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綿(mian)羊腺病毒PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)品(pin)牌(pai)使用方(fang)法:
壹(yi)、樣(yang)品(pin) RNA 的(de)制備
、用自(zi)選方(fang)法抽提(ti)病毒樣品(pin) RNA。註(zhu)意:可以選用本(ben)公司的(de)壹(yi)管式(shi)病(bing)毒 RNAout
2、或柱(zhu)式(shi)病(bing)毒 RNAout。
二:RT(逆(ni)轉(zhuan)錄(lu))反(fan)應(ying)合(he)成 cDNA
. 按(an)下(xia)表(biao)配(pei)制 RT 反(fan)應(ying)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保(bao)溫(wen) 5 分(fen)鐘(zhong)變性(xing)模板(ban)後立(li)即(ji)冰(bing)浴。
3. 嚴格(ge)按順(shun)序(xu)加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄(lu)酶(mei)(含 RI),
反(fan)應(ying)終體積(ji)為 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分(fen)鐘(zhong)。此(ci)步(bu)為 RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫(wen) 0 分(fen)鐘(zhong)以(yi)終止(zhi)反(fan)應(ying),然後放置(zhi)在冰(bing)上待(dai)用。合(he)成的(de) cDNA 可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)作(zuo)為 PCR 模板(ban)使用,丌(ji)需要(yao)純化(hua)。
產(chan)品名(ming)稱(cheng):綿(mian)羊腺病毒PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)品(pin)牌(pai)
英文名稱(cheng):Ovine AdenovirusPCR
規格(ge):詳見說明(ming)書
類(lei)別:PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)
運(yun)輸:低(di)溫、避光(guang)、快遞(di)免(mian)費(fei)送貨上(shang)門(men)。
用途:生(sheng)化(hua)實(shi)驗(yan),合(he)成實(shi)驗(yan)等試(shi)驗(yan)。
運輸及保(bao)存(cun):低(di)溫運輸,-20℃保(bao)存(cun), 保(bao)存(cun)期(qi)限為 6 個(ge)月。
自(zi)備(bei)試(shi)劑:樣(yang)品(pin) RNA。

性(xing)能指(zhi)標(biao):點(dian)擊了(le)解更(geng)多(duo)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)。
.綿(mian)羊腺病毒PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)品(pin)牌(pai)試(shi)劑盒(he)檢(jian)測(ce)特異性(xing)為00%
2. 檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)重(zhong)現性(xing)為00%
3. 靈敏(min)度可(ke)達到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為6個(ge)月
註(zhu)意事(shi)項(xiang):
①加入試(shi)劑的(de)順(shun)序(xu)應*,以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有反(fan)應(ying)板(ban)孔溫育(yu)的(de)時間壹(yi)樣。
②使(shi)用幹(gan)凈的(de)塑料(liao)容器配置洗滌(di)液。
③按(an)照雞(ji)血(xue)紅蛋白(bai)(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書中標(biao)明(ming)的(de)時間、加液的(de)量(liang)及順(shun)序(xu)進行(xing)溫(wen)育(yu)操作(zuo)。
④底物A應揮(hui)發,避(bi)免長(chang)時間打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物B對(dui)光(guang)敏感(gan),避免(mian)長(chang)時間暴露(lu)於(yu)光(guang)下(xia)。避(bi)免(mian)用(yong)手接(jie)觸,有毒。實(shi)驗(yan)完成後應立(li)即(ji)讀取(qu)OD值。
⑤洗滌(di)酶標(biao)板(ban)時應充分(fen)拍幹(gan),不(bu)要將(jiang)吸水紙(zhi)直接(jie)放入酶(mei)標(biao)反(fan)應(ying)孔中吸水。
⑥使(shi)用壹(yi)次性(xing)的(de)吸頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染,吸取(qu)終(zhong)止(zhi)液和底物A、B液時,避免使用(yong)帶(dai)金(jin)屬(shu)部分(fen)的(de)加樣(yang)器 。
⑦實(shi)驗(yan)中不(bu)用的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即(ji)放回(hui)包裝(zhuang)袋(dai)中,密(mi)封保(bao)存(cun),以(yi)免變質(zhi)。
⑧試(shi)劑應(ying)按(an)標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲存(cun),使(shi)用前(qian)恢(hui)復到(dao)室溫。稀(xi)稀(xi)過後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)丟(diu)棄,不(bu)可保(bao)存(cun)。
