【概(gai)要描述】羊(yang)抗人(ren)C3免(mian)疫(yi)血(xue)清抗體(ti),抗體(ti)種(zhong)類(lei),多種(zhong)試劑(ji)現貨(huo)供(gong)應(ying)!

羊抗人(ren)C3免(mian)疫(yi)血(xue)清抗體(ti)*,羊抗人(ren)C3免(mian)疫(yi)血(xue)清抗體(ti)用於(yu)免(mian)疫(yi)組化(hua)實(shi)驗，WB實驗，相應的標(biao)記(ji)抗體(ti)有HRP標(biao)記(ji)抗體(ti)，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條件(jian)】： 貯(zhu)存於-20℃. 本(ben)品(pin)應(ying)在低(di)溫(wen)下(xia)保(bao)存，長時間(jian)在暴(bao)露(lu)在空(kong)氣中(zhong)，含量會(hui)有所(suo)降低(di)。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材料(liao)和(he)方(fang)法

　　. 材料(liao) 人(ren)成骨(gu)肉(rou)瘤MG63細(xi)胞為本(ben)實(shi)驗室保(bao)存。重組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教(jiao)授惠贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司)。高(gao)糖DMEM培養基(ji)(美國(guo)Gibco 公(gong)司)，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(Hyclone公(gong)司)，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(邁(mai)晨科技(ji)有限(xian)公(gong)司)。

　　.2 蛋白(bai)印(yin)跡(ji)實(shi)驗 MG63細(xi)胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿中(zhong)，待(dai)細(xi)胞密度(du)達到60%～70%時，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清培養基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分別(bie)加入濃(nong)度為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解(jie)細(xi)胞，離(li)心(xin)取上(shang)清加入凝(ning)膠(jiao)加樣(yang)緩沖液(ye),沸(fei)水浴上加熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交(jiao)〔壹抗分別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體(ti)外激(ji)酶測定 MycSSHL(WT)及其(qi)突變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采(cai)用免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒的(de)方法及抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組為抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組(zu)活性CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶反應緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反應(ying)40 min。反應(ying)產物進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜，應用放射(she)自顯(xian)影(ying)技(ji)術(shu)檢(jian)測32P 標(biao)記(ji)的SSHL水平。

　　.4 體(ti)外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采(cai)用免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒的(de)方法及抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組為抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應緩(huan)沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反應(ying)2 h。反應(ying)產物進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交(jiao)(壹抗分別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體(ti))、ECL顯(xian)色。

本(ben)公(gong)司更多產品(pin)優(you)惠(hui):

白(bai)細(xi)胞共同(tong)抗原(CD45/LCA)單(dan)克(ke)隆抗體(ti)    兔子組胺HIS抗體(ti)
表(biao)皮生長(chang)因子受體(ti)    兔子轉化(hua)生長(chang)因子βTGF-β抗體(ti)
表(biao)皮生長(chang)因子受體(ti)2    兔子主要組織相容性復合體(ti)Ⅲ類(lei)MHCⅢ/RLAⅢ抗體(ti)
表(biao)皮生長(chang)因子受體(ti)磷酸化(hua)抗體(ti)    兔子腫瘤壞死因子相關雕亡誘導(dao)配(pei)體(ti)3TRAIL-R3抗體(ti)
波形蛋(dan)白(bai)    兔子腫瘤壞死因子相關雕亡誘導(dao)配(pei)體(ti)3TRAIL-R3抗體(ti)
雌激(ji)素(su)受體(ti)(ER)    兔子腫瘤壞死因子αTNF-α 抗體(ti) 
雌激(ji)素(su)受體(ti)α    兔子中(zhong)性粒細(xi)胞彈性蛋白(bai)酶NE抗體(ti)
蛋白(bai)激(ji)酶B(Akt/PKBa)    兔子脂(zhi)聯(lian)素(su)ADP抗體(ti)
蛋白(bai)激(ji)酶B(Akt/PKBa)磷酸化(hua)(pS473)    兔(tu)子脂(zhi)蛋(dan)白(bai)磷脂(zhi)酶A2Lp-PL-A2抗體(ti)
低(di)分子量細(xi)胞角(jiao)蛋(dan)白(bai) 8/8(LMW CK 8/8)    兔子孕激(ji)素(su)/孕酮(tong)PROG抗體(ti)
低(di)分子量細(xi)胞角(jiao)蛋(dan)白(bai)(Cytokeratin LMW[AE])    兔子胰島素(su)樣(yang)生長(chang)因子2IGF-2抗體(ti)
第(di)八(ba)因子相關抗原(Fact o r Ⅷ Related Antigen)    兔(tu)子胰島素(su)樣(yang)生長(chang)因子IGF-抗體(ti)
雕亡(wang)誘(you)導(dao)因子(AIF)    兔子胰島素(su)INS抗體(ti)
鈣調(tiao)節(jie)蛋白(bai)-    兔子氧(yang)化(hua)低(di)密度(du)脂(zhi)蛋(dan)白(bai)OxLDL抗體(ti)
鈣調(tiao)結合蛋(dan)白(bai)磷酸化(hua)抗體(ti)    兔子血(xue)小板因子4PF-4/CXCL4抗體(ti)
鈣視(shi)網(wang)膜(mo)蛋白(bai)(Calretinin)單克(ke)隆抗體(ti)    兔子血(xue)小板衍(yan)生生長(chang)因子PDGF抗體(ti)