【概要描述(shu)】兔(tu)抗(kang)狗IgG免(mian)疫血(xue)清(qing)抗(kang)體,抗體(ti)種類(lei),多種試劑(ji)現(xian)貨(huo)供應!

兔抗(kang)狗IgG免(mian)疫血(xue)清(qing)抗(kang)體*,兔抗(kang)狗IgG免(mian)疫血(xue)清(qing)抗(kang)體用於(yu)免(mian)疫組化(hua)實(shi)驗，WB實(shi)驗，相(xiang)應(ying)的標記(ji)抗(kang)體有HRP標記(ji)抗體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條件(jian)】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本品(pin)應在低(di)溫(wen)下保存，長時(shi)間(jian)在(zai)暴露在(zai)空(kong)氣(qi)中(zhong)，含量(liang)會(hui)有(you)所(suo)降低(di)。

規格(ge)：0.5ml

材(cai)料(liao)和方法

　　. 材(cai)料(liao) 人成(cheng)骨肉(rou)瘤(liu)MG63細(xi)胞為本實(shi)驗室(shi)保存。重(zhong)組質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由王(wang)巖(yan)教授(shou)惠(hui)贈。脂質體(ti) 2000( Invitrogen公司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培養基(美(mei)國Gibco 公(gong)司(si))，胎(tai)牛(niu)血清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨科(ke)技有限公(gong)司(si))。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡實驗 MG63細(xi)胞鋪於(yu)35 mmol/L培養皿(min)中(zhong)，待(dai)細(xi)胞密度(du)達(da)到(dao)60%～70%時，轉染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換無血清(qing)培養基培養3 h，分(fen)別(bie)加入濃度(du)為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂解(jie)細胞，離心(xin)取(qu)上(shang)清(qing)加(jia)入凝膠(jiao)加(jia)樣緩(huan)沖(chong)液,沸(fei)水浴(yu)上(shang)加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣、電泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外激(ji)酶測定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其突變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采用(yong)免(mian)疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方法及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加(jia)入抑制劑(ji)KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反應(ying)緩(huan)沖(chong)液中(zhong)，30℃反應40 min。反應產物(wu)進行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜，應(ying)用(yong)放射(she)自(zi)顯影技術檢測32P 標記(ji)的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷(lin)酸(suan)酶活性(xing)測定(ding)實(shi)驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采用(yong)免(mian)疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方法及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時加(jia)入抑制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反應2 h。反應產物(wu)進行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色(se)。

本公(gong)司(si)更(geng)多產品(pin)優(you)惠(hui):

小鼠核(he)因子(zi)κB受體(ti)活化(hua)因子(zi)配基RANKL抗(kang)體(ti)    0.5ml
488    鼠抗(kang)人(ren)血(xue)小板反應(ying)蛋(dan)白(bai)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thrombospondin(TSP)       小鼠過氧化(hua)物(wu)酶體增殖因子(zi)活(huo)化(hua)受體(ti)γ PPAR-γ抗體    0.5ml
489    鼠抗(kang)人(ren)胸(xiong)苷磷(lin)酸(suan)化(hua)酶單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thymidine phosphorylase     小鼠過氧化(hua)物(wu)酶體增殖物激(ji)活受體(ti)αPPAR-α抗體     0.5ml
490    鼠抗(kang)人(ren)胸(xiong)苷酸合(he)成(cheng)酶記單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thymidylate Synthase/5-Fu Resistance Marker      小鼠過敏毒素/補體片(pian)斷4aC4a抗(kang)體    0.5ml
49    鼠抗(kang)人(ren)甲狀(zhuang)腺球蛋(dan)白(bai)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thyroglobulin(Tg)      小鼠骨粘連蛋(dan)白(bai)ON抗體(ti)    0.5ml
492    鼠兔(tu)抗(kang)人(ren)甲狀(zhuang)腺球蛋(dan)白(bai)多克(ke)隆抗(kang)體    Thyroglobulin(Tg)        小鼠骨形成(cheng)蛋(dan)白(bai)BMPs抗體(ti)     0.5ml
493    鼠抗(kang)人(ren)甲狀(zhuang)腺蛋(dan)白(bai)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thyroglobulin(Tg)        小鼠骨形成(cheng)蛋(dan)白(bai)6BMP-6抗體(ti)     0.5ml
494    兔(tu)抗人甲狀(zhuang)腺蛋(dan)白(bai)多克(ke)隆抗(kang)體    Thyroglobulin(Tg)        小鼠骨退化(hua)特(te)異(yi)標誌(zhi)物CTX-2抗(kang)體(ti)     0.5ml
    小鼠骨退化(hua)特(te)異(yi)標誌(zhi)物CTX-2抗(kang)體(ti)     0.5ml
495    鼠抗(kang)人(ren)促(cu)甲狀(zhuang)腺素單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Thyroid Stimulating Hormone (TSH)      小鼠骨退化(hua)特(te)異(yi)標誌(zhi)物CTX-2抗(kang)體(ti)     0.5ml