【概(gai)要描述】 抗(kang)體,抗(kang)體種(zhong)類,多種試(shi)劑現貨供(gong)應!

抗(kang)體*,抗(kang)體用(yong)於免(mian)疫(yi)組(zu)化(hua)實驗，WB實驗，相(xiang)應(ying)的(de)標記(ji)抗(kang)體有HRP標記(ji)抗(kang)體，FITC標記(ji)，BIO等。

【貯存(cun)條(tiao)件】： 貯存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品應在低溫(wen)下(xia)保存(cun)，長時(shi)間在暴露在空(kong)氣(qi)中(zhong)，含量會有所(suo)降(jiang)低。

規(gui)格(ge)：0mg/50mg

材料(liao)和(he)方法

　　. 材料(liao) 人成(cheng)骨肉(rou)瘤MG63細(xi)胞為本實驗室(shi)保(bao)存(cun)。重組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教授惠(hui)贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖(tang)DMEM培養基(美國Gibco 公司(si))，胎牛血清(Hyclone公司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁晨科(ke)技(ji)有限公司(si))。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡實驗 MG63細(xi)胞鋪於(yu)35 mmol/L培養皿(min)中(zhong)，待(dai)細(xi)胞密度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換無血清培養基培養3 h，分別(bie)加(jia)入(ru)濃度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂解細(xi)胞，離心取上(shang)清加(jia)入(ru)凝膠(jiao)加(jia)樣(yang)緩沖(chong)液(ye),沸(fei)水浴上(shang)加(jia)熱5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體(ti)外激(ji)酶(mei)測定 MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染至MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采用(yong)免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重組(zu)活(huo)性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同時(shi)加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶(mei)反應緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜，應用(yong)放(fang)射(she)自顯影技(ji)術檢測32P 標記(ji)的(de)SSHL水平。

　　.4 體(ti)外SSHL磷酸(suan)酶(mei)活(huo)性(xing)測定實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采用(yong)免(mian)疫(yi)共(gong)沈澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或(huo)同時(shi)加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應2 h。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公司(si)更(geng)多(duo)產(chan)品(pin)優惠(hui):

鼠(shu)抗(kang)人白(bai)細(xi)胞特異(yi)性(xing)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Leukocyte Specific Protein       小(xiao)鼠(shu)生長激(ji)素釋放(fang)多(duo)肽(tai)GHRP抗(kang)體    毛細(xi)血管擴張(zhang)性(xing)共(gong)濟(ji)失調(tiao)癥(zheng)突(tu)變(bian)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體
342    鼠(shu)抗(kang)人單(dan)克隆抗(kang)體    Linker for Activation of T cells        小(xiao)鼠(shu)腎損傷(shang)分(fen)子(zi)Kim-抗(kang)體     鈣(gai)離子(zi)ATP酶(mei)通(tong)道蛋白(bai)抗(kang)體
343    鼠(shu)抗(kang)人腔(qiang)上皮(pi)抗(kang)原單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Luminal Epithelial Ag        小(xiao)鼠(shu)腎素Renin抗(kang)體    活(huo)化轉(zhuan)錄因(yin)子6抗(kang)體
344    鼠(shu)抗(kang)人肺癌(ai)耐藥蛋(dan)白(bai)單克隆抗(kang)體    Lung Cancer Resistance Protein (LRP)       小(xiao)鼠(shu)腎上腺(xian)髓質(zhi)素ADM抗(kang)體     氫鉀ATP酶(mei)通(tong)道蛋白(bai)抗(kang)體
345    鼠(shu)抗(kang)單克(ke)隆抗(kang)體    Luteinizing Hormone(LH)        小(xiao)鼠(shu)腎上腺(xian)素能(neng)aA受體ADRAA抗(kang)體     ATP合(he)成酶(mei)H+轉(zhuan)運線粒體(ti)F0復(fu)合(he)體亞基F6抗(kang)體
346    兔(tu)抗(kang)人溶(rong)菌(jun)素多克(ke)隆抗(kang)體    Lysozyme       小(xiao)鼠(shu)腎上腺(xian)素EPI抗(kang)體    銅轉(zhuan)運蛋白(bai)質(zhi)α鏈(lian)抗(kang)體
347    兔(tu)抗(kang)人多(duo)克隆抗(kang)體    Lysozyme（Muramidase）        小(xiao)鼠(shu)神(shen)經營養因子(zi)4NT-4抗(kang)體    吸(xi)引(yin)素抗(kang)體
348    鼠(shu)抗(kang)人肥(fei)大(da)細(xi)胞類單(dan)克(ke)隆抗(kang)體    Mast Cell Tryptase     小(xiao)鼠(shu)神(shen)經營養因子(zi)3NT-3抗(kang)體    銅轉(zhuan)運蛋白(bai)質(zhi)β鏈(lian)抗(kang)體
349    鼠(shu)抗(kang)人基(ji)質(zhi)金屬(shu)蛋白(bai)酶(mei)單克隆抗(kang)體    Matrix Metalroteinase       小(xiao)鼠(shu)神(shen)經肽YNP-Y抗(kang)體    鈉(na)鉀ATP酶(mei)通(tong)道蛋白(bai)抗(kang)體