【概(gai)要描述(shu)】兔(tu)抗羊(yang)IgG-RBITC抗體,抗體種(zhong)類(lei),多種(zhong)試劑現貨(huo)供應!

兔(tu)抗羊(yang)IgG-RBITC抗體*,兔(tu)抗羊(yang)IgG-RBITC抗體用(yong)於(yu)免疫組(zu)化實驗，WB實(shi)驗，相(xiang)應的(de)標(biao)記(ji)抗體有HRP標記抗體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等。

【貯(zhu)存(cun)條件(jian)】： 貯存(cun)於(yu)-20℃. 本品應在(zai)低(di)溫下保存(cun)，長(chang)時(shi)間(jian)在(zai)暴(bao)露(lu)在(zai)空氣(qi)中(zhong)，含量會有所降低(di)。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材料(liao)和(he)方法(fa)

　　. 材料(liao) 人成骨(gu)肉瘤MG63細胞為(wei)本實驗室(shi)保存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖(yan)教(jiao)授(shou)惠(hui)贈。脂質體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖(tang)DMEM培養(yang)基(ji)(美國Gibco 公司(si))，胎(tai)牛(niu)血(xue)清(Hyclone公司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨(chen)科(ke)技(ji)有限公司(si))。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印跡實(shi)驗 MG63細胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培(pei)養(yang)皿中(zhong)，待細胞密(mi)度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清(qing)培養(yang)基(ji)培養(yang)3 h，分(fen)別加入濃度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂解細胞，離心取(qu)上清(qing)加入凝膠加樣緩沖液,沸(fei)水(shui)浴(yu)上(shang)加熱5 min，上(shang)樣、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜(za)交(jiao)〔壹抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外(wai)激酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及其突(tu)變(bian)體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)采用免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方法(fa)及抗cmyc抗體，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組(zu)活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶(mei)反(fan)應緩沖液中(zhong)，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產(chan)物進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)，應用(yong)放射(she)自顯影(ying)技(ji)術(shu)檢(jian)測(ce)32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水(shui)平(ping)。

　　.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸酶(mei)活(huo)性測(ce)定(ding)實驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)，采用免疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方法(fa)及抗cmyc抗體，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產(chan)物進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜(za)交(jiao)(壹抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色(se)。

本公司(si)更(geng)多產(chan)品優(you)惠(hui):

大(da)鼠抗酒(jiu)石(shi)酸酸性磷(lin)酸酶(mei)5bTRACP-5b抗體    329    鼠抗人(ren)Cdk/p34cdc2單(dan)克隆(long)抗體    Cdk/p34cdc2      p53雕亡(wang)刺激蛋(dan)白(bai)抗體

大(da)鼠抗心磷(lin)脂抗體IgAACA-IgA抗體    337    兔(tu)抗人(ren)C-erbB-2克隆(long)抗體    C-erbB-2  Oncoprotein       磷(lin)酸化活(huo)化復制(zhi)因子(zi)2抗體
大(da)鼠抗心磷(lin)脂抗體IgGACA-IgG抗體    338    鼠抗人(ren)C-erbB-2單(dan)克隆(long)抗體    C-erbB-2/neu Oncoprotein      活(huo)化轉(zhuan)錄因子(zi)3抗體
大(da)鼠抗心磷(lin)脂抗體IgMACA-IgM抗體    339    鼠抗人(ren)層粘連(lian)蛋(dan)白(bai)受體多(duo)克隆(long)抗體    Laminin Receptor      自(zi)噬(shi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)7抗體
大(da)鼠抗血(xue)小(xiao)板(ban)抗體IgG/M/APA-IgG/M/A抗體    340    鼠抗人(ren)白(bai)細胞共(gong)同(tong)抗原單(dan)克隆(long)抗體    Leukocyte Common Antigen (LCA)     活(huo)化轉(zhuan)錄因子(zi)4抗體
大(da)鼠抗AT抗體    34    鼠抗人(ren)白(bai)細胞特異(yi)性單(dan)克隆(long)抗體    Leukocyte Specific Protein       毛(mao)細血管(guan)擴(kuo)張性共(gong)濟(ji)失(shi)調(tiao)癥突(tu)變(bian)蛋(dan)白(bai)抗體
大(da)鼠抗增(zeng)殖(zhi)細胞核(he)抗原抗體PCNA抗體    342    鼠抗人(ren)單(dan)克隆(long)抗體    Linker for Activation of T cells        鈣離子ATP酶(mei)通道蛋(dan)白(bai)抗體
大(da)鼠抗中(zhong)性粒(li)/中(zhong)心體抗體ACA抗體    343    鼠抗人(ren)腔(qiang)上(shang)皮(pi)抗原單(dan)克隆(long)抗體    Luminal Epithelial Ag        活(huo)化轉(zhuan)錄因子(zi)6抗體