【概(gai)要描述(shu)】大鼠嗅(xiu)球(qiu)神經元細(xi)胞公司(si)正在出售的(de)產(chan)品：DogL1狗(gou)肺(fei)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞小(xiao)鼠胃(wei)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞小(xiao)鼠胃(wei)成纖(xian)維細(xi)胞小(xiao)鼠小(xiao)腸(chang)黏膜上(shang)皮(pi)細(xi)胞小(xiao)鼠小(xiao)腸(chang)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞小(xiao)鼠小(xiao)腸(chang)隱(yin)窩上(shang)皮(pi)細(xi)胞小(xiao)鼠小(xiao)腸(chang)成(cheng)纖維細(xi)胞小(xiao)鼠結(jie)腸(chang)粘膜上(shang)皮(pi)細(xi)胞小(xiao)鼠結(jie)腸(chang)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞小(xiao)鼠結(jie)腸(chang)成(cheng)纖維細(xi)胞

大鼠嗅(xiu)球(qiu)神經元分(fen)離(li)自嗅(xiu)球(qiu)組織(zhi)；嗅(xiu)球(qiu)是(shi)脊椎動物前(qian)腦(nao)結(jie)構中(zhong)參與嗅(xiu)覺(jiao)的(de)部分(fen)，用於(yu)感(gan)知(zhi)氣(qi)味。嗅(xiu)球(qiu)分(fen)為二(er)個不(bu)同的(de)結(jie)構：主(zhu)嗅(xiu)球(qiu)及輔(fu)助(zhu)嗅(xiu)球(qiu)。在大腦額(e)葉來(lai)自(zi)許多(duo)嗅(xiu)細(xi)胞的(de)神經纖維纏集在壹(yi)起(qi)，形(xing)成線(xian)球(qiu)狀的部分(fen)。在這裏(li)，纖(xian)維與多(duo)個(ge)次(ci)級神經元——僧帽(mao)細(xi)胞的(de)樹(shu)突(tu)相連接(jie)，進(jin)而由(you)這裏(li)伸(shen)出神經纖維形(xing)成嗅(xiu)囊(nang)，終(zhong)止於(yu)額(e)葉下(xia)方(fang)。壹(yi)般(ban)認(ren)為(wei)它(ta)在嗅(xiu)味(wei)的(de)辨別中(zhong)具(ju)有重(zhong)要的功(gong)能。對於大部份(fen)的(de)脊椎動物而言(yan)，嗅(xiu)球(qiu)位(wei)在大腦的(de)最(zui)前(qian)面(mian)，不(bu)過人(ren)的嗅(xiu)球(qiu)位(wei)於(yu)大腦的(de)內部。嗅(xiu)球(qiu)由(you)篩骨的篩(shai)板固(gu)定(ding)且保護嗅(xiu)球(qiu)，哺乳(ru)動物的篩(shai)板(ban)會(hui)分(fen)隔嗅(xiu)球(qiu)和嗅(xiu)上(shang)皮(pi)，而嗅(xiu)神經會(hui)穿(chuan)過(guo)篩板中的(de)篩孔而連接(jie)到(dao)嗅(xiu)球(qiu)。嗅(xiu)球(qiu)分(fen)為二(er)個不(bu)同的(de)結(jie)構：主(zhu)嗅(xiu)球(qiu)及輔(fu)助(zhu)嗅(xiu)球(qiu)。
方(fang)法(fa)簡(jian)介：

公司(si)實驗室(shi)分(fen)離(li)的大鼠嗅(xiu)球(qiu)神經元采用yi蛋白酶(mei)消(xiao)化法(fa)、神經元專用培(pei)養基(ji)培養篩選(xuan)結(jie)合化學試(shi)劑抑(yi)制法(fa)制備而來(lai)，細(xi)胞總(zong)量約(yue)為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量檢(jian)測(ce)：

公司(si)實驗室(shi)分(fen)離(li)的大鼠嗅(xiu)球(qiu)神經元經β-Tubulin免(mian)疫熒光鑒(jian)定，純(chun)度(du)可(ke)達90%以上(shang)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原(yuan)體、細(xi)菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)真(zhen)菌(jun)等(deng)。

本公司(si)所有產(chan)品僅供科(ke)學實驗，不(bu)做其(qi)他(ta)科(ke)學實驗外(wai)的使用(yong)！

包被(bei)條件(jian) PLL（0.1mg/ml）

培養(yang)基(ji) 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等(deng)