⑨不(bu)用的(de)其(qi)它(ta)試(shi)劑應(ying)包(bao)裝好或蓋(gai)好。不(bu)同批號(hao)的(de)試(shi)劑不(bu)要混用。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用。
反(fan)應(ying)五要素(su):
綿(mian)羊腺病毒PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)品(pin)牌(pai)參加PCR反(fan)應(ying)的(de)物質(zhi)主要有五種即(ji)引物、酶、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引物:引物是PCR特異性(xing)反(fan)應(ying)的(de)關(guan)鍵,PCR 產(chan)物的(de)特異性(xing)取(qu)決(jue)於(yu)引物與模板(ban)DNA互(hu)補(bu)的(de)程度(du)。理(li)論上,只(zhi)要知(zhi)道任(ren)何(he)壹(yi)段(duan)模板(ban)DNA序(xu)列, 就(jiu)能(neng)按(an)其(qi)設計(ji)互(hu)補(bu)的(de)寡(gua)核苷(gan)酸(suan)鏈做(zuo)引物,利用(yong)PCR就(jiu)可將(jiang)模板(ban)DNA在體外(wai)大(da)量(liang)擴增(zeng)。設(she)計(ji)引物應遵(zun)循(xun)以下(xia)原(yuan)則:
①引物長(chang)度(du): 5-30bp,常用為20bp左右(you)。
②引物擴增(zeng)跨(kua)度: 以200-500bp為宜,特定條(tiao)件(jian)下(xia)可(ke)擴(kuo)增(zeng)長(chang)至(zhi)0kb的(de)片段。
③引物堿基(ji):G+C含量(liang)以40-60%為宜,G+C太(tai)少擴(kuo)增(zeng)效(xiao)果不(bu)佳,G+C過多(duo)易出(chu)現非特異條(tiao)帶(dai)。ATGC隨機分(fen)布,避(bi)免(mian)5個(ge)以(yi)上的(de)嘌(piao)呤或嘧(mi)啶(ding)核苷(gan)酸(suan)的(de)成(cheng)串排列。
④避(bi)免(mian)引物內部出(chu)現二級結(jie)構(gou),避(bi)免(mian)兩條(tiao)引物間互(hu)補(bu),特別是3'端(duan)的(de)互(hu)補(bu),否則會(hui)形成(cheng)引物二聚(ju)體,產(chan)生非(fei)特異的(de)擴(kuo)增(zeng)條(tiao)帶(dai)。
⑤引物3'端的(de)堿(jian)基(ji),特別是末(mo)及倒(dao)數(shu)第(di)二(er)個(ge)堿(jian)基,應嚴(yan)格(ge)要求(qiu)配對(dui),以避(bi)免因末(mo)端堿(jian)基(ji)不(bu)配對(dui)而導致PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物中有或能(neng)加上(shang)合(he)適(shi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點(dian), 被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)序(xu)列有適(shi)宜的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點(dian), 這(zhe)對(dui)酶切(qie)分(fen)析或分(fen)子克(ke)隆很(hen)有好處。
⑦引物的(de)特異性(xing):引物應與(yu)核酸序(xu)列數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)其(qi)它(ta)序(xu)列無(wu)明(ming)顯(xian)同(tong)源性(xing)。
引物量(liang):每條(tiao)引物的(de)濃(nong)度(du)0.~umol或0~00pmol,以(yi)低(di)引物量(liang)產(chan)生所(suo)需要(yao)的(de)結(jie)果為好,引物濃度(du)偏(pian)高會(hui)引起(qi)錯配和非特異性(xing)擴增(zeng),且(qie)可增(zeng)加引物之間形成(cheng)二(er)聚(ju)體的(de)機會(hui)。
比色(se)管英文(wen)名(ming)(EN):Morin hydrate,98%CAS No.:654055-0-3規格(ge)(SP):G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
比色(se)管英文(wen)名(ming)(EN):Doxorubicin hydrochloride,98.0-02.0%CAS No.:2536-40-9規格(ge)(SP):25MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
奧(ao)林(lin)巴斯(si)樣(yang)品管架英(ying)文(wen)名(ming)(EN):Coumarin 6,98%CAS No.:3825-36-0規格(ge)(SP):500MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
奧(ao)林(lin)巴斯(si)樣(yang)品管英文(wen)名(ming)(EN):o-Vanillin,99%CAS No.:48-53-8規格(ge)(SP):25G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
