【概(gai)要描述】實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR試劑(ji)盒註(zhu)意事項(xiang)：．基礎(chu)程序(xu)；2．擴(kuo)增(zeng)溫(wen)度和(he)延(yan)伸溫(wen)度；3．反(fan)應時(shi)間(jian)；4．循(xun)環次(ci)數(shu)；5．PCR 反(fan)應液(ye)的(de)配制；6．PCR技術(shu)的(de)基本(ben)原(yuan)理(li)；7．PCR的(de)反(fan)應動(dong)力(li)學；8．PCR擴(kuo)增(zeng)產(chan)物；9．PCR反(fan)應體系(xi)與(yu)反(fan)應條(tiao)件(jian)。

實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR試劑(ji)盒常(chang)見問題：
壹(yi).沒有擴(kuo)增(zeng)產(chan)物
.循(xun)環溫(wen)度：變性(xing)溫(wen)度、退火(huo)溫(wen)度
2.引物設(she)計(ji)
3.DNA聚(ju)合(he)酶活(huo)性
4.抑制性成(cheng)份(fen)(蛋白酶、核酸(suan)酶(mei)、其(qi)它(ta)抑(yi)制聚合(he) 酶活(huo)性的(de)成(cheng)份(fen))
5、DNA樣(yang)品(pin)
二(er).非(fei)特異產(chan)物及電泳(yong)呈塗布狀
.Mg2 濃(nong)度
2.調整引物、模(mo)板、聚(ju)合(he)酶的(de)用(yong)量
3.適當減少循(xun)環數(shu)
4.適(shi)當提(ti)高退火(huo)溫(wen)度，縮短(duan)退(tui)火或延(yan)伸時間(jian)?

?
使用(yong)及效果(guo)：
PCR反(fan)應特(te)點(dian)
() 特(te)異性強
PCR反(fan)應的(de)特異(yi)性(xing)決定(ding)因(yin)素(su)為：
①引物與(yu)模(mo)板DNA特(te)異正(zheng)確的(de)結(jie)合(he)；
②堿基配(pei)對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與(yu)保守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引(yin)物與(yu)模(mo)板的(de)正(zheng)確結(jie)合(he)是關鍵。引物與(yu)模(mo)板的(de)結(jie)合(he)及引(yin)物鏈的(de)延(yan)伸是遵循(xun)堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則的(de)。聚合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶耐(nai)高溫(wen)性(xing)，使反(fan)應中(zhong)模(mo)板與(yu)引物的(de)結(jie)合(he)(復性(xing))可以(yi)在較高的(de)溫(wen)度下(xia)進行，結(jie)合(he)的(de)特異(yi)性(xing)大大增(zeng)加，被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基因(yin)片段也(ye)就能保持(chi)很高的(de)正(zheng)確度。再通(tong)過(guo)選擇(ze)特(te)異性和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的(de)靶(ba)基因(yin)區，其(qi)特(te)異性(xing)程度就更高。
(2) 靈(ling)敏(min)度高
PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量是以指(zhi)數(shu)方(fang)式增(zeng)加的(de)，能將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=0-2g)量級的(de)起始(shi)待測(ce)模(mo)板擴(kuo)增(zeng)到(dao)微克(ke)(ug=0-6g)水平(ping)。能從00萬(wan)個(ge)細(xi)胞中(zhong)檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶(ba)細(xi)胞；在病毒的(de)檢測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度可達3個(ge)RFU(空(kong)斑形成(cheng)單位)；在細(xi)菌(jun)學中(zhong)zui小(xiao)檢出(chu)率(lv)為3個細(xi)菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速
PCR反(fan)應用(yong)耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚合(he)酶，壹(yi)次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反(fan)應液(ye)加(jia)好(hao)後(hou)，即(ji)在DNA擴(kuo)增(zeng)液和(he)水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進行變(bian)性(xing)-退火(huo)-延(yan)伸反(fan)應，壹(yi)般在2～4 小時完成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反(fan)應。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物壹般用(yong)電泳(yong)分析(xi)，不壹(yi)定要(yao)用(yong)同位素(su)，無放(fang)射性汙(wu)染(ran)、易推廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的(de)純(chun)度要求(qiu)低
不需要分離病毒或細(xi)菌(jun)及培(pei)養(yang)細(xi)胞，DNA 粗(cu)制品(pin)及(ji)總RNA均可作(zuo)為擴(kuo)增(zeng)模(mo)板。可(ke)直接(jie)用(yong)臨床(chuang)標(biao)本如血液(ye)、體腔(qiang)液(ye)、洗嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞、活(huo)PCR技術概論。
?乙酰乙異(yi)丙(bing)酯 542-08-5　00次(ci)　　

