(gu)成型蛋白(bai)2BMP-2抗(kang)體(ti)    5ml