奧(ao)林(lin)巴斯(si)樣(yang)品杯英文(wen)名(ming)(EN):2-Iminobiotin,≥98%CAS No.:3395-35-2規格(ge)(SP):25MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PVDF膜(mo)轉(zhuan)印膜(mo)疏(shu)水膜(mo),膜(mo)孔(kong)徑0.45um英文(wen)名(EN):Methylcobalamin,99%CAS No.:3422-55-4規格(ge)(SP):00MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PVDF膜(mo)轉(zhuan)印膜(mo)疏(shu)水膜(mo),膜(mo)孔(kong)徑0.45um英文(wen)名(EN):2',7'-Dichlorofluorescein,90%CAS No.:76-54-0規格(ge)(SP):G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PVDF膜(mo)轉(zhuan)印膜(mo)疏(shu)水膜(mo),膜(mo)孔(kong)徑0.22um英文(wen)名(EN):Biochanin A,98%CAS No.:49-80-5規格(ge)(SP):50MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PVDF膜(mo)轉(zhuan)印膜(mo)疏(shu)水膜(mo),膜(mo)孔(kong)徑0.22um英文(wen)名(EN):Hydroxypropyl cellulose,Mw ~00,000CAS No.:9004-64-2規格(ge)(SP):25G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PH精密(mi)試(shi)紙(zhi)英文(wen)名(EN):Ergocalciferol,≥98.0%CAS No.:50-4-6規格(ge)(SP):G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PH廣泛試(shi)紙(zhi)英文(wen)名(EN):(+)-γ-Tocopherol,≥96%CAS No.:54-28-4規格(ge)(SP):0MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PCR管盒英(ying)文(wen)名(EN):GalanginCAS No.:548-83-4規格(ge)(SP):25MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PCR管盒英(ying)文(wen)名(EN):Cellulose acetateCAS No.:9004-35-7規格(ge)(SP):250G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
PCR管英文(wen)名(ming)(EN):L-Thyroxine,≥98%CAS No.:5-48-9規格(ge)(SP):500MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
N+尼龍膜(mo)30cm*3m 0.45u英(ying)文名(EN):Chlorophyll B (HPLC,95%)CAS No.:59-62-0規格(ge)(SP):MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
N+尼龍膜(mo)5cm*5cm 0.45u英(ying)文名(EN):Cantharidin,98%CAS No.:56-25-7規格(ge)(SP):25MG類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
IL樣(yang)品(pin)杯英(ying)文名(EN):(R)-(?)-e hydrochloride,99%CAS No.:6-76-7規格(ge)(SP):5G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
96孔(kong)細(xi)胞培(pei)養(yang)板(ban)U底英文名(EN):Retinyl acetate,USP/EPCAS No.:27-47-9規格(ge)(SP):G類(lei)別(Key):通用(yong)試(shi)劑
綿(mian)羊腺病毒PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)品(pin)牌(pai)食物環氨酸(cyclamate)含量(liang)薄(bo)層(ceng)色譜(pu)法(fa)定性(xing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
藥品(pin)環氨酸(cyclamate)含量(liang)薄(bo)層(ceng)色譜(pu)法(fa)定性(xing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
化妝品環氨酸(cyclamate)含量(liang)薄(bo)層(ceng)色譜(pu)法(fa)定性(xing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
咖啡(fei)環氨酸(cyclamate)含量(liang)薄(bo)層(ceng)色譜(pu)法(fa)定性(xing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
飲料(liao)甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
糖果甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
食物甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
藥品(pin)甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
化妝品甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
咖啡(fei)甘(gan)素(su)(dulcin)含量(liang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he) 進(jin)口/國(guo)產(chan) 規格(ge):20次
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