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產品名稱:異(yi)尖(jian)線(xian)蟲(chong)屬(shu)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)
英(ying)文(wen)名稱:Anisakis spp.PCR
規(gui)格:詳(xiang)見說明書
類(lei)別:PCR檢測(ce)試(shi)劑盒(he)
運(yun)輸(shu):低(di)溫(wen)、避(bi)光(guang)、快(kuai)遞(di)免(mian)費送貨(huo)上(shang)門。
用(yong)途(tu):生(sheng)化(hua)實(shi)驗(yan),合成實驗等試(shi)驗(yan)。
運輸及保(bao)存(cun):低(di)溫(wen)運輸(shu),-20℃保(bao)存(cun), 保(bao)存(cun)期(qi)限(xian)為(wei) 6 個月。
自備(bei)試(shi)劑:樣品 RNA。
性(xing)能(neng)指(zhi)標:點(dian)擊(ji)了(le)解(jie)更(geng)多(duo)PCR檢測(ce)試(shi)劑盒(he)。
.異(yi)尖(jian)線(xian)蟲(chong)屬(shu)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)試(shi)劑(ji)盒(he)檢測(ce)特(te)異(yi)性為(wei)00%
2. 檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)重現性為(wei)00%
3. 靈(ling)敏度可(ke)達到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為(wei)6個月

使用(yong)方法(fa):
壹、異(yi)尖(jian)線(xian)蟲(chong)屬(shu)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)樣品 RNA 的(de)制(zhi)備
、用(yong)自選(xuan)方法(fa)抽(chou)提病毒樣品 RNA。註(zhu)意(yi):可(ke)以(yi)選(xuan)用(yong)本公(gong)司(si)的(de)壹管(guan)式病毒 RNAout
2、或(huo)柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆(ni)轉錄)反應合(he)成(cheng) cDNA
. 按下(xia)表配制(zhi) RT 反應體(ti)系(xi)(20 μL 體系(xi))
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分鐘(zhong)變(bian)性模(mo)板(ban)後(hou)立即(ji)冰浴(yu)。
3. 嚴格(ge)按(an)順(shun)序加入 6μL RT Buffer(含(han) dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(mei)(含(han) RI),
反應終(zhong)體(ti)積為(wei) 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分鐘(zhong)。此(ci)步(bu)為(wei) RT 反應。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分鐘(zhong)以(yi)終(zhong)止反應,然後放(fang)置在(zai)冰(bing)上(shang)待用(yong)。合(he)成(cheng)的(de) cDNA 可(ke)以(yi)直(zhi)接作為(wei) PCR 模(mo)板(ban)使(shi)用(yong),丌(ji)需要(yao)純(chun)化。
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):
①加入試(shi)劑(ji)的(de)順(shun)序應(ying)*,以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有反應板(ban)孔(kong)溫(wen)育的(de)時間壹樣。
②使用(yong)幹凈的(de)塑(su)料容(rong)器配置(zhi)洗(xi)滌液。
③按(an)照雞(ji)血(xue)紅(hong)蛋(dan)白(HB)ELISA檢測(ce)試(shi)劑盒(he)說明書中標(biao)明(ming)的(de)時間、加液的(de)量(liang)及(ji)順(shun)序進(jin)行溫(wen)育操(cao)作(zuo)。
④底(di)物A應(ying)揮發,避(bi)免(mian)長時間打開蓋子。底(di)物B對光(guang)敏感,避(bi)免(mian)長時間暴露(lu)於光(guang)下(xia)。避(bi)免(mian)用(yong)手接觸,有毒。實(shi)驗(yan)完(wan)成後(hou)應立即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。
⑤洗滌(di)酶(mei)標板(ban)時應(ying)充(chong)分拍幹,不要(yao)將吸(xi)水紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入酶(mei)標(biao)反應孔(kong)中吸(xi)水。
⑥使(shi)用(yong)壹次(ci)性的(de)吸(xi)頭以(yi)免(mian)交叉汙染(ran),吸(xi)取終(zhong)止液和底(di)物A、B液時,避(bi)免(mian)使用(yong)帶(dai)金(jin)屬部分的(de)加樣器 。
⑦實驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條應立即(ji)放(fang)回包(bao)裝袋中,密(mi)封(feng)保(bao)存(cun),以(yi)免(mian)變(bian)質。
⑧試(shi)劑(ji)應(ying)按標簽(qian)說明書儲(chu)存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢(hui)復到(dao)室溫(wen)。稀稀過(guo)後(hou)的(de)標(biao)準品應丟(diu)棄,不(bu)可(ke)保(bao)存(cun)。
⑨不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試(shi)劑應包裝好(hao)或蓋好(hao)。不同(tong)批號的(de)試(shi)劑不要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。
反應五(wu)要(yao)素(su):
異(yi)尖(jian)線(xian)蟲(chong)屬(shu)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)參(can)加PCR反應的(de)物(wu)質主要(yao)有(you)五種(zhong)即(ji)引物(wu)、酶(mei)、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2+