換液(ye)頻(pin)率(lv) 每(mei)2-3天(tian)換液(ye)壹(yi)次(ci)

生長(chang)特性 貼(tie)壁

細(xi)胞形(xing)態(tai) 神經元細(xi)胞樣(yang)

傳(chuan)代特性 屬於(yu)終(zhong)末分(fen)化細(xi)胞；屬(shu)於不增(zeng)殖(zhi)細(xi)胞群(qun)

消(xiao)化液 0.25%yi蛋白酶(mei)

培養(yang)條(tiao)件(jian) 氣(qi)相：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準備工(gong)作

1. 實驗器材(cai)準(zhun)備：準(zhun)備無菌(jun)的培(pei)養皿(min)、培(pei)養瓶、移(yi)液(ye)管、離(li)心管、手(shou)術(shu)器械等(deng)，並(bing)進(jin)行高壓(ya)滅(mie)菌(jun)或(huo)其(qi)他(ta)合適(shi)的消(xiao)毒(du)處理(li)。

2. 試劑準(zhun)備：配(pei)制或(huo)購買(mai)合適(shi)的培(pei)養(yang)基(ji)、消(xiao)化酶（如(ru)、膠(jiao)原(yuan)酶等(deng)）、胎牛(niu)血(xue)清、雙抗(kang)等(deng)試(shi)劑，確(que)保其(qi)無菌(jun)且在有效(xiao)期內。

3. 實驗動物或(huo)組織(zhi)來(lai)源(yuan)準備：根(gen)據(ju)實驗需求，選(xuan)擇(ze)合適(shi)的動物並(bing)進(jin)行相應的(de)麻(ma)醉或(huo)處死(si)，獲(huo)取所(suo)需組織(zhi)；或(huo)從已(yi)有的(de)組織(zhi)樣(yang)本庫(ku)中(zhong)獲(huo)取組織(zhi)。

取材(cai)與處理(li)

1. 取材(cai)：在無菌(jun)條件(jian)下(xia)，迅(xun)速取(qu)出目標組織(zhi)，盡(jin)量減少對組織(zhi)的損(sun)傷(shang)，並(bing)去除(chu)多(duo)余(yu)的脂(zhi)肪、結(jie)締組織(zhi)等(deng)非(fei)目的組織(zhi)。

2. 清洗：將取出的組織(zhi)用預冷的無菌(jun)PBS沖洗數(shu)次(ci)，以(yi)去除(chu)血(xue)液和雜質。

3. 剪切(qie)：將組織(zhi)剪成(cheng)約(yue)1 - 2mm³的(de)小(xiao)塊，以(yi)便後續(xu)消(xiao)化。

細(xi)胞分(fen)離(li)

1. 消(xiao)化：將剪碎(sui)的組織(zhi)塊放入含有適(shi)量消(xiao)化酶的(de)離(li)心管中(zhong)，在37℃恒溫搖(yao)床或(huo)培養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化壹(yi)段(duan)時間(jian)。期(qi)間(jian)可(ke)輕輕搖晃(huang)離(li)心管，使消(xiao)化更均勻(yun)。

2. 終(zhong)止消(xiao)化：當組織(zhi)塊大部分(fen)被(bei)消(xiao)化成單(dan)細(xi)胞懸(xuan)液或(huo)小(xiao)細(xi)胞團時，加(jia)入含血(xue)清的培(pei)養基終(zhong)止消(xiao)化。

3. 過濾(lv)與離(li)心：用(yong)細(xi)胞篩(shai)過濾(lv)細(xi)胞懸(xuan)液，去除(chu)未消(xiao)化的組織(zhi)碎(sui)片，然後將濾(lv)液以(yi)適(shi)當的(de)轉速離(li)心，收(shou)集細(xi)胞沈(chen)澱。

細(xi)胞觀察與檢(jian)測(ce)

