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馬(ma)節桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)使(shi)用方(fang)法(fa):
壹、樣品 RNA 的(de)制備
、用自(zi)選方(fang)法(fa)抽提(ti)病毒樣品 RNA。註(zhu)意:可以選用(yong)本公司的(de)壹管式病毒 RNAout
2、或(huo)柱(zhu)式病毒 RNAout。
二(er):RT(逆轉錄(lu))反應(ying)合(he)成 cDNA
. 按(an)下表(biao)配(pei)制 RT 反應(ying)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性(xing)模板後立(li)即冰(bing)浴。
3. 嚴格按(an)順(shun)序加入(ru) 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄(lu)酶(含 RI),
反應終(zhong)體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(ying)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終(zhong)止反(fan)應,然後放置在(zai)冰上(shang)待用(yong)。合成的(de) cDNA 可(ke)以直(zhi)接作為 PCR 模板使(shi)用,丌(ji)需(xu)要純化(hua)。
產(chan)品名稱:馬(ma)節桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)
英(ying)文名稱:Arthrobacter equiPCR
規格:詳(xiang)見(jian)說明(ming)書(shu)
類別(bie):PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)
運(yun)輸:低溫、避(bi)光、快遞(di)免費(fei)送(song)貨上(shang)門。
用途:生化(hua)實(shi)驗(yan),合成實(shi)驗(yan)等(deng)試(shi)驗(yan)。
運(yun)輸及(ji)保存(cun):低溫(wen)運(yun)輸,-20℃保存(cun), 保存(cun)期限為 6 個月。
自(zi)備試劑(ji):樣品 RNA。

性(xing)能(neng)指標:點(dian)擊了(le)解(jie)更多(duo)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)。
.馬(ma)節桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)試(shi)劑盒(he)檢(jian)測(ce)特(te)異(yi)性為00%
2. 檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)重(zhong)現(xian)性(xing)為00%
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期為6個月
註(zhu)意事項(xiang):
①加入(ru)試(shi)劑的順(shun)序應*,以保證所有(you)反(fan)應板孔(kong)溫育(yu)的時(shi)間壹樣。
②使(shi)用幹(gan)凈(jing)的塑(su)料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置洗滌(di)液(ye)。
③按(an)照雞(ji)血(xue)紅蛋白(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)中標明的時(shi)間、加液(ye)的(de)量及(ji)順(shun)序進行(xing)溫(wen)育(yu)操作。
④底物(wu)A應揮(hui)發(fa),避(bi)免長(chang)時(shi)間打(da)開蓋子(zi)。底物(wu)B對(dui)光敏(min)感,避(bi)免長(chang)時(shi)間暴(bao)露(lu)於光下。避(bi)免用(yong)手(shou)接觸(chu),有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完成後應(ying)立(li)即讀(du)取(qu)OD值(zhi)。
⑤洗滌(di)酶標板時(shi)應充(chong)分拍幹(gan),不要將吸水(shui)紙(zhi)直(zhi)接放入酶標反應孔(kong)中吸(xi)水(shui)。
⑥使(shi)用壹次性(xing)的吸(xi)頭以免交叉汙染,吸取(qu)終(zhong)止液(ye)和(he)底(di)物(wu)A、B液(ye)時(shi),避(bi)免使(shi)用帶(dai)金(jin)屬部(bu)分的加(jia)樣器 。
⑦實(shi)驗(yan)中不用的板條(tiao)應(ying)立(li)即放回包裝袋(dai)中,密封(feng)保存(cun),以免變質(zhi)。
⑧試(shi)劑應(ying)按(an)標簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun),使(shi)用前(qian)恢(hui)復(fu)到(dao)室溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過(guo)後的(de)標準(zhun)品應(ying)丟(diu)棄(qi),不可保存(cun)。
⑨不用的其它試(shi)劑(ji)應包裝好或(huo)蓋好(hao)。不同(tong)批(pi)號(hao)的試(shi)劑不要混(hun)用。保質(zhi)前(qian)使(shi)用。
反(fan)應(ying)五要素:
馬(ma)節桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)參加PCR反(fan)應的(de)物(wu)質(zhi)主(zhu)要有(you)五種即引(yin)物(wu)、酶、dNTP、模板和(he)Mg2+
