當(dang)前位(wei)置:首頁(ye) > 產品(pin)展(zhan)示(shi) > 蛋白/抗(kang)體 > 免疫球(qiu)蛋(dan)白抗(kang)體 > 雞(ji)血清蛋白抗(kang)體

雞(ji)血清蛋白抗(kang)體*,雞(ji)血清蛋白抗(kang)體用(yong)於(yu)免疫組(zu)化實(shi)驗,WB實(shi)驗,相應(ying)的標記抗體(ti)有(you)HRP標記抗體(ti),FITC標記,BIO等(deng)。
【貯存(cun)條件】: 貯(zhu)存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品應(ying)在低溫(wen)下保存(cun),長(chang)時(shi)間(jian)在暴露(lu)在空氣中,含量會(hui)有(you)所(suo)降(jiang)低(di)。
規(gui)格(ge):0mg/50mg
材(cai)料(liao)和方(fang)法(fa)
. 材(cai)料(liao) 人成骨肉瘤MG63細胞為(wei)本(ben)實(shi)驗室(shi)保存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由(you)王巖教(jiao)授惠(hui)贈(zeng)。脂質(zhi)體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖(tang)DMEM培養(yang)基(美(mei)國(guo)Gibco 公(gong)司),胎(tai)牛血清(Hyclone公司(si)),和EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387,KN93,CaM,重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain,Calbiochem)。抗體(ti):Myc (9E0;Roche),HA (3F0;Roche),Pcofilin,Cofilin(Santa Cruz), CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.),PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁(mai)晨科技有限公司)。
.2 蛋(dan)白印跡(ji)實(shi)驗 MG63細胞鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿中,待(dai)細胞密(mi)度(du)達到60%~70%時(shi),轉(zhuan)染(ran)MycSSHL,48 h後換(huan)無(wu)血清培養(yang)基培養(yang)3 h,分別(bie)加(jia)入(ru)濃度為(wei)0.5,,2.5,5 μmol/L的(de)A2387孵育0 min後裂解(jie)細胞,離心取上(shang)清加入(ru)凝膠加樣(yang)緩沖(chong)液,沸(fei)水(shui)浴(yu)上加(jia)熱5 min,上樣(yang)、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。
.3 體外(wai)激(ji)酶測(ce)定 MycSSHL(WT)及其(qi)突(tu)變體MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細胞,48 h後采用(yong)免疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗(kang)體,對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL,加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重組(zu)活性CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時(shi)加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反(fan)應緩沖(chong)液中,30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo),應用(yong)放射(she)自(zi)顯影技術(shu)檢測(ce)32P 標記的SSHL水(shui)平(ping)。
.4 體(ti)外SSHL磷(lin)酸酶活(huo)性測(ce)定實(shi)驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至(zhi)MG63細胞,48 h後,采用(yong)免疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗(kang)體,對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收MycSSHL,加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時(shi)加(jia)入抑(yi)制(zhi)劑(ji)KN93),20 μg/ml CaM,以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖(chong)液(50 mol/L HEPES,pH 7.4,0. mol/L CaCl2,0.5 mol/L EDTA,3 mol/L MgCl2,00 mmol/L NaCl, mol/L dithiothreitol,0.5 mg/ml BSA, μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin,Cofilin, cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色。
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鼠抗(kang)人(ren)基質(zhi)金(jin)屬(shu)蛋白酶3單(dan)克隆抗體 Matrix Metalroteinase 3 小(xiao)鼠神(shen)經(jing)絲(si)蛋白NF抗(kang)體 雕亡、半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白酶激(ji)活(huo)抑(yi)制(zhi)劑(ji)抗(kang)體
35 鼠抗(kang)人(ren)Mcl-單(dan)克隆抗體 Mcl- 小(xiao)鼠神(shen)經(jing)絲(si)蛋白NF抗(kang)體 ATP敏感(gan)性鉀(jia)通道亞(ya)基(ji)kir6.2抗(kang)體(ti)
352 鼠抗(kang)人(ren)MDMT單(dan)克隆抗體 MDMT 小(xiao)鼠神(shen)經(jing)生長因子(zi)NGF抗(kang)體(ti) 加(jia)壓(ya)素受(shou)體2抗(kang)體(ti)
353 鼠抗(kang)人(ren)多(duo)藥(yao)耐藥(yao)基(ji)因單(dan)克隆抗體 MDR- 小(xiao)鼠神(shen)經(jing)膠質(zhi)纖(xian)維酸性蛋(dan)白GFAP抗(kang)體 緩激(ji)肽(tai)B2受(shou)體(ti)抗體(ti)
354 鼠抗(kang)人(ren)黑色素A單(dan)克隆抗體 Melan-A/MART- 小(xiao)鼠少(shao)突(tu)膠質(zhi)細胞髓鞘(qiao)糖(tang)蛋(dan)白抗(kang)體OMgp-Ab抗(kang)體 軸(zhou)蛋(dan)白Axin protein 抗(kang)體
355 鼠抗(kang)人(ren)黑色素瘤單(dan)克隆抗體 Melanoma 小(xiao)鼠少(shao)突(tu)膠質(zhi)細胞髓鞘(qiao)糖(tang)蛋(dan)白抗(kang)體OMgp-Ab抗(kang)體 自(zi)分泌運動因子(zi)抗(kang)體(ti)
356 鼠抗(kang)人(ren)黑色素瘤單(dan)克隆抗體 Melanoma(gp00) 小(xiao)鼠上(shang)皮(pi)中性粒(li)細胞活化肽(tai)78ENA-78/CXCL5抗(kang)體(ti) 極光(guang)激(ji)酶B抗(kang)體(ti)
357 鼠抗(kang)人(ren)黑色素瘤(組(zu)合型)單(dan)克隆抗體 Melanoma(Pan) 小(xiao)鼠色素上(shang)皮衍(yan)生因子(zi)PEDF抗(kang)體(ti) 程(cheng)序性死(si)亡配(pei)體(ti)抗體
358 鼠抗(kang)人(ren)黑色素瘤單(dan)克隆抗體 Melanoma(Pan) 小(xiao)鼠三碘甲(jia)狀腺(xian)原氨(an)酸T