【概要描(miao)述(shu)】羊抗兔(tu)（全分子(zi)）-RBITC抗(kang)體,抗體種類(lei),多種試劑(ji)現(xian)貨供應(ying)!

羊抗兔(tu)（全分子(zi)）-RBITC抗(kang)體*,羊抗兔(tu)（全分子(zi)）-RBITC抗(kang)體用於免(mian)疫(yi)組(zu)化實驗，WB實(shi)驗，相(xiang)應(ying)的標記(ji)抗體有(you)HRP標記(ji)抗體，FITC標記(ji)，BIO等(deng)。

【貯存(cun)條件(jian)】： 貯存(cun)於-20℃. 本(ben)品應(ying)在低溫下(xia)保存(cun)，長時(shi)間在(zai)暴(bao)露在空氣(qi)中(zhong)，含量會(hui)有(you)所降(jiang)低。

規格(ge)：0.5ml/ml

材(cai)料和(he)方法(fa)

　　. 材(cai)料 人成骨(gu)肉瘤MG63細(xi)胞(bao)為(wei)本(ben)實(shi)驗(yan)室(shi)保(bao)存(cun)。重(zhong)組(zu)質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教(jiao)授惠贈。脂(zhi)質體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養基(美(mei)國Gibco 公(gong)司(si))，胎牛(niu)血清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，*和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨(chen)科(ke)技(ji)有(you)限公(gong)司(si))。

　　.2 蛋(dan)白印(yin)跡實(shi)驗(yan) MG63細(xi)胞(bao)鋪(pu)於35 mmol/L培(pei)養皿(min)中(zhong)，待細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉染MycSSHL，48 h後換(huan)無(wu)血清(qing)培(pei)養基培(pei)養3 h，分別(bie)加(jia)入濃(nong)度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min後裂解(jie)細(xi)胞(bao)，離(li)心(xin)取上清(qing)加(jia)入凝膠(jiao)加(jia)樣緩(huan)沖液(ye),沸水浴上加(jia)熱(re)5 min，上樣、電泳、轉膜、雜交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外(wai)激酶測定 MycSSHL(WT)及(ji)其突(tu)變體MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉染至(zhi)MG63細(xi)胞(bao)，48 h後采(cai)用免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體，對照組為(wei)抗IgG抗體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶反應(ying)緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反應(ying)40 min。反應(ying)產物進(jin)行SDSPAGE電泳(yong)、轉膜，應(ying)用放(fang)射(she)自顯影技(ji)術檢(jian)測32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體外(wai)SSHL磷酸(suan)酶(mei)活(huo)性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染至(zhi)MG63細(xi)胞(bao)，48 h後，采(cai)用免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體，對照組為(wei)抗IgG抗體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應(ying)緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反應(ying)2 h。反應(ying)產物進(jin)行SDSPAGE電泳(yong)、轉膜、雜交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色(se)。

本(ben)公(gong)司(si)更多產(chan)品優惠:

大(da)鼠(shu)孤(gu)腓(fei)肽(tai)OFQ/N抗(kang)體    220    鼠抗(kang)人Bcl-2單(dan)克(ke)隆抗體    Bcl-2       禽腦(nao)脊髓(sui)炎(yan)病(bing)毒(du)抗體
大(da)鼠(shu)脫羧(suo)酶(mei)自身抗體GAD-Ab抗體    22    鼠抗(kang)人Bcl-2單(dan)克(ke)隆抗體    Bcl-2 Oncoprotein        抗利(li)尿激素/血管升壓素抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)保護素OPG抗體        脂(zhi)聯素受(shou)體-抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)保護素配(pei)體OPGL抗體    222    鼠抗(kang)人Bcl-6單(dan)克(ke)隆抗體    Bcl-6      脂(zhi)聯素受(shou)體-2抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白2BMP-2抗(kang)體    223    鼠抗(kang)人Bcl-X單(dan)克(ke)隆抗體    Bcl-X       脂(zhi)聯素抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白4BMP-4抗(kang)體    224    鼠抗(kang)人Bcl-XL單(dan)克(ke)隆抗體    Bcl-XL       腎上腺(xian)髓質素抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白4BMP-4抗(kang)體    225    鼠抗(kang)人b澱粉(fen)樣蛋(dan)白單(dan)克(ke)隆抗體    Beta Amyloid        腎上腺(xian)髓質素抗體(N端20肽(tai))
大(da)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白7BMP-7抗(kang)體    226    兔(tu)抗人堿性成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因子(zi)多克(ke)隆抗體    b-FGF       腎上腺(xian)髓質素受(shou)體抗體
大(da)鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白受(shou)體ABMPR-A抗體    227    鼠抗(kang)人單(dan)克(ke)隆抗體    BLA.36       活(huo)性依賴(lai)的(de)神(shen)經(jing)保(bao)護(hu)肽(tai)抗(kang)體