1. 日常(chang)觀察：每(mei)天(tian)用倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡觀察細(xi)胞的(de)形(xing)態(tai)、生長(chang)狀態(tai)、密(mi)度等(deng)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞的(de)變化情況(kuang)，如(ru)發(fa)現(xian)細(xi)胞汙(wu)染(ran)或(huo)異(yi)常，及時采取相應措施(shi)。
2. 細(xi)胞計(ji)數(shu)與活力檢(jian)測(ce)：在需要時，可(ke)采用(yong)臺盼(pan)藍(lan)染(ran)色(se)等(deng)方(fang)法(fa)對細(xi)胞進(jin)行計(ji)數(shu)和(he)活力檢(jian)測(ce)，以了(le)解(jie)細(xi)胞的(de)生長情況(kuang)和(he)健(jian)康(kang)狀(zhuang)態(tai)。

壹(yi)、取(qu)材(cai)與分(fen)離(li)

1. 快速操作

- 組織(zhi)取材(cai)後需立即(ji)處理(li)，避免(mian)長(chang)時間(jian)暴(bao)露於室(shi)溫或(huo)非(fei)營養(yang)環境。

- 使用(yong)無菌(jun) PBS 或(huo)生理(li)鹽水(shui)沖洗組織(zhi)，去除(chu)血(xue)液、雜質。

2. 消(xiao)化酶選(xuan)擇(ze)

- 根據(ju)組織(zhi)類(lei)型選(xuan)擇(ze)消(xiao)化酶，避(bi)免(mian)過(guo)度消(xiao)化導致(zhi)細(xi)胞損(sun)傷(shang)。

- 消(xiao)化時間(jian)需嚴(yan)格控制（通(tong)常(chang) 10-30 分(fen)鐘(zhong)），可(ke)通(tong)過(guo)顯(xian)微(wei)鏡觀察細(xi)胞解(jie)離(li)狀態(tai)。

二、培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)優化

1. 培養(yang)基(ji)選(xuan)擇(ze)

- 使用(yong)含血(xue)清或(huo)特定生(sheng)長(chang)因子的培(pei)養基(ji)（如(ru) DMEM、RPMI 1640 等(deng)），部分(fen)細(xi)胞需添加(jia)胰(yi)島素(su)、EGF 等(deng)。

- 避免(mian)頻(pin)繁(fan)更換培(pei)養基(ji)品(pin)牌或(huo)批次(ci)，減少細(xi)胞適(shi)應壓(ya)力(li)。

2. 貼(tie)壁與傳(chuan)代

- 原代細(xi)胞貼(tie)壁能(neng)力較(jiao)弱(ruo)，可(ke)能需要包被(bei)培養皿（如(ru)膠(jiao)原(yuan)蛋白、多(duo)聚賴氨酸）。

- 傳(chuan)代時密(mi)度建(jian)議控制在 70%-80%，過度(du)匯合會(hui)導致(zhi)接觸(chu)抑制和分(fen)化。

三、汙(wu)染(ran)控(kong)制

1. 無菌(jun)操作

- 全程在超凈臺操作，使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)耗材(cai)，避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。

- 培養(yang)基(ji)中(zhong)可(ke)添加(jia)雙抗(kang)，但長(chang)期(qi)使用(yong)可(ke)能影(ying)響細(xi)胞活性。

2. 支原(yuan)體檢測(ce)

- 定期(qi)檢(jian)測(ce)支原(yuan)體汙(wu)染(ran)（如(ru) PCR 法(fa)），汙(wu)染(ran)後需及時丟(diu)棄細(xi)胞。

四、狀(zhuang)態(tai)監控(kong)

1. 日常(chang)觀察

- 每(mei)天(tian)檢查(zha)細(xi)胞形(xing)態(tai)、密(mi)度及培(pei)養(yang)基顏(yan)色，及時更換培(pei)養基(ji)（通(tong)常(chang)每(mei) 2-3 天(tian)換液(ye)壹(yi)次(ci)）。

- 異(yi)常形(xing)態(tai)（如細(xi)胞變(bian)圓、碎(sui)片增(zeng)多(duo)）可(ke)能提(ti)示汙(wu)染(ran)或(huo)營養(yang)不足(zu)。

2. 傳(chuan)代與凍(dong)存

- 原代細(xi)胞分(fen)裂次(ci)數(shu)有限(xian)（壹(yi)般(ban) 5-10 代），需及時凍存早期(qi)代次(ci)細(xi)胞。

- 凍存液建(jian)議使用(yong) DMSO+血(xue)清（或(huo)專用凍(dong)存培養(yang)基(ji)），梯度降溫後液(ye)氮保(bao)存。