【概要描(miao)述(shu)】RT-PCR試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)即(ji)用型PCR試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)改良產(chan)品(pin)， 含(han)有Taq DNA 聚(ju)合酶(mei)、dNTPs、MgCl2、反應(ying)緩沖液、PCR 增強(qiang)劑、上(shang)樣染(ran)料(liao)等(deng)所(suo)有PCR 所(suo)需(xu)要的(de)成(cheng)分，用戶(hu)只需加(jia)入模(mo)板和(he)引(yin)物(wu)即(ji)可進(jin)行(xing)PCR 反應(ying)，具(ju)有廣泛(fan)的(de)用途。

性能指(zhi)標(biao)：
.試(shi)劑(ji)盒(he)檢測(ce)特(te)異(yi)性(xing)為(wei)00%
2. 檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)重(zhong)現(xian)性(xing)為(wei)00%
3. 靈敏(min)度(du)可達(da)到03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為(wei)6個月產(chan)品(pin)名稱(cheng)：RT-PCR試(shi)劑(ji)盒(he)
運輸：低溫(wen)、避(bi)光(guang)、快遞免費(fei)送(song)貨(huo)上門。
用途：生(sheng)化(hua)實(shi)驗，合成(cheng)實(shi)驗等(deng)試(shi)驗(yan)。
運輸及(ji)保存:低溫(wen)運輸,-20℃保(bao)存, 保存期(qi)限(xian)為(wei) 6 個月。
自(zi)備(bei)試(shi)劑(ji)：樣(yang)品(pin) RNA。

?

使(shi)用方法(fa):
壹、樣品(pin) RNA 的(de)制(zhi)備(bei)
、用自選方法(fa)抽提病(bing)毒(du)樣品(pin) RNA。註意(yi)：可以(yi)選用本(ben)公(gong)司的壹管式(shi)病毒(du) RNAout
2、或柱式(shi)病毒(du) RNAout。
二：RT（逆轉(zhuan)錄(lu)）反應(ying)合成(cheng) cDNA
. 按(an)下(xia)表配(pei)制(zhi) RT 反應(ying)體(ti)系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫(wen) 5 分鐘(zhong)變(bian)性模(mo)板後立(li)即(ji)冰浴。
3. 嚴格按(an)順(shun)序加(jia)入 6μL RT Buffer（含(han) dNTP）和(he) 2μL MMLV 逆轉(zhuan)錄(lu)酶(mei)（含 RI），
反應(ying)終體積(ji)為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫(wen) 60 分鐘(zhong)。此(ci)步(bu)為(wei) RT 反應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分鐘(zhong)以(yi)終止(zhi)反應(ying)，然(ran)後放置(zhi)在冰上待用。合成(cheng)的(de) cDNA 可以(yi)直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei) PCR 模板(ban)使(shi)用，丌需要純(chun)化(hua)。
反應(ying)五(wu)要素：
參加(jia)PCR反應(ying)的(de)物(wu)質(zhi)主要有五種(zhong)即(ji)引(yin)物(wu)、酶(mei)、dNTP、模板(ban)和(he)Mg2+
引(yin)物(wu)：引(yin)物(wu)是PCR特(te)異(yi)性(xing)反應(ying)的(de)關鍵，PCR 產(chan)物(wu)的特(te)異(yi)性(xing)取(qu)決(jue)於(yu)引(yin)物(wu)與模(mo)板DNA互補(bu)的程度(du)。理論(lun)上，只要知(zhi)道(dao)任何(he)壹段模板DNA序列， 就(jiu)能按(an)其(qi)設計互補(bu)的寡(gua)核苷(gan)酸(suan)鏈做引(yin)物(wu)，利用PCR就(jiu)可將(jiang)模板DNA在體(ti)外(wai)大(da)量(liang)擴(kuo)增。設計引(yin)物(wu)應(ying)遵(zun)循以(yi)下(xia)原(yuan)則：
①引(yin)物(wu)長(chang)度(du)： 5-30bp，常用為(wei)20bp左右。
②引(yin)物(wu)擴增(zeng)跨度(du)： 以(yi)200-500bp為(wei)宜(yi)，特(te)定條件下(xia)可擴增長(chang)至(zhi)0kb的片(pian)段(duan)。
③引(yin)物(wu)堿基(ji)：G+C含(han)量(liang)以(yi)40-60%為(wei)宜(yi)，G+C太(tai)少擴(kuo)增效(xiao)果(guo)不佳，G+C過多易(yi)出現(xian)非(fei)特(te)異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨(sui)機分布，避(bi)免5個以(yi)上(shang)的(de)嘌呤或嘧啶(ding)核苷(gan)酸(suan)的成(cheng)串(chuan)排列(lie)。
④避(bi)免引(yin)物(wu)內(nei)部(bu)出現(xian)二級(ji)結(jie)構(gou)，避(bi)免兩(liang)條(tiao)引(yin)物(wu)間(jian)互補(bu)，特別(bie)是3'端(duan)的互補(bu)，否(fou)則會(hui)形(xing)成(cheng)引(yin)物(wu)二聚(ju)體(ti)，產生(sheng)非特(te)異(yi)的(de)擴增條帶(dai)。
⑤引(yin)物(wu)3'端的(de)堿基(ji)，特(te)別是末及(ji)倒(dao)數第二個堿基(ji)，應(ying)嚴格要求(qiu)配(pei)對，以(yi)避(bi)免因末端(duan)堿基(ji)不(bu)配(pei)對而(er)導(dao)致(zhi)PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引(yin)物(wu)中有或能加(jia)上(shang)合適的酶(mei)切位點， 被擴增(zeng)的靶序列有適宜(yi)的(de)酶(mei)切位點， 這(zhe)對酶(mei)切分析(xi)或分子(zi)克(ke)隆很(hen)有好(hao)處。
⑦引(yin)物(wu)的特(te)異(yi)性(xing)：引(yin)物(wu)應(ying)與(yu)核酸(suan)序列數據(ju)庫的(de)其(qi)它序列無明(ming)顯(xian)同(tong)源性。
引(yin)物(wu)量(liang)：每(mei)條(tiao)引(yin)物(wu)的濃(nong)度(du)0.～umol或0～00pmol，以(yi)低引(yin)物(wu)量(liang)產(chan)生所(suo)需(xu)要的(de)結(jie)果(guo)為(wei)好(hao)，引(yin)物(wu)濃(nong)度(du)偏高(gao)會(hui)引(yin)起(qi)錯(cuo)配(pei)和(he)非(fei)特異(yi)性(xing)擴增，且可增加(jia)引(yin)物(wu)之間(jian)形(xing)成(cheng)二聚(ju)體(ti)的機(ji)會(hui)。
?啶(ding)-2.6-二羧二甲酯(zhi) 5453-67-8　0次　SureClone RACE Kit　-20℃保(bao)存