delta-戊(wu)內(nei)酯 542-28-9　00µg　Human Genomic DNA　4℃保(bao)存

2-氨(an)基己(ji)二水合(he)物 542-32-5　00µg　Human Genomic DNA　4℃保存

3-氯丙 542-76-7　00µg　Human Genomic DNA Mix　4℃保(bao)存

4-溴(xiu)哌啶鹽 54288-70-9　00µg　Mouse Genomic DNA　4℃保存

4-氨(an)苯乙(yi)乙酯 5438-70-0　30µg　Human Culture Cell Genomic DNA 　4℃保存

2-基-3-三(san)氟基胺 54396-44-0　50次(ci)　TRAP Kit　-20℃保(bao)存

亞(ya)硝(xiao)丁(ding)酯(zhi) 544-6-　600次(ci)　AFLP Kit（EcoRI-MseI）　-20℃保(bao)存

2,6-二(er)羥基-3-基-4-基啶 5444-02-0　5次(ci)　cDNA Library Construction Kit　Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保(bao)存，3 M Sodium Acetate（pH5.2） 4℃保(bao)存，Spin Column 4℃保(bao)存，FALCON Tube 常(chang)溫(wen)保(bao)存，E.coli Electro-Cells -80℃保(bao)存，SOC 4℃保(bao)存，其(qi)他(ta)組份(fen)-20℃保存

2-溴(xiu)己(ji)酯 5445-9-2　套(tao)　One-Stop PCR-SSCP Pack　除(chu)PCR MagicMix 2.0需要-20℃保存外(wai)，其余(yu)成(cheng)分可以(yi)保(bao)存

4-硝(xiao)苯乙(yi)乙酯 5445-26-　00次(ci)　RAPD PCR Kit　除(chu)PCR MagicMix 2.0需要-20℃保存外(wai)，其余(yu)成(cheng)分可以(yi)保(bao)存

4-甲氧基水楊酯 29588　50次(ci)　DOP-PCR Kit　-20℃保(bao)存

十六烷 544-77-4　0次(ci)　SSH-PCR Kit　-20℃保(bao)存

二(er)基鋅(xin) 544-97-8　0次(ci)　3'-RACE Kit　-20℃保(bao)存

-溴(xiu)-5-氯戊(wu)烷(wan) 5452-75-3　0次(ci)　5'-RACE Kit　-20℃保(bao)存
去(qu)氧膽(dan)鹽瓊脂  規格(ge): 0.2ml  Rat glucocorticoid receptor-α,GR-α  

中(zhong)國(guo)藍乳糖瓊脂  規格(ge): 0.ml  Rat glucocorticoid receptor-β,GR-β  

膽(dan)乳瓊脂  規格(ge): 0.2ml  Rat glucocorticoid receptor,GR  

慶(qing)大(da)素瓊脂  規格(ge): 0.2ml  Rat carbohydrate-deficient transferrin,CDT

米(mi)勒(le)-海頓(dun)瓊脂  規格(ge): 0.2ml  Rat glycogen synthase kinase,GSK

米(mi)勒(le)-海頓(dun)肉(rou)湯(tang)  規格(ge): 0.2ml  Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB

抗(kang)生素(su)Ⅰ號培養(yang)基（Ph6.5～6.6）  規格(ge): 0.2ml  Rat Glycogen phosphorylase II,GP-II

抗(kang)生素(su)Ⅰ號培養(yang)基（Ph7.8～8.0）  規格(ge): 0.ml  Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM

抗(kang)生素(su)Ⅱ號培養(yang)基（Ph6.5～6.6）  規格(ge): 0.2ml  Rat ferritin,FE

抗(kang)生素(su)Ⅱ號培養(yang)基（Ph7.8～8.0）  規格(ge): 0.ml  Rat Homocysteic acid,Hcy

抗(kang)生素(su)Ⅲ號培養(yang)基  規格(ge): 0.ml  Rat Hyaluronic acid,HA

抗(kang)生素(su)Ⅳ號培養(yang)基  規格(ge): 0.ml  Rat Hya]uronate binding protein,HABP

抗(kang)生素(su)Ⅴ號培養(yang)基  規格(ge): 0.2ml  Rat Melatonin,MT/MLT

抗(kang)生素(su)Ⅵ號培養(yang)基  規格(ge): 0.ml  Rat Dehydroepiandrosterone,DHEA

抗(kang)生Ⅶ號培養(yang)基  規格(ge): 0.ml  Rat Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7
特(te)點(dian)：
. 實(shi)時(shi)熒(ying)光(guang)PCR試劑(ji)盒即(ji)開即(ji)用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要提供樣(yang)品(pin) DNA 模(mo)板，操(cao)作(zuo)簡(jian)單，定(ding)量(liang)準(zhun)確快(kuai)速。
2. 引物經(jing)過(guo)優化(hua)，特(te)異(yi)性強。預(yu)期的(de) PCR 產(chan)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中(zhong)含(han)上(shang)樣(yang)染(ran)料，PCR 後(hou)可以直(zhi)接上(shang)樣(yang)電泳(yong)。
4. 提供陽性(xing)對(dui)照(zhao)，便於分析(xi)試驗結(jie)果(guo)。
用(yong)途：
. 方(fang)便，用(yong)戶只(zhi)需準(zhun)備(bei)模(mo)板和(he)引(yin)物既可(ke)以(yi)進行PCR 實(shi)驗。
2. 快(kuai)捷(jie)，操(cao)作(zuo)步(bu)驟已(yi)經(jing)限度地簡(jian)化，能減少汙(wu)染(ran)，降低實(shi)驗誤(wu)差。
3. 本(ben)產(chan)品(pin)A 型(xing)含(han)電泳(yong)染(ran)料，PCR 反(fan)應液(ye)可(ke)直(zhi)接上(shang)樣(yang)電泳(yong)，進壹步(bu)簡(jian)化了(le)操(cao)作(zuo)。
4. 由於各(ge)成(cheng)分的(de)濃(nong)度和(he)比(bi)例都(dou)經(jing)過(guo)精(jing)心(xin)優化，反(fan)應的(de)靈(ling)敏(min)度高，特異(yi)性強。能擴(kuo)增(zeng)各(ge)種常見的(de)DNA 樣(yang)品(pin)。
5. 產(chan)物可直(zhi)接(jie)用(yong)於T 載體克(ke)隆，不需要額(e)外(wai)的(de)加A 反(fan)應。
使用(yong)及效果(guo)：將(jiang)本(ben)產(chan)品(pin)5 μL 與(yu)用(yong)戶自備(bei)的(de)模(mo)板，引(yin)物和(he)水共5 μL 混(hun)合(he)後(hou)，直接進行PCR反(fan)（PCR 參數(shu)由用(yong)戶自己(ji)確定(ding)），反(fan)應結(jie)束後(hou)直接取0 μL 電泳(yong)檢查擴(kuo)增(zeng)結(jie)果(guo)。