【概要描述】羊抗豬(zhu)IgG-FITC抗體(ti),抗體(ti)種(zhong)類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑(ji)現貨(huo)供應!

羊抗豬(zhu)IgG-FITC抗體(ti)*,羊抗豬(zhu)IgG-FITC抗體(ti)用(yong)於(yu)免(mian)疫(yi)組化(hua)實驗，WB實驗，相(xiang)應(ying)的(de)標(biao)記(ji)抗體(ti)有HRP標(biao)記(ji)抗體(ti)，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存(cun)條件】： 貯(zhu)存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品應在(zai)低溫下(xia)保存，長時間在(zai)暴(bao)露在(zai)空氣中(zhong)，含量(liang)會有所降(jiang)低(di)。

規(gui)格：0.5ml/ml

材料(liao)和方(fang)法

　　. 材料(liao) 人(ren)成骨(gu)肉瘤(liu)MG63細胞為(wei)本(ben)實驗室(shi)保存。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由王巖教(jiao)授惠(hui)贈(zeng)。脂質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司)。高糖DMEM培養(yang)基(ji)(美國(guo)Gibco 公(gong)司)，胎牛(niu)血清(qing)(Hyclone公(gong)司)，和EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨科(ke)技有限公(gong)司)。

　　.2 蛋白印(yin)跡實驗 MG63細胞鋪於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿中(zhong)，待(dai)細(xi)胞密度達到60%～70%時，轉染(ran)MycSSHL，48 h後換(huan)無血清(qing)培養(yang)基(ji)培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加入(ru)濃(nong)度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂解細(xi)胞，離(li)心取(qu)上(shang)清(qing)加(jia)入(ru)凝膠(jiao)加(jia)樣(yang)緩沖(chong)液,沸(fei)水浴(yu)上(shang)加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電泳、轉膜、雜交〔壹(yi)抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體(ti)外激(ji)酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及其突變體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後采用(yong)免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法及(ji)抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反應緩沖(chong)液中(zhong)，30℃反(fan)應(ying)40 min。反應產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電泳、轉膜，應用(yong)放(fang)射自顯(xian)影技(ji)術(shu)檢(jian)測(ce)32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體(ti)外SSHL磷(lin)酸酶(mei)活性(xing)測(ce)定(ding)實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後，采用(yong)免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法及(ji)抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應(ying)2 h。反應產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電泳、轉膜、雜交(壹(yi)抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體(ti))、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公(gong)司更多(duo)產(chan)品優(you)惠(hui):

大鼠(shu)紅細(xi)胞生成素受(shou)體(ti)EPOR抗體(ti)    250    兔抗人(ren)降鈣(gai)素多(duo)克(ke)隆(long)抗體(ti)    Caspase-Pan-        肝再生增(zeng)強(qiang)因(yin)子抗體(ti)
大鼠(shu)ACsA抗體(ti)    25    兔抗人(ren)組織(zhi)蛋白酶(mei)D多(duo)克(ke)隆(long)抗體(ti)    Cathepsin D       抗堿(jian)性(xing)磷(lin)酸酶(mei)抗體(ti)
大鼠(shu)環磷(lin)酸鳥苷(gan)cGMP抗體(ti)    252    鼠(shu)抗人(ren)組織(zhi)蛋白酶(mei)D單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    Cathepsin D       α－甲(jia)基(ji)酰(xian)基(ji)消(xiao)旋酶抗體(ti) 
大鼠(shu)cAMP抗體(ti)    253    兔抗人(ren)組織(zhi)蛋白酶(mei)D多(duo)克(ke)隆(long)抗體(ti)    Cathepsin D        神經(jing)元突觸前(qian)膜蛋白抗體(ti)
大鼠(shu)cAMP抗體(ti)    254    鼠(shu)抗人(ren)CD0單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD0/CALLA      腺(xian)苷(gan)單(dan)磷(lin)酸活化(hua)蛋白激(ji)酶α抗體(ti)
大鼠(shu)黃體(ti)生成(cheng)素釋(shi)放激素(su)LHRH抗體(ti)    255    鼠(shu)抗人(ren)CD05單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD05      腺(xian)苷(gan)單(dan)磷(lin)酸活化(hua)蛋白激(ji)酶β抗體(ti)
大鼠(shu)活化(hua)蛋白CAPC抗體(ti)    256    鼠(shu)抗人(ren)CD05單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD05/Endoglin/TGF-βreceptor         糖尿(niao)病相(xiang)關(guan)肽(tai)/胰(yi)島(dao)澱(dian)粉(fen)樣肽(tai)抗體(ti)
大鼠(shu)活化(hua)素AACV-A抗體(ti)    257    鼠(shu)抗人(ren)CD06單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD06/VCAM       β澱(dian)粉(fen)樣肽(tai)-42 (C端抗體(ti))