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桔(ju)青(qing)黴PCR檢測試(shi)劑盒(he)使用方法(fa):
壹(yi)、樣(yang)品 RNA 的制備
、用自選(xuan)方法抽(chou)提病毒樣(yang)品 RNA。註意(yi):可以選(xuan)用本(ben)公(gong)司的壹(yi)管式(shi)病毒 RNAout
2、或柱(zhu)式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反(fan)應合(he)成 cDNA
. 按(an)下表(biao)配(pei)制 RT 反(fan)應體系(xi)(20 μL 體系(xi))
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分鐘變性(xing)模板後(hou)立即冰浴(yu)。
3. 嚴格(ge)按(an)順(shun)序(xu)加(jia)入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(mei)(含 RI),
反(fan)應終體積(ji)為 20μL。
4. 42℃保(bao)溫 60 分鐘。此(ci)步為 RT 反(fan)應。
5. 70℃保(bao)溫 0 分鐘以(yi)終止反(fan)應,然(ran)後(hou)放置在(zai)冰上(shang)待用。合成(cheng)的 cDNA 可以直接(jie)作(zuo)為 PCR 模(mo)板使用,丌需(xu)要純化(hua)。
產品名(ming)稱(cheng):桔(ju)青(qing)黴PCR檢測試(shi)劑盒(he)
英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng):Penicillium citrinumPCR
規(gui)格(ge):詳見(jian)說(shuo)明(ming)書(shu)
類別(bie):PCR檢測試(shi)劑盒(he)
運輸:低(di)溫(wen)、避(bi)光(guang)、快遞(di)免(mian)費(fei)送貨(huo)上(shang)門。
用途(tu):生(sheng)化(hua)實(shi)驗,合成(cheng)實(shi)驗等(deng)試驗。
運輸(shu)及(ji)保(bao)存(cun):低溫(wen)運輸,-20℃保存(cun), 保存(cun)期限(xian)為 6 個(ge)月(yue)。
自備試劑:樣(yang)品 RNA。

性(xing)能指(zhi)標(biao):點擊(ji)了(le)解更多(duo)PCR檢測試(shi)劑盒(he)。
.桔青黴PCR檢測試(shi)劑盒(he)試劑盒(he)檢測特(te)異性為00%
2. 檢測試(shi)劑盒(he)重現(xian)性(xing)為00%
3. 靈敏(min)度(du)可達到03/ml
4. 有(you)效期(qi)為6個(ge)月(yue)
註意(yi)事(shi)項(xiang):
①加(jia)入試劑的順(shun)序(xu)應*,以保(bao)證所(suo)有(you)反(fan)應板孔溫(wen)育(yu)的時(shi)間壹(yi)樣(yang)。
②使用幹凈(jing)的塑(su)料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置洗滌液。
③按(an)照雞血(xue)紅(hong)蛋(dan)白(bai)(HB)ELISA檢測試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明的時(shi)間、加(jia)液的量(liang)及(ji)順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操作(zuo)。
④底(di)物A應(ying)揮(hui)發(fa),避免(mian)長時(shi)間打(da)開蓋子(zi)。底(di)物B對光(guang)敏(min)感,避免長(chang)時(shi)間暴露(lu)於光(guang)下。避免用手接(jie)觸(chu),有(you)毒。實驗完成(cheng)後(hou)應立即讀取(qu)OD值(zhi)。
⑤洗滌酶(mei)標(biao)板時(shi)應充(chong)分(fen)拍(pai)幹,不要(yao)將吸(xi)水(shui)紙直接(jie)放入酶(mei)標(biao)反(fan)應孔中(zhong)吸水(shui)。
⑥使用壹(yi)次性(xing)的吸(xi)頭(tou)以(yi)免(mian)交(jiao)叉汙染(ran),吸(xi)取(qu)終止液和底(di)物A、B液時(shi),避免(mian)使用帶(dai)金(jin)屬部(bu)分的加(jia)樣(yang)器(qi) 。
⑦實(shi)驗中(zhong)不用的板條(tiao)應(ying)立即放回包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密封保存(cun),以免(mian)變質(zhi)。
⑧試劑應(ying)按(an)標(biao)簽說(shuo)明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun),使用前恢(hui)復到(dao)室溫(wen)。稀稀過(guo)後(hou)的標(biao)準品(pin)應(ying)丟棄(qi),不可保存(cun)。
⑨不用的其它(ta)試(shi)劑應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好(hao)。不同批號(hao)的試(shi)劑不(bu)要(yao)混用。保質(zhi)前使用。
反(fan)應五要(yao)素:
桔青(qing)黴PCR檢測試(shi)劑盒(he)參加(jia)PCR反(fan)應的物(wu)質(zhi)主要(yao)有(you)五種(zhong)即(ji)引物、酶(mei)、dNTP、模(mo)板和Mg2+
