【概(gai)要(yao)描述】兔(tu)抗(kang)豚鼠(shu)IgG-RBITC抗(kang)體,抗(kang)體種類,多(duo)種試劑(ji)現(xian)貨供(gong)應(ying)!

兔(tu)抗(kang)豚鼠(shu)IgG-RBITC抗(kang)體*,兔(tu)抗(kang)豚鼠(shu)IgG-RBITC抗(kang)體用於(yu)免疫(yi)組(zu)化(hua)實驗，WB實(shi)驗，相應的(de)標(biao)記(ji)抗(kang)體有(you)HRP標(biao)記(ji)抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等。

【貯(zhu)存條(tiao)件(jian)】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本(ben)品(pin)應(ying)在低溫(wen)下保存(cun)，長時間在暴露在空(kong)氣中，含(han)量(liang)會(hui)有所降(jiang)低。

規格：0.5ml

材(cai)料和方(fang)法

　　. 材(cai)料 人(ren)成(cheng)骨肉瘤MG63細胞為(wei)本(ben)實驗室保存(cun)。重組(zu)質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王(wang)巖(yan)教(jiao)授惠(hui)贈(zeng)。脂(zhi)質體 2000( Invitrogen公(gong)司)。高糖DMEM培養(yang)基(美(mei)國Gibco 公(gong)司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和(he)EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(邁(mai)晨科技(ji)有(you)限公(gong)司)。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印跡(ji)實驗(yan) MG63細胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿中，待(dai)細胞密(mi)度達(da)到60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血清(qing)培養(yang)基培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)濃(nong)度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後裂(lie)解(jie)細胞，離心取(qu)上(shang)清(qing)加入(ru)凝膠(jiao)加樣緩(huan)沖(chong)液(ye),沸(fei)水浴(yu)上加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體外(wai)激(ji)酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)采(cai)用免疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重組(zu)活性CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶(mei)反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)中，30℃反(fan)應(ying)40 min。反(fan)應(ying)產物進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜，應用放射(she)自(zi)顯(xian)影技(ji)術檢測(ce)32P 標記(ji)的(de)SSHL水平。

　　.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸(suan)酶活性測定(ding)實(shi)驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞，48 h後(hou)，采(cai)用免疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應(ying)2 h。反(fan)應(ying)產物進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公(gong)司更(geng)多產品優(you)惠:

大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性P選擇素sP-selectin抗(kang)體    352    鼠(shu)抗(kang)人(ren)MDMT單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MDMT        加(jia)壓(ya)素受體2抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性Toll樣受(shou)體2sTLR2抗(kang)體    353    鼠(shu)抗(kang)人(ren)多藥耐藥基因單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MDR-       緩(huan)激(ji)肽B2受體抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性Toll樣受(shou)體6sTLR6抗(kang)體    354    鼠(shu)抗(kang)人(ren)黑(hei)色(se)素A單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Melan-A/MART-       軸蛋(dan)白(bai)Axin protein 抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性白介(jie)素6受體sIL-6R抗(kang)體    355    鼠(shu)抗(kang)人(ren)黑(hei)色(se)素瘤單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Melanoma      自(zi)分(fen)泌運動因(yin)子抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性雕亡(wang)相關(guan)因子sFAS/Apo-抗(kang)體    356    鼠(shu)抗(kang)人(ren)黑(hei)色(se)素瘤單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Melanoma(gp00)       極(ji)光(guang)激酶(mei)B抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性核(he)因子κB受體活化(hua)因子配基sRANKL抗(kang)體    357    鼠(shu)抗(kang)人(ren)黑(hei)色(se)素瘤（組(zu)合型(xing)）單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Melanoma(Pan)      程序性死(si)亡(wang)配(pei)體抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性瘦素受體sLR抗(kang)體    358    鼠(shu)抗(kang)人(ren)黑(hei)色(se)素瘤單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Melanoma(Pan)       程序性死(si)亡(wang)配(pei)體2抗(kang)體
大鼠(shu)可(ke)溶(rong)性細胞間(jian)粘附分(fen)子sICAM-抗(kang)體    359    鼠(shu)抗(kang)人(ren)間皮(pi)瘤細胞單(dan)克隆(long)抗(kang)體    Mesothelial Cell        B7H4抗(kang)體