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產(chan)品名稱:犬(quan)惡(e)絲(si)蟲(chong)PCR檢測試劑盒
英文名稱:Dirofilaria immitisPCR
規格:詳(xiang)見說明(ming)書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yun)輸(shu):低(di)溫(wen)、避光、快(kuai)遞免(mian)費送貨(huo)上(shang)門。
用(yong)途(tu):生(sheng)化實驗,合(he)成實(shi)驗等(deng)試驗。
運(yun)輸及保(bao)存:低(di)溫(wen)運輸,-20℃保(bao)存, 保(bao)存期限為 6 個月(yue)。
自備試劑:樣(yang)品(pin) RNA。
性(xing)能指標:點(dian)擊(ji)了(le)解(jie)更多PCR檢測試劑盒。
.犬(quan)惡(e)絲(si)蟲(chong)PCR檢測試劑盒試劑盒檢測特(te)異(yi)性(xing)為00%
2. 檢測試劑盒重現性(xing)為00%
3. 靈(ling)敏(min)度可達到03/ml
4. 有(you)效(xiao)期為6個月(yue)

使(shi)用方法:
壹(yi)、犬(quan)惡(e)絲(si)蟲(chong)PCR檢測試劑盒樣(yang)品(pin) RNA 的制(zhi)備
、用(yong)自選方法抽(chou)提病(bing)毒(du)樣(yang)品 RNA。註(zhu)意(yi):可以選用本(ben)公司(si)的壹(yi)管(guan)式(shi)病(bing)毒(du) RNAout
2、或(huo)柱式(shi)病(bing)毒(du) RNAout。
二:RT(逆轉(zhuan)錄)反應合(he)成 cDNA
. 按(an)下表配(pei)制(zhi) RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分鐘變(bian)性(xing)模板(ban)後立即(ji)冰浴。
3. 嚴(yan)格按(an)順序(xu)加(jia)入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuan)錄酶(mei)(含 RI),
反(fan)應終(zhong)體積(ji)為 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分鐘以終止(zhi)反(fan)應,然(ran)後放(fang)置(zhi)在(zai)冰上(shang)待(dai)用。合(he)成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板(ban)使(shi)用,丌需(xu)要(yao)純(chun)化。
註(zhu)意(yi)事項(xiang):
①加(jia)入(ru)試劑的順(shun)序(xu)應*,以保(bao)證(zheng)所(suo)有(you)反應板(ban)孔溫(wen)育(yu)的時(shi)間(jian)壹(yi)樣。
②使(shi)用幹凈(jing)的塑料(liao)容器(qi)配置(zhi)洗滌(di)液。
③按(an)照雞(ji)血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說(shuo)明(ming)書中(zhong)標明(ming)的時(shi)間(jian)、加(jia)液的量及順(shun)序(xu)進(jin)行溫(wen)育(yu)操作(zuo)。
④底物(wu)A應揮(hui)發(fa),避免長(chang)時(shi)間(jian)打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對(dui)光敏(min)感,避免長(chang)時(shi)間(jian)暴(bao)露(lu)於光下(xia)。避免用(yong)手接(jie)觸(chu),有(you)毒(du)。實(shi)驗完(wan)成後應立即(ji)讀(du)取(qu)OD值。
⑤洗滌(di)酶(mei)標板(ban)時應充(chong)分拍(pai)幹,不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水紙直(zhi)接(jie)放入(ru)酶(mei)標反(fan)應孔(kong)中吸(xi)水。
⑥使(shi)用壹次(ci)性(xing)的吸(xi)頭以免交叉(cha)汙(wu)染(ran),吸(xi)取終止(zhi)液(ye)和底物(wu)A、B液(ye)時,避免使(shi)用帶金(jin)屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣(yang)器(qi) 。
⑦實驗中(zhong)不用(yong)的板(ban)條(tiao)應立即(ji)放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中,密(mi)封保(bao)存,以免變(bian)質(zhi)。
⑧試劑應按(an)標簽(qian)說明(ming)書儲存,使(shi)用前(qian)恢復到室(shi)溫(wen)。稀稀過(guo)後的標準(zhun)品應丟(diu)棄(qi),不可保(bao)存。
⑨不(bu)用(yong)的其(qi)它(ta)試劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好(hao)。不同(tong)批號(hao)的試劑不(bu)要(yao)混(hun)用。保(bao)質前(qian)使(shi)用。
反應五(wu)要(yao)素(su):
犬(quan)惡(e)絲(si)蟲(chong)PCR檢測試劑盒參(can)加(jia)PCR反(fan)應的物(wu)質(zhi)主(zhu)要(yao)有(you)五(wu)種即(ji)引(yin)物、酶(mei)、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引(yin)物:引(yin)物是(shi)PCR特(te)異(yi)性(xing)反(fan)應的關(guan)鍵,PCR 產物的特(te)異(yi)性(xing)取(qu)決(jue)於(yu)引(yin)物與模板(ban)DNA互補(bu)的程(cheng)度。理(li)論上(shang),只(zhi)要(yao)知(zhi)道任(ren)何(he)壹段(duan)模板(ban)DNA序(xu)列(lie), 就(jiu)能按(an)其設計(ji)互補(bu)的寡(gua)核苷酸(suan)鏈做引(yin)物,利(li)用PCR就(jiu)可將(jiang)模板(ban)DNA在(zai)體外大(da)量擴增(zeng)。設計(ji)引(yin)物應遵循(xun)以下原則:
①引(yin)物長(chang)度: 5-30bp,常(chang)用為20bp左(zuo)右。
②引(yin)物擴增(zeng)跨(kua)度: 以200-500bp為宜,特(te)定(ding)條(tiao)件(jian)下(xia)可擴增(zeng)長(chang)至(zhi)0kb的片(pian)段(duan)。
③引(yin)物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增(zeng)效(xiao)果(guo)不佳,G+C過多易(yi)出現非特(te)異(yi)條(tiao)帶。ATGC隨(sui)機(ji)分布(bu),避免5個以上(shang)的嘌呤或(huo)嘧(mi)啶核苷酸(suan)的成(cheng)串(chuan)排(pai)列(lie)。
④避免引(yin)物內(nei)部(bu)出(chu)現二級結構,避免兩(liang)條(tiao)引(yin)物間(jian)互補(bu),特(te)別(bie)是(shi)3'端的互補(bu),否則(ze)會(hui)形成(cheng)引(yin)物二聚體,產(chan)生非特(te)異(yi)的擴增(zeng)條(tiao)帶。
⑤引(yin)物3'端的堿基,特(te)別(bie)是(shi)末及倒(dao)數第(di)二個堿基,應嚴(yan)格要(yao)求(qiu)配(pei)對,以避免因(yin)末端堿基不配(pei)對(dui)而導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引(yin)物中(zhong)有(you)或能加上(shang)合(he)適的酶(mei)切位點, 被擴增(zeng)的靶(ba)序(xu)列(lie)有(you)適宜的酶(mei)切位點, 這對酶(mei)切分析或分子(zi)克(ke)隆很有(you)好(hao)處(chu)。
⑦引(yin)物的特(te)異(yi)性(xing):引(yin)物應與核酸(suan)序(xu)列(lie)數據(ju)庫(ku)的其(qi)它(ta)序(xu)列(lie)無(wu)明(ming)顯(xian)同(tong)源(yuan)性(xing)。
引(yin)物量:每(mei)條(tiao)引(yin)物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引(yin)物量產(chan)生(sheng)所(suo)需(xu)要(yao)的結果為好(hao),引(yin)物濃度偏高(gao)會(hui)引(yin)起錯配和非特(te)異(yi)性(xing)擴增(zeng),且(qie)可增(zeng)加(jia)引(yin)物之間(jian)形(xing)成二聚體的機(ji)會(hui)。
枸櫞(yuan)酸(suan)西(xi)地標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)A標準(zhun)品 英文名稱: CAS:86357-09-7
-N-甲基(ji)標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)D標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)C標準(zhun)品 英文名稱: CAS:908-30-3
相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)B標準(zhun)品 英文名稱: CAS:908-29-0
相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)A標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
格拉(la)司(si)瓊相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)E標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
格拉(la)司(si)瓊相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)D標準(zhun)品 英文名稱: CAS:50890-83-0
格拉(la)司(si)瓊相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)C標準(zhun)品 英文名稱: CAS:436-0-8
格拉(la)司(si)瓊相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)B標準(zhun)品 英文名稱: CAS:07007-95-4
格拉(la)司(si)瓊相(xiang)關(guan)物(wu)質(zhi)A標準(zhun)品 英文名稱: CAS:27472-42-8
戈(ge)舍(she)瑞林雜質標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
戈(ge)舍(she)瑞林環(huan)境標準(zhun)品 英文名稱: CAS:
高(gao)分子(zi)人體胰(yi)島素(su)標準(zhun)品 英文名稱: CAS:06-68-0
犬(quan)惡(e)絲(si)蟲(chong)PCR檢測試劑盒稻(dao)麥(mai)類食物DNA分離(li)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:0次(ci)
乳品(pin)類食物DNA分離(li)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:0次(ci)
食物(wu)DNA高(gao)質純(chun)化試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
油脂(zhi)DNA萃取(qu)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:0次(ci)
動物(wu)毛(mao)發(fa)DNA萃(cui)取試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
動物(wu)牙齒(chi)DNA萃(cui)取(qu)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
動物(wu)指(趾)甲(jia)DNA萃取(qu)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
動物(wu)骨DNA萃取(qu)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
樹脂(zhi)法血跡DNA萃(cui)取(qu)試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
樹脂(zhi)法毛(mao)發(fa)DNA萃(cui)取試劑盒 進(jin)口(kou)/國(guo)產 規(gui)格:20次(ci)
企業信(xin)息(xi)
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