引物(wu):引物(wu)是(shi)PCR特(te)異性反(fan)應的關鍵(jian),PCR 產物的特(te)異性取(qu)決(jue)於(yu)引物與(yu)模板DNA互(hu)補的程(cheng)度(du)。理論(lun)上(shang),只要知道(dao)任何壹(yi)段(duan)模(mo)板DNA序(xu)列, 就(jiu)能按(an)其設計互(hu)補(bu)的寡核(he)苷酸(suan)鏈(lian)做(zuo)引物(wu),利用PCR就(jiu)可將模板DNA在(zai)體外(wai)大量(liang)擴(kuo)增。設計引(yin)物(wu)應遵(zun)循以(yi)下原則:
①引物(wu)長(chang)度: 5-30bp,常用為20bp左右(you)。
②引物(wu)擴增跨度: 以200-500bp為宜(yi),特(te)定(ding)條(tiao)件(jian)下(xia)可擴增長至(zhi)0kb的片(pian)段(duan)。
③引(yin)物(wu)堿(jian)基:G+C含量以(yi)40-60%為宜(yi),G+C太少(shao)擴增(zeng)效果(guo)不(bu)佳(jia),G+C過(guo)多(duo)易(yi)出(chu)現(xian)非(fei)特(te)異條(tiao)帶(dai)。ATGC隨(sui)機分布,避(bi)免(mian)5個(ge)以(yi)上(shang)的嘌呤(ling)或(huo)嘧啶(ding)核(he)苷酸(suan)的成(cheng)串排(pai)列。
④避(bi)免(mian)引物(wu)內(nei)部出(chu)現(xian)二(er)級結(jie)構(gou),避(bi)免(mian)兩(liang)條(tiao)引(yin)物間互補(bu),特(te)別(bie)是3'端(duan)的互(hu)補(bu),否則會形成引(yin)物(wu)二聚體,產生非(fei)特(te)異的擴(kuo)增(zeng)條(tiao)帶(dai)。
⑤引(yin)物3'端(duan)的堿(jian)基,特(te)別(bie)是末及(ji)倒(dao)數第(di)二個(ge)堿(jian)基,應嚴格(ge)要求(qiu)配(pei)對,以避免因(yin)末端(duan)堿(jian)基不配(pei)對而(er)導(dao)致(zhi)PCR失(shi)敗。
⑥引物中(zhong)有(you)或(huo)能(neng)加(jia)上(shang)合適(shi)的酶(mei)切位點, 被(bei)擴(kuo)增的靶(ba)序(xu)列有(you)適(shi)宜(yi)的酶(mei)切位點, 這(zhe)對酶(mei)切分析(xi)或分(fen)子(zi)克隆很有(you)好(hao)處(chu)。
⑦引(yin)物的特(te)異性:引物(wu)應(ying)與(yu)核(he)酸序(xu)列(lie)數據庫(ku)的其它(ta)序(xu)列(lie)無(wu)明(ming)顯(xian)同源性(xing)。
引物量(liang):每(mei)條(tiao)引(yin)物的濃(nong)度0.~umol或(huo)0~00pmol,以(yi)低(di)引物量(liang)產生所(suo)需(xu)要的結(jie)果(guo)為好(hao),引物濃(nong)度偏(pian)高(gao)會(hui)引(yin)起(qi)錯配(pei)和非特(te)異性擴增(zeng),且(qie)可增加(jia)引物(wu)之(zhi)間(jian)形成二(er)聚(ju)體的機會。
柱(zhu)式BAC DNAout 英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Trisodium trimetaphosphate,≥95%CAS No.:7785-84-4規(gui)格(ge)(SP):500G類別(bie)(Key):通用試劑
中(zhong)提柱(zhu)式BAC DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium metaborate tetrahydrate,≥99%CAS No.:0555-76-7規(gui)格(ge)(SP):250G類別(bie)(Key):通用試劑
柱(zhu)式Ti質(zhi)粒DNAout 英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium metasilicate pentahydrate,≥95.0%CAS No.:023-79-3規(gui)格(ge)(SP):250G類別(bie)(Key):通用試劑
大提(ti)柱(zhu)式Ti質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium perchlorate monohydrate (HPLC,...CAS No.:25829規(gui)格(ge)(SP):50G類別(bie)(Key):通用試劑
柱(zhu)式質(zhi)粒 DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium tert-butoxide,97%CAS No.:865-48-5規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
柱(zhu)式質(zhi)粒 DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium dimethyldithiocarbamate hydrate...CAS No.:207233-95-2規(gui)格(ge)(SP):5G類別(bie)(Key):通用試劑
革(ge)氏(shi)陽性(xing)細(xi)菌質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium cacodylate trihydrate,≥98%CAS No.:63-99-3規(gui)格(ge)(SP):5G類別(bie)(Key):通用試劑
柱(zhu)式無(wu)內(nei)毒素質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium acetylide suspension,8 wt. %CAS No.:066-26-8規(gui)格(ge)(SP):00G類別(bie)(Key):通用試劑
大提(ti)柱(zhu)式質(zhi)粒 DNAout 英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Levothyroxine sodium hydrate,99 %CAS No.:2056規(gui)格(ge)(SP):G類別(bie)(Key):通用試劑
