【概(gai)要描述】羊(yang)抗人(ren)IgG、A、M免疫(yi)血清抗(kang)體,抗(kang)體種(zhong)類,多(duo)種(zhong)試劑(ji)現貨(huo)供(gong)應(ying)!

羊(yang)抗(kang)人(ren)IgG、A、M免疫(yi)血清抗(kang)體*,羊(yang)抗(kang)人(ren)IgG、A、M免疫(yi)血清抗(kang)體用(yong)於(yu)免疫(yi)組(zu)化(hua)實(shi)驗，WB實(shi)驗，相(xiang)應(ying)的(de)標記抗(kang)體有(you)HRP標記抗(kang)體，FITC標記，BIO等(deng)。

【貯存條(tiao)件】： 貯存於-20℃. 本(ben)品(pin)應(ying)在低(di)溫下(xia)保存(cun)，長時(shi)間在暴露(lu)在空氣中，含量(liang)會(hui)有(you)所降(jiang)低(di)。

規(gui)格：0.5ml

材(cai)料(liao)和(he)方(fang)法

　　. 材(cai)料(liao) 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤(liu)MG63細(xi)胞為本(ben)實(shi)驗室(shi)保存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由王(wang)巖(yan)教(jiao)授惠贈。脂(zhi)質體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖DMEM培養基(ji)(美國(guo)Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公(gong)司)，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(邁晨科技有(you)限公司(si))。

　　.2 蛋白印(yin)跡實(shi)驗 MG63細(xi)胞鋪(pu)於35 mmol/L培養皿(min)中，待(dai)細(xi)胞密度達到60%～70%時，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清培養基(ji)培養3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入濃(nong)度為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細(xi)胞，離(li)心取上(shang)清加(jia)入凝(ning)膠(jiao)加樣緩(huan)沖液(ye),沸水浴(yu)上(shang)加熱(re)5 min，上樣(yang)、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激(ji)酶測定 MycSSHL(WT)及其突變(bian)體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采(cai)用(yong)免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒的(de)方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗體，對照(zhao)組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑(ji)KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶反應(ying)緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反(fan)應(ying)40 min。反應(ying)產物進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜，應(ying)用放(fang)射(she)自(zi)顯影(ying)技術檢測(ce)32P 標記的(de)SSHL水(shui)平(ping)。

　　.4 體外SSHL磷(lin)酸(suan)酶活性測(ce)定實(shi)驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采(cai)用(yong)免疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒的(de)方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗體，對照(zhao)組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應(ying)緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應(ying)2 h。反應(ying)產物進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯色。

本(ben)公(gong)司(si)更多(duo)產品(pin)優(you)惠:

CD57 單(dan)克隆抗體    小(xiao)鼠(shu)7羥(qiang)皮質類固醇7-OHCS抗(kang)體
CD5單(dan)克隆抗體    小(xiao)鼠(shu)6α羥(qiang)基雌酮6-α OHE-抗體
CD68 單(dan)克隆抗體    小(xiao)鼠(shu)5脂(zhi)加氧(yang)酶5-LO/LOX抗體
CD79a 單(dan)克隆抗體    偽(wei)狂(kuang)犬病(bing)毒(du)gE2.0抗(kang)體診斷試(shi)劑(ji)盒
CD79a/IGBP (α4蛋白)    豌(wan)豆凝集素(su)PSA抗體 
CD8    豚(tun)鼠(shu)組(zu)胺(an)HIS抗體
CD8單(dan)克隆抗體    豚(tun)鼠(shu)轉(zhuan)化生(sheng)長因(yin)子βTGF-β抗(kang)體 
CD99 多(duo)克隆抗體    豚(tun)鼠(shu)主(zhu)要組(zu)織(zhi)相(xiang)容性(xing)復合體MHC/GPLA抗(kang)體
CEA    豚(tun)鼠(shu)腫瘤(liu)壞死(si)因(yin)子αTNF-α抗(kang)體
C-erbB-2 單(dan)克隆抗體    豚(tun)鼠(shu)壹(yi)氧(yang)化氮(dan)NO抗體
CK20    豚(tun)鼠(shu)血(xue)清總(zong)補(bu)體CH50抗(kang)體 
CK5/6 單(dan)克隆抗體    豚(tun)鼠(shu)纖溶(rong)酶(mei)抗纖溶(rong)酶(mei)復合物(wu)PAP抗體
D2-40    豚(tun)鼠(shu)晚期糖基化(hua)終末產物AGEs抗(kang)體 
DARPP-32蛋白    豚(tun)鼠(shu)生(sheng)長激(ji)素(su)GH抗體