【概要(yao)描(miao)述】羊抗牛IgG-FITC抗體(ti),抗體(ti)種(zhong)類,多種(zhong)試劑現貨(huo)供(gong)應(ying)!

羊抗牛IgG-FITC抗體(ti)*,羊抗牛IgG-FITC抗體(ti)用於免疫組化實(shi)驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相(xiang)應(ying)的標記(ji)抗體(ti)有(you)HRP標記(ji)抗體(ti)，FITC標記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條件(jian)】： 貯(zhu)存於-20℃. 本品(pin)應(ying)在低(di)溫(wen)下保(bao)存，長時(shi)間在(zai)暴(bao)露(lu)在空氣中，含(han)量會有(you)所降低(di)。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材(cai)料(liao)和(he)方法(fa)

　　. 材(cai)料(liao) 人(ren)成骨肉(rou)瘤MG63細胞(bao)為本(ben)實(shi)驗(yan)室(shi)保(bao)存。重組(zu)質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖教(jiao)授(shou)惠(hui)贈(zeng)。脂質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(美(mei)國Gibco 公(gong)司)，胎牛血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司)，和(he)EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沈澱(Protein Gagarose)試劑盒(邁(mai)晨(chen)科技(ji)有(you)限(xian)公司(si))。

　　.2 蛋白印跡(ji)實(shi)驗(yan) MG63細胞(bao)鋪於35 mmol/L培養(yang)皿(min)中，待(dai)細胞(bao)密(mi)度達到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清(qing)培(pei)養基培(pei)養(yang)3 h，分(fen)別加(jia)入(ru)濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂解(jie)細胞(bao)，離(li)心(xin)取(qu)上清(qing)加(jia)入(ru)凝膠加樣緩沖液,沸水(shui)浴上加(jia)熱(re)5 min，上樣、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體(ti)外(wai)激酶測定 MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采用免疫共沈澱(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方法(fa)及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對照(zhao)組(zu)為抗(kang)IgG抗體(ti)。回(hui)收MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨或同時(shi)加(jia)入(ru)抑(yi)制劑KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶反應緩沖液中，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產物進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)，應用(yong)放射(she)自(zi)顯(xian)影(ying)技(ji)術(shu)檢(jian)測32P 標記(ji)的SSHL水(shui)平。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷(lin)酸(suan)酶(mei)活性(xing)測定實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采用免疫共沈澱(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方法(fa)及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對照(zhao)組(zu)為抗(kang)IgG抗體(ti)。回(hui)收MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或同時(shi)加(jia)入(ru)抑(yi)制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應(ying)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產物進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(壹(yi)抗(kang)分(fen)別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色(se)。

本公(gong)司(si)更多產(chan)品(pin)優惠(hui):

大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶MMP-抗體(ti)     265    鼠抗(kang)人(ren)CD9（B細胞(bao)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD9        β澱粉(fen)樣肽 -40 C端(duan)抗(kang)體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶2/明(ming)膠酶AMMP-2/Gelatinase A抗(kang)體(ti)     266    鼠抗(kang)人(ren)CDa單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CDa       β澱粉(fen)樣肽（-42）抗(kang)體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶3MMP-3抗體(ti)     267    鼠抗(kang)人(ren)CD2單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD2        血(xue)管生成素-抗(kang)體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶4MMP-4抗體(ti)    268    鼠抗(kang)人(ren)CD20(B細胞(bao))單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD20        血(xue)管生成素-2抗(kang)體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶5MMP-5抗體(ti)    269    鼠抗(kang)人(ren)CD20cy, B細胞(bao)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD20cy,B Cell        錨(mao)定蛋白G抗體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶7MMP-7抗體(ti)    270    鼠抗(kang)人(ren)CD2（B細胞(bao)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD2        心(xin)鈉(na)肽（心(xin)鈉(na)素）抗(kang)體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶8/中性(xing)粒細胞(bao)膠原酶(mei)MMP-8抗(kang)體(ti)    27    鼠抗(kang)人(ren)CD22（B細胞(bao)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD22        血(xue)管緊(jin)張(zhang)素Ⅱ-2型(xing)受(shou)體(ti)抗體(ti)
大鼠基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶9/明(ming)膠酶BMMP-9/Gelatinase B 抗(kang)體(ti)    272    鼠抗(kang)人(ren)CD23單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)    CD23        血(xue)管緊(jin)張(zhang)素II抗(kang)體(ti)