【概(gai)要(yao)描(miao)述】羊抗(kang)人IgG（全分子）免疫血(xue)清(qing)抗(kang)體,抗(kang)體種(zhong)類(lei),多(duo)種(zhong)試劑(ji)現(xian)貨(huo)供應(ying)!

羊抗(kang)人IgG（全分子）免疫血(xue)清(qing)抗(kang)體*,羊抗(kang)人IgG（全分子）免疫血(xue)清(qing)抗(kang)體用(yong)於(yu)免疫組化實(shi)驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相(xiang)應(ying)的標(biao)記(ji)抗(kang)體有HRP標記(ji)抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存(cun)條(tiao)件】： 貯存(cun)於(yu)-20℃. 本品(pin)應(ying)在低(di)溫下(xia)保(bao)存(cun)，長(chang)時間在暴露(lu)在(zai)空(kong)氣(qi)中，含(han)量(liang)會有所(suo)降(jiang)低(di)。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材(cai)料(liao)和方(fang)法

　　. 材(cai)料(liao) 人成(cheng)骨肉(rou)瘤(liu)MG63細(xi)胞為(wei)本(ben)實(shi)驗(yan)室保(bao)存(cun)。重(zhong)組質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由王巖(yan)教授(shou)惠贈(zeng)。脂質體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培養(yang)基(美(mei)國(guo)Gibco 公司)，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，和EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨科(ke)技(ji)有限(xian)公司)。

　　.2 蛋(dan)白印(yin)跡(ji)實驗(yan) MG63細(xi)胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿(min)中，待細(xi)胞密(mi)度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清(qing)培養(yang)基培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入濃(nong)度(du)為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育0 min後(hou)裂(lie)解(jie)細(xi)胞，離(li)心(xin)取上清加(jia)入凝(ning)膠(jiao)加(jia)樣緩(huan)沖(chong)液,沸(fei)水浴(yu)上加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳、轉膜、雜交〔壹抗(kang)分別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體外(wai)激酶測定(ding) MycSSHL(WT)及其(qi)突變(bian)體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染(ran)至MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采(cai)用免(mian)疫共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組活性(xing)CaMKⅡ(單獨或(huo)同(tong)時加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶反應(ying)緩(huan)沖(chong)液中，30℃反應(ying)40 min。反應(ying)產物進行SDSPAGE電(dian)泳、轉膜，應(ying)用放(fang)射自(zi)顯(xian)影(ying)技(ji)術檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的SSHL水(shui)平。

　　.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸(suan)酶活性(xing)測定(ding)實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采(cai)用免(mian)疫共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或(huo)同(tong)時加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反應(ying)緩(huan)沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(ying)2 h。反應(ying)產物進行SDSPAGE電(dian)泳、轉膜、雜交(壹抗(kang)分別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色。

本(ben)公(gong)司(si)更多(duo)產品(pin)優惠:

CD2 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠5羥(qiang)色胺5-HT抗(kang)體
CD23    小鼠5核(he)苷酸(suan)酶5-NT抗(kang)體
CD23 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅳ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅳ抗(kang)體
CD3 epsilon    小鼠Ⅲ型(xing)前膠(jiao)原肽(tai)PⅢNP抗(kang)體
CD30 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅱ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅱ抗(kang)體
CD3 多(duo)克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠25羥(qiang)基325OHD3/25 HVD3抗(kang)體
CD34    小鼠Ⅰ型(xing)前膠(jiao)原羧(suo)基端(duan)肽(tai)PⅠCP抗(kang)體
CD34 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅰ型(xing)前膠(jiao)原C末(mo)端(duan)肽(tai)CⅠCP抗(kang)體
CD3單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原交聯羧(suo)基末(mo)端(duan)肽(tai)ⅠCTP抗(kang)體 
CD43 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原交聯羧(suo)基末(mo)端(duan)肽(tai)ⅠCTP抗(kang)體 
CD44    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原N末(mo)端(duan)肽(tai)NTX抗(kang)體 
CD45RO 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原C端(duan)肽(tai)CTX-Ⅰ抗(kang)體 
CD4單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原C端(duan)肽(tai)CTX-Ⅰ抗(kang)體 
CD5    小鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅰ 抗(kang)體
CD56 單克(ke)隆(long)抗(kang)體    小鼠7羥(qiang)孕酮(tong)7-OHP抗(kang)體