【概要(yao)描(miao)述】羊(yang)抗人(ren)IgA（α鏈特異）免疫血(xue)清(qing)抗體(ti),抗體(ti)種(zhong)類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑現貨供應!

羊抗人(ren)IgA（α鏈特異）免疫血(xue)清(qing)抗體(ti)*,羊(yang)抗人(ren)IgA（α鏈特異）免疫血(xue)清(qing)抗體(ti)用於免疫組(zu)化實(shi)驗(yan)，WB實驗(yan)，相應(ying)的標記(ji)抗體(ti)有HRP標(biao)記(ji)抗體(ti)，FITC標記(ji)，BIO等(deng)。

羊(yang)抗人(ren)IgA（α鏈特異）免疫血(xue)清(qing)抗體(ti)【貯(zhu)存條(tiao)件(jian)】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本品(pin)應(ying)在(zai)低溫(wen)下(xia)保存，長時間(jian)在(zai)暴露在(zai)空(kong)氣中，含量(liang)會有(you)所降低。

規格：0.5ml

羊抗人(ren)IgA（α鏈特異）免疫血(xue)清(qing)抗體(ti)材料(liao)和方(fang)法

　　. 材料(liao) 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤(liu)MG63細胞為(wei)本(ben)實驗(yan)室保存。重組(zu)質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教(jiao)授(shou)惠(hui)贈。脂質體(ti) 2000( Invitrogen公司)。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(美(mei)國Gibco 公司)，胎牛血(xue)清(qing)(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(邁(mai)晨(chen)科(ke)技(ji)有(you)限公司)。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)實驗(yan) MG63細胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培(pei)養(yang)皿(min)中，待(dai)細胞密(mi)度(du)達到60%～70%時，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清(qing)培養基培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加入(ru)濃(nong)度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細胞，離(li)心(xin)取上清(qing)加入(ru)凝(ning)膠加樣(yang)緩(huan)沖(chong)液(ye),沸水(shui)浴上加熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電泳、轉(zhuan)膜(mo)、雜交〔壹抗分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外(wai)激酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及其突變體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)采(cai)用免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方(fang)法及抗cmyc抗體(ti)，對照(zhao)組(zu)為抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶(mei)反應緩(huan)沖(chong)液(ye)中，30℃反應40 min。反應(ying)產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜(mo)，應用放射(she)自顯(xian)影技術檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的SSHL水(shui)平。

　　.4 體(ti)外SSHL磷(lin)酸(suan)酶活(huo)性測(ce)定(ding)實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)，采(cai)用免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方(fang)法及抗cmyc抗體(ti)，對照(zhao)組(zu)為抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應(ying)產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(壹抗分(fen)別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體(ti))、ECL顯色(se)。

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DNA拓撲異構酶(mei)Ⅱα    豚(tun)鼠內(nei)皮型(xing)壹氧化氮合成(cheng)酶eNOS抗體(ti) 
E-鈣粘附蛋(dan)白    豚(tun)鼠內(nei)皮素(su)ET-抗體(ti)
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p70/MDR-/p-Glycoprotein    豚鼠(shu)降鈣(gai)素(su)基(ji)因相(xiang)關肽(tai)CGRP抗體(ti)
p2活(huo)化的激(ji)酶(mei)    豚鼠(shu)基質金屬蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制因子(zi)TIMP-抗體(ti)
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p53    豚鼠(shu)肝細胞生長因子(zi)HGF抗體(ti)
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PARP-(cleaved p25)    豚鼠(shu)單核細胞趨(qu)化蛋(dan)白4MCP-4/CCL3抗體(ti) 
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