5-溴(xiu)戊酯(zhi) 5454-83-　0次　SureClone eTS Core Kit　-20℃保(bao)存

2-硝(xiao)苯(ben)胺 5455-59-4　0次　　

N-(2,3-環(huan)氧(yang)丙基(ji))鄰(lin)苯(ben)二 5455-98-　0次　　

N-乙(yi)基(ji)環(huan)己胺 5459-93-8　0次　　

-羥乙(yi)基(ji)-4-基(ji)哌 5464-2-0　套　　

甘(gan)油縮甲(jia) 5464-28-8　套(tao)　　

2-氨基(ji)-4-甲(jia)氧苯(ben)並噻(sai)唑 5464-79-9　7次　　

2-硝(xiao)基(ji)亞(ya)氨基(ji)咪唑烷(wan) 5465-96-3　0次　　

2-甲(jia)氧(yang)基(ji)-5-硝(xiao)基(ji)-6-基(ji)啶(ding) 5467-69-6　0次　　

2-氨(an)基(ji)-4-溴(xiu)苯(ben)乙酮(tong) 鹽(yan)鹽(yan) 5467-72-　套(tao)　　

2-氨(an)基(ji)-4'-溴(xiu)苯(ben)乙酮(tong) 2098049　000U　p9 siRNA Binding Protein　-20℃保(bao)存

