【概(gai)要描(miao)述】胰(yi)島(dao)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒我(wo)公司(si)歡(huan)迎客(ke)戶來樣待(dai)測(ce)，可從標本(ben)收集、保存、預試驗(yan)、實(shi)驗(yan)、數(shu)據(ju)分(fen)析等(deng)全實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)提(ti)供完整的技術(shu)指導，了(le)解(jie)更(geng)多信息可咨(zi)詢(xun)在線(xian)客服！

                                                                                                         胰(yi)島(dao)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒
使(shi)用(yong)目的：

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於測(ce)定大鼠(shu)血清(qing)，血漿(jiang)及(ji)相(xiang)關(guan)液體(ti)樣本(ben)中(zhong)含量。

試劑(ji)盒組成(cheng)：

標本(ben)要求：

1．標本(ben)采(cai)集後(hou)盡(jin)早進行提取(qu)，提取(qu)按(an)相(xiang)關(guan)文獻(xian)進行，提取(qu)後應(ying)盡(jin)快進行實驗(yan)。若(ruo)不能(neng)馬(ma)上(shang)進行試驗(yan)，可將標(biao)本(ben)放(fang)於-20℃保存，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)

2．不能(neng)檢(jian)測(ce)含NaN3的樣品(pin)，因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)的（HRP）活(huo)性(xing)。

操(cao)作(zuo)步驟

1.標準(zhun)品(pin)的稀釋：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提(ti)供原(yuan)倍(bei)標(biao)準(zhun)品(pin)壹(yi)支(zhi)，用(yong)戶可按(an)照下(xia)列圖表(biao)在(zai)小試管中(zhong)進行稀釋。

2.加(jia)樣：分(fen)別設(she)空(kong)白孔（空(kong)白(bai)對(dui)照孔不加(jia)樣品及酶標試劑(ji)，其余(yu)各步操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl，然(ran)後再(zai)加待(dai)測(ce)樣品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)最終稀釋度(du)為(wei)5倍）。加(jia)樣將樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部，盡(jin)量不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

3.溫育(yu)：用(yong)封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。   

4.配(pei)液：將30倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水30倍(bei)稀釋後(hou)備用(yong)

5.洗滌(di)：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封板(ban)膜，棄去(qu)液(ye)體(ti)，甩幹，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次(ci)，拍幹。

6.加酶(mei)：每孔加(jia)入酶標試劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。 

7.溫育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

8.洗(xi)滌(di)：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

9.顯色：每孔先加入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再加(jia)入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯色10分(fen)鐘(zhong).

10.終止(zhi)：每孔加(jia)終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反應(ying)（此(ci)時藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se)）。

11.測(ce)定：以(yi)空(kong)白(bai)孔(kong)調(tiao)零，450nm波長依序(xu)測(ce)量各孔(kong)的吸光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加終止(zhi)液後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內(nei)進行。

操(cao)作(zuo)程(cheng)序(xu)總(zong)結(jie)：

胰(yi)島(dao)素(su)elisa試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)

  以(yi)標(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度(du)為(wei)橫坐標(biao)，OD值(zhi)為(wei)縱坐標，在(zai)坐(zuo)標(biao)紙上(shang)繪出標準(zhun)曲線(xian)，根(gen)據(ju)樣(yang)品的OD值(zhi)由(you)標準(zhun)曲線(xian)查(zha)出相(xiang)應的濃(nong)度(du)；再(zai)乘以(yi)稀釋倍(bei)數(shu)；或用(yong)標準(zhun)物(wu)的濃(nong)度(du)與(yu)OD值(zhi)計(ji)算出標準(zhun)曲線(xian)的直(zhi)線(xian)回歸方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣(yang)品的OD值(zhi)代(dai)入方程(cheng)式(shi)，計(ji)算出樣品濃(nong)度(du)，再(zai)乘以(yi)稀釋倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣品的實際(ji)濃(nong)度(du)。 

註意(yi)事項(xiang)

1．試(shi)劑(ji)盒從冷(leng)藏(zang)環(huan)境中取(qu)出應在室溫平(ping)衡15-30分(fen)鐘(zhong)後(hou)方可使(shi)用(yong)，酶標(biao)包被(bei)板(ban)開封(feng)後(hou)如(ru)未用(yong)完，板(ban)條(tiao)應裝入(ru)密(mi)封袋中保存。

2．濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)可能(neng)會(hui)有結(jie)晶析出，稀釋時可在(zai)水(shui)浴中(zhong)加溫助溶(rong)，洗滌(di)時不影(ying)響結(jie)果(guo)。

3．各步加樣均應(ying)使(shi)用(yong)加樣(yang)器(qi)，並(bing)經常校(xiao)對(dui)其(qi)準(zhun)確(que)性(xing)，以(yi)避(bi)免(mian)試(shi)驗(yan)誤差(cha)。壹(yi)次加樣時間最好(hao)控(kong)制(zhi)在5分(fen)鐘(zhong)內(nei)，如(ru)標(biao)本(ben)數(shu)量多，推薦使(shi)用(yong)排槍(qiang)加(jia)樣。

4．請(qing)每次測(ce)定的同(tong)時做標(biao)準(zhun)曲線(xian)，最好(hao)做復(fu)孔(kong)。如(ru)標(biao)本(ben)中(zhong)待(dai)測(ce)物質(zhi)含(han)量(liang)過高(gao)（樣本(ben)OD值(zhi)大於標(biao)準(zhun)品(pin)孔(kong)第(di)壹孔(kong)的OD值(zhi)），請(qing)先用(yong)樣品(pin)稀釋液(ye)稀釋壹(yi)定倍(bei)數(shu)（n倍）後(hou)再測(ce)定，計(ji)算(suan)時請(qing)最後(hou)乘以(yi)總(zong)稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

5．封板(ban)膜只限(xian)壹次(ci)性(xing)使(shi)用(yong)，以(yi)避(bi)免(mian)交(jiao)叉汙染(ran)。

6．底(di)物請(qing)避(bi)光(guang)保存。

7．嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)的操(cao)作(zuo)進行，試驗(yan)結(jie)果(guo)判定必(bi)須以(yi)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數(shu)為(wei)準(zhun).

8．所(suo)有(you)樣品，洗(xi)滌(di)液(ye)和(he)各種(zhong)廢棄物(wu)都(dou)應按(an)傳(chuan)染(ran)物處(chu)理(li)。

9．本(ben)試(shi)劑(ji)不同(tong)批(pi)號(hao)組分(fen)不得(de)混用(yong)。

保存條(tiao)件及有(you)效(xiao)期(qi)

1．試(shi)劑(ji)盒保存：；2-8℃。

2．有效(xiao)期(qi)：6個(ge)月(yue)