引(yin)物(wu):引(yin)物(wu)是PCR特(te)異(yi)性反(fan)應的(de)關鍵(jian),PCR 產(chan)物(wu)的特(te)異(yi)性取(qu)決於引(yin)物(wu)與模板DNA互(hu)補(bu)的(de)程(cheng)度。理(li)論(lun)上,只(zhi)要知(zhi)道任(ren)何(he)壹段(duan)模板DNA序列, 就(jiu)能(neng)按(an)其設(she)計(ji)互補(bu)的(de)寡核苷酸鏈做(zuo)引(yin)物(wu),利用(yong)PCR就(jiu)可將模板DNA在(zai)體外大量擴(kuo)增。設(she)計(ji)引(yin)物(wu)應遵(zun)循以下原則(ze):
①引(yin)物(wu)長度(du): 5-30bp,常(chang)用為20bp左右(you)。
②引(yin)物(wu)擴(kuo)增跨度: 以200-500bp為宜,特(te)定(ding)條(tiao)件下可(ke)擴(kuo)增長(chang)至0kb的(de)片段。
③引(yin)物(wu)堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少(shao)擴(kuo)增效(xiao)果不佳,G+C過多(duo)易(yi)出(chu)現(xian)非特(te)異(yi)條(tiao)帶(dai)。ATGC隨機分布,避(bi)免5個(ge)以上的(de)嘌呤或(huo)嘧(mi)啶核(he)苷酸的成串(chuan)排(pai)列。
④避(bi)免引(yin)物(wu)內部(bu)出(chu)現(xian)二(er)級(ji)結(jie)構,避(bi)免兩(liang)條(tiao)引(yin)物(wu)間互補(bu),特(te)別(bie)是3'端的互(hu)補(bu),否則(ze)會形成引(yin)物(wu)二聚(ju)體,產生非特(te)異(yi)的擴(kuo)增條(tiao)帶(dai)。
⑤引(yin)物(wu)3'端的堿(jian)基,特(te)別(bie)是末(mo)及(ji)倒(dao)數第二(er)個堿(jian)基,應嚴格要求(qiu)配(pei)對(dui),以避(bi)免因末(mo)端堿基不配(pei)對(dui)而(er)導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引(yin)物(wu)中有(you)或(huo)能(neng)加上合適(shi)的酶(mei)切位點(dian), 被擴(kuo)增的(de)靶(ba)序列有(you)適(shi)宜(yi)的(de)酶(mei)切位點(dian), 這對(dui)酶(mei)切分析或(huo)分子克隆(long)很(hen)有(you)好(hao)處。
⑦引(yin)物(wu)的特(te)異(yi)性:引(yin)物(wu)應與(yu)核(he)酸序列數(shu)據(ju)庫的其它序列無(wu)明(ming)顯同(tong)源性(xing)。
引(yin)物(wu)量:每(mei)條(tiao)引(yin)物(wu)的濃(nong)度(du)0.~umol或(huo)0~00pmol,以低引(yin)物(wu)量產生所需(xu)要的結(jie)果為好,引(yin)物(wu)濃度(du)偏(pian)高(gao)會引(yin)起(qi)錯(cuo)配(pei)和(he)非特(te)異(yi)性擴(kuo)增,且(qie)可(ke)增(zeng)加(jia)引(yin)物(wu)之(zhi)間形成二(er)聚(ju)體的機會。
?PHA-P植(zhi)物(wu)血(xue)球(qiu)凝集(ji)素PHA-P25克BR,0u/mg,甘(gan)薯,液(ye)體
PHA植(zhi)物(wu)血(xue)凝素公斤BR,0.5-3u/mg,馬(ma)鈴薯(shu),粉(fen)末(mo)
PHⅢ三號(hao)凝聚(ju)劑500毫克AR,90%
PGN肽聚糖(tang)25毫(hao)克BR
PGA葉克色固(gu)
Permutit交替(ti)砂(sha)00克CP,4.5%
Periodic acid仲(zhong)高(gao)25TAR,33%
Peptidase肽鏈端解酶(mei)25克BR,92%,三水物(wu)
Pepstatin A抑肽素25克BR,Ⅳ型(xing),≥25CDU/mg
Pepsin(porcine stomach mucose)胃(wei)液(ye)素00克生物(wu)技術級(ji),300u/mg
PEP-K磷(lin)稀醇(chun)單(dan)鹽(yan)25克AR,99%
PEPC磷(lin)醇(chun)式(shi)羧(suo)化酶克生物(wu)技術級(ji),
PEP-3CHA磷(lin)醇(chun)三環己鹽00克AR,99.9%
PEP磷(lin)醇(chun)單(dan)環己鹽5克AR,99%
Pentetrazol,5-五基四(si)唑(zuo)25克AR,80%
馬(ma)節桿(gan)菌(jun)PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)定(ding)堿 英(ying)文名稱:Wtlfordine CAS號(hao):37239-5-3 規格:
次堿(jian) 英(ying)文名稱:Wilforine CAS號(hao):088-09-8 規格:0mg
吉(ji)堿 英(ying)文名稱:Wilforgine CAS號(hao):37239-47-7 規格:5mg
內(nei)酯(zhi)甲(jia) 英(ying)文名稱:Wilforlide A CAS號(hao):8404-7-2 規格:20mg
去(qu)甲(jia)澤(ze)拉(la)木醛(quan) 英(ying)文名稱:Demethylzeylasteral CAS號(hao): 0736-88- 規格:20mg
龍(long)膽(dan)苦苷 英(ying)文名稱:Gentiopicroside CAS號(hao):2083-76-9 規格:20mg
龍(long)膽(dan)山酮酚 英(ying)文名稱:Bellidifolin CAS號(hao):2798-25-6 規格:0mg
羅漢(han)果(guo)苷ⅴ 英(ying)文名稱:Mogroside V CAS號(hao):8890-36-4 規格:20mg
連翹(qiao)苷 英(ying)文名稱:Forsythin CAS號(hao):487-4-2 規格:20mg
連翹(qiao)酯(zhi)苷A 英(ying)文名稱:Forsythoside A CAS號(hao):7996-77- 規格:20mg
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