溴(xiu)化(hua)亞(ya)酮(tong) 54678-23-8　50次　p9 miRNA Detection Kit　-20℃保(bao)存

4-氯-2-啶(ding)甲 5470-22-4　00次　EMSA Kit　-20℃保(bao)存

2-基(ji)-4-硝(xiao)基(ji)啶(ding)-N-氧化(hua)物(wu) 5470-66-6　50fpu　rhAP (c-Jun)　4℃保存
RT-PCR試(shi)劑(ji)盒(he)生(sheng)素Ⅷ號培(pei)養基(ji)  規(gui)格: 0.ml  Rat deoxypyridinoline,DPD  

標(biao)準(zhun)平板(ban)計數瓊脂(zhi)培(pei)養基(ji)  規(gui)格: 0.ml  Rat advanced glycation end products,AGEs

平板計數瓊脂(zhi)  規格: 0.2ml  Rat omentin

動力-吲哚(duo)-尿素培(pei)養基(ji)基(ji)礎(chu)  規格: 0.2ml  Rat Vitamin A,VA

醋鉛(qian)培(pei)養基(ji)  規(gui)格: 0.2ml  Rat Vitamin B2,VB2

EF-8瓊脂(zhi)  規格: 0.2ml  Rat Vitamin B6,VB6

雙(shuang)岐(qi)桿(gan)菌生化(hua)基(ji)礎(chu)培(pei)養基(ji)  規(gui)格: 0.ml  Rat Vitamin C,VC

營養瓊脂(zhi)斜面(mian)  規(gui)格(ge): 0.ml  Rat Vitamin D,VD

月桂(gui)基(ji)鹽(yan)胰(yi)蛋白腖肉湯(tang)  規格: 0.ml  Rat Vitamin D2,VD2

月桂(gui)基(ji)鹽(yan)胰(yi)蛋白腖MUG培(pei)養基(ji)  規(gui)格: 0.ml  Rat Vitamin D3,VD3

EC肉湯(tang)  規格: 0.ml  Rat Vitamin E,VE

新(xin)生素增菌肉湯(tang)  規格: 0.ml  Rat Vitamin K,VK

mTSB肉湯(tang)  規格: 0.2ml  Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA99

SD-39瓊脂(zhi)  規格: 0.2ml  Rat Pepsin,PP

乳糖(tang)肉湯(tang)培(pei)養基(ji)  規(gui)格: ml  Rat Motilin,MTL
註意(yi)事項：
①加(jia)入試(shi)劑(ji)的(de)順(shun)序應(ying)*，以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有反應(ying)板(ban)孔(kong)溫(wen)育(yu)的時間(jian)壹樣。
②使用幹凈(jing)的塑(su)料(liao)容器(qi)配(pei)置(zhi)洗滌液。
③按(an)照(zhao)雞(ji)血紅蛋白(HB)ELISA檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書中標(biao)明(ming)的(de)時間(jian)、加(jia)液(ye)的量(liang)及(ji)順(shun)序進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操作。
④底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發，避(bi)免長(chang)時間(jian)打(da)開(kai)蓋子。底物(wu)B對光敏感，避(bi)免長(chang)時間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下(xia)。避(bi)免用手接觸，有毒。實(shi)驗完成(cheng)後應(ying)立(li)即(ji)讀取(qu)OD值(zhi)。
⑤洗滌酶(mei)標(biao)板時應(ying)充(chong)分拍(pai)幹，不(bu)要將(jiang)吸(xi)水紙直(zhi)接(jie)放入酶(mei)標(biao)反應(ying)孔(kong)中吸(xi)水。
⑥使用壹次性(xing)的(de)吸(xi)頭以(yi)免交叉(cha)汙染(ran)，吸(xi)取(qu)終止(zhi)液和(he)底(di)物(wu)A、B液時，避(bi)免使(shi)用帶金屬(shu)部(bu)分的(de)加(jia)樣(yang)器 。
⑦實(shi)驗中(zhong)不(bu)用的板條應(ying)立(li)即(ji)放回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋中(zhong)，密(mi)封(feng)保存，以(yi)免變(bian)質(zhi)。
⑧試(shi)劑(ji)應(ying)按(an)標(biao)簽說明(ming)書儲(chu)存，使用前恢復(fu)到室溫(wen)。稀稀過後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)丟(diu)棄，不(bu)可保存。
⑨不用的其(qi)它試(shi)劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋好(hao)。不同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)不(bu)要混用。保質(zhi)前(qian)使(shi)用。