大提(ti)柱(zhu)式質(zhi)粒 DNAout 英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium -naphthalenesulfonate (HPLC,≥...CAS No.:30-4-3規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
大提(ti)無(wu)內(nei)毒素質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium laurylsulfonate,≥99%CAS No.:2386-53-0規(gui)格(ge)(SP):250G類別(bie)(Key):通用試劑
大提(ti)無(wu)內(nei)毒素質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Ethylenediaminetetraacetic acid tetras...CAS No.:0378-23-規(gui)格(ge)(SP):00G類別(bie)(Key):通用試劑
96孔板質(zhi)粒DNAout(離(li)心(xin)法(fa))英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium ,5-naphthalenedisulfonate diba...CAS No.:655-29-4規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
96孔板質(zhi)粒DNAout(真(zhen)空(kong)法)英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium dicy*,96%CAS No.:934-75-4規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
壹(yi)步法質(zhi)粒 DNAout 2.0英(ying)文(wen)名(ming)(EN):-Naphthyl phsophoric acid sodium salt...CAS No.:283-7-7規(gui)格(ge)(SP):250MG類別(bie)(Key):通用試劑
壹(yi)步法質(zhi)粒 DNAout 2.0英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium phosphomolybadate hydrateCAS No.:33-30-0規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
壹(yi)步法無(wu)內(nei)毒素質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Carboxy methyl starch sodiumCAS No.:9063-38-規(gui)格(ge)(SP):00G類別(bie)(Key):通用試劑
壹(yi)步法大提(ti)質(zhi)粒DNAout英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Sodium thioglycolate,≥96.5%CAS No.:367-5-規(gui)格(ge)(SP):25G類別(bie)(Key):通用試劑
桔(ju)青(qing)黴PCR檢測試(shi)劑盒(he)通用型(xing)辣(la)椒輕斑駁病毒(Pepper Mild Mottle Virus;PMMV)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)洋(yang)李痘(dou)皰病毒(Plum Pox Virus;PPV)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)馬(ma)鈴薯(shu)卷(juan)葉(ye)病毒(Potato Leafroll Virus;PLRV)基因(yin)檢測試(shi)劑 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)馬(ma)鈴薯(shu)X病毒(Potato Virus X;PVX)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)馬(ma)鈴薯(shu)Y病毒(Potato Virus Y;PVY)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)馬(ma)鈴薯(shu)YN病毒(Potato Virus YN;PVYN)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)李屬壞死環(huan)斑(ban)病毒(Prunus Necrotic Ringspot Virus;PNRSV)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)懸(xuan)鉤(gou)子叢(cong)矮(ai)病毒(Raspberry Bushy Dwarf Virus;RBDV)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)馬(ma)鈴薯(shu)潛(qian)伏(fu)毒(Red LaSoda Virus;RLaSV/ Potato latent Virus)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
通(tong)用型(xing)小(xiao)南(nan)瓜(gua)花(hua)葉病毒(Squash Mosaic Virus;SMV)基因(yin)檢測試(shi)劑盒(he) 進(jin)口(kou)/國產 規(gui)格(ge):20次
企(qi)業信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷(gu)研(yan)實(shi)業有(you)限(xian)公(gong)司
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