引物:引物(wu)是(shi)PCR特(te)異(yi)性反應的(de)關(guan)鍵,PCR 產物的(de)特(te)異(yi)性取決(jue)於引(yin)物(wu)與模板(ban)DNA互(hu)補的(de)程(cheng)度。理論上(shang),只(zhi)要(yao)知道任(ren)何(he)壹段(duan)模板(ban)DNA序(xu)列, 就能(neng)按(an)其設(she)計互(hu)補的(de)寡(gua)核苷酸(suan)鏈做引(yin)物(wu),利(li)用(yong)PCR就可(ke)將模板(ban)DNA在(zai)體(ti)外(wai)大量(liang)擴增(zeng)。設(she)計引(yin)物(wu)應(ying)遵循以(yi)下(xia)原則(ze):
①引(yin)物長(chang)度: 5-30bp,常(chang)用(yong)為(wei)20bp左(zuo)右(you)。
②引(yin)物(wu)擴增(zeng)跨度: 以(yi)200-500bp為(wei)宜(yi),特定條件(jian)下(xia)可擴增(zeng)長(chang)至0kb的(de)片(pian)段。
③引物堿基(ji):G+C含(han)量(liang)以(yi)40-60%為(wei)宜(yi),G+C太少擴增(zeng)效(xiao)果(guo)不佳(jia),G+C過(guo)多(duo)易出(chu)現(xian)非(fei)特異(yi)條帶。ATGC隨機分布,避(bi)免(mian)5個以(yi)上(shang)的(de)嘌(piao)呤或(huo)嘧啶(ding)核(he)苷(gan)酸(suan)的(de)成(cheng)串排列。
④避(bi)免(mian)引物內部出(chu)現(xian)二級(ji)結構,避(bi)免(mian)兩條引物間互補,特(te)別(bie)是(shi)3'端的(de)互(hu)補,否則(ze)會形成引(yin)物(wu)二聚(ju)體,產生(sheng)非(fei)特異(yi)的(de)擴增(zeng)條帶。
⑤引物(wu)3'端的(de)堿基(ji),特別(bie)是(shi)末(mo)及倒數(shu)第(di)二個堿基(ji),應嚴格(ge)要(yao)求(qiu)配對,以(yi)避(bi)免(mian)因末端(duan)堿基(ji)不配(pei)對而(er)導致PCR失敗。
⑥引物中有(you)或(huo)能(neng)加上(shang)合適(shi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點, 被擴增(zeng)的(de)靶(ba)序列有適(shi)宜(yi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點, 這對酶(mei)切(qie)分析或(huo)分子克(ke)隆(long)很(hen)有好(hao)處(chu)。
⑦引物(wu)的(de)特(te)異(yi)性:引(yin)物(wu)應與核(he)酸(suan)序列數據(ju)庫的(de)其(qi)它(ta)序(xu)列無明(ming)顯(xian)同源性。
引(yin)物(wu)量(liang):每(mei)條引物的(de)濃(nong)度0.~umol或0~00pmol,以(yi)低(di)引(yin)物(wu)量(liang)產(chan)生(sheng)所(suo)需要(yao)的(de)結(jie)果(guo)為(wei)好(hao),引物(wu)濃度偏高會引起錯配(pei)和非(fei)特異(yi)性擴增(zeng),且(qie)可增(zeng)加引物之間形成二聚(ju)體的(de)機會。
Potassium oxalate monohydrate二500毫(hao)升CP
Potassium oleate十(shi)八公(gong)斤(jin)BR,95%
Potassium L-lactate乳(ru)克(ke)BR,96%
Potassium L-glutamateL-谷(gu)鹽(yan)單水(shui)合物(wu)克(ke)BR,
Potassium L-AspartateL-天冬(dong)0克(ke)BR,
Potassium iodide灰0克(ke)CP,
Potassium iodate500克(ke)CP
Potassium hydroxide苛(ke)性(xing)00克(ke)CP,
Potassium hydrogen tartrate重酒(jiu)石(shi)00克(ke)高(gao)純(chun),97.5%
Potassium hydrogen phthalate二00克(ke)CP,97%
Potassium hydrogen oxalate二500克(ke)AR,97%
Potassium gluconate葡糖(tang)鹽(yan)克(ke)土豆來(lai)源
Potassium formate蟻250克(ke)BR,95%
Potassium fluoborate化(hua)0克(ke)AR,
Potassium fluoaluminate化(hua)鋁(lv)00克(ke)BR,97%
異(yi)尖(jian)線(xian)蟲(chong)屬(shu)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) D 英(ying)文(wen)名稱:Cucurbitacin D CAS號(hao):3877-86-9 規格:0mg
雪膽乙素(su) 英文(wen)名稱:Dihydrocucurbitacin F CAS號(hao):50298-90-3 規格:20mg
甲 英(ying)文(wen)名稱:Curcurbitacin IIa CAS號(hao):58546-34-2 規格:20mg
黃(huang)獨素(su)B 英文(wen)名稱:Diosbulbin B CAS號(hao):20086-06-0 規格:20mg
黑(hei)芥子苷 英(ying)文(wen)名稱:Sinigrin CAS號(hao):3952-98-5 規格:20mg
湖貝(bei)堿甲 英(ying)文(wen)名稱:Hupehenine CAS號(hao):98243-57-3 規格:20mg
葫蘆(lu)巴堿 英(ying)文(wen)名稱:Trigonelline CAS號(hao):535-83- 規格:20mg
鹽(yan)酸(suan)葫蘆(lu)巴堿 英(ying)文(wen)名稱:Trigonelline Hydrochloride CAS號(hao):638-4-6 規格: 20mg
琥珀酸(suan) 英文(wen)名稱:Butane diacid CAS號(hao):0-5-6 規格:200mg
環氧續(xu)隨(sui)子醇 英文(wen)名稱: Epoxylathyrol CAS號(hao):28649-60-7 規格:20mg
企(qi)業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海(hai)谷(gu)研(yan)實業有(you)限(xian)公司(si)
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