【概要(yao)描(miao)述(shu)】羊(yang)抗(kang)人(ren)白(bai)蛋白抗(kang)體(ti),抗(kang)體(ti)種(zhong)類,多(duo)種(zhong)試劑現貨供(gong)應(ying)!

羊(yang)抗(kang)人(ren)白(bai)蛋白抗(kang)體(ti)*,羊(yang)抗(kang)人(ren)白(bai)蛋白抗(kang)體(ti)用(yong)於免疫組(zu)化(hua)實驗(yan)，WB實驗(yan)，相(xiang)應的標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)有(you)HRP標記(ji)抗(kang)體(ti)，FITC標(biao)記(ji)，BIO等。

【貯(zhu)存條件】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本品(pin)應(ying)在(zai)低(di)溫(wen)下保存(cun)，長(chang)時間(jian)在(zai)暴露在(zai)空(kong)氣(qi)中(zhong)，含量會有所降低(di)。

規格：0.5ml

材料和(he)方(fang)法(fa)

　　. 材料 人(ren)成骨(gu)肉(rou)瘤MG63細(xi)胞(bao)為(wei)本實驗(yan)室(shi)保存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教授(shou)惠(hui)贈。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公司(si))。高糖DMEM培養(yang)基(美(mei)國(guo)Gibco 公司(si))，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(Hyclone公司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科(ke)技有(you)限(xian)公司(si))。

　　.2 蛋白印(yin)跡實驗(yan) MG63細(xi)胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿(min)中(zhong)，待(dai)細胞(bao)密(mi)度達到(dao)60%～70%時，轉染MycSSHL，48 h後換無(wu)血清(qing)培養(yang)基培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後裂(lie)解(jie)細(xi)胞(bao)，離(li)心(xin)取上清加(jia)入(ru)凝(ning)膠加樣(yang)緩沖(chong)液(ye),沸水浴上(shang)加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜(za)交〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體(ti)外(wai)激酶測(ce)定 MycSSHL(WT)及(ji)其突變體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染至MG63細胞(bao)，48 h後采(cai)用免疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活(huo)性CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同時(shi)加入(ru)抑制(zhi)劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶(mei)反(fan)應緩沖(chong)液(ye)中(zhong)，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)，應(ying)用放(fang)射(she)自顯(xian)影(ying)技術(shu)檢(jian)測(ce)32P 標記(ji)的SSHL水平(ping)。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷酸(suan)酶活性(xing)測(ce)定實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞(bao)，48 h後，采(cai)用免疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同時(shi)加入(ru)抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜(za)交(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色(se)。

本公司(si)更多(duo)產(chan)品(pin)優(you)惠(hui):

鈣粘附蛋白-E(E-cadherin)    兔(tu)子血(xue)小板(ban)活化(hua)因(yin)子PAF抗(kang)體(ti)
幹(gan)細胞因(yin)子受體(ti)    兔(tu)子血纖蛋白原(yuan)降解(jie)產(chan)物(wu)FDP抗(kang)體(ti)
肝細(xi)胞(bao)生長因(yin)子受體(ti)    兔(tu)子血栓調(tiao)節蛋白TM抗(kang)體(ti) 
高(gao)分(fen)子量(liang)細胞(bao)角蛋白(Cytokeratin HMW[34βE2])    兔(tu)子纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激活(huo)物(wu)抑制(zhi)因(yin)子PAI抗(kang)體(ti)
高(gao)分(fen)子量(liang)細胞(bao)角蛋白(Cytokeratin HMW[AE3])    兔(tu)子纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)激活(huo)物(wu)抑制(zhi)因(yin)子PAI-抗(kang)體(ti)
根蛋白    兔(tu)子纖(xian)溶(rong)酶(mei)原(yuan)Plg抗(kang)體(ti) 
廣(guang)譜(pu)細胞(bao)角(jiao)蛋白(Pan Cytokeratin Plus[AE/AE3+8/8])    兔(tu)子細(xi)胞(bao)間(jian)粘(zhan)附(fu)分(fen)子3ICAM-3/CD50抗(kang)體(ti)
    兔(tu)子細胞間(jian)粘(zhan)附(fu)分(fen)子2ICAM-2/CD02抗(kang)體(ti)
廣(guang)譜(pu)細胞(bao)角(jiao)蛋白(Pan Cytokeratin[AE/AE3])    兔(tu)子細(xi)胞(bao)間(jian)粘(zhan)附(fu)分(fen)子ICAM-/CD54抗(kang)體(ti)
核磷蛋白    兔(tu)子脫(tuo)氧吡(bi)啶酚(fen)/脫(tuo)氧吡(bi)啶啉(lin)DPD抗(kang)體(ti)
黑(hei)色(se)素(su)-A    兔(tu)子(zi)脫(tuo)氫表(biao)雄酮(tong)硫酸酯DHEA-S抗(kang)體(ti)
黑(hei)色(se)素(su)瘤(Melanoma)    兔(tu)子(zi)透(tou)明(ming)質(zhi)酸(suan)HA抗(kang)體(ti)
環(huan)氧化酶-2    兔(tu)子(zi)髓(sui)磷脂(zhi)堿性蛋白MBP抗(kang)體(ti)
肌(ji)鈣蛋白Ⅰ    兔(tu)子瘦素(su)LEP抗(kang)體(ti)
肌(ji)特異性(xing)肌(ji)動(dong)蛋白(MSA)    兔(tu)子結(jie)合蛋白4RBP-4抗(kang)體(ti)
基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶(mei)-    兔子(zi)生長激素(su)釋(shi)放(fang)多(duo)肽(tai)GHRP抗(kang)體(ti)
基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶(mei)-    兔子(zi)腎(shen)上(shang)腺(xian)髓(sui)質(zhi)素(su)ADM抗(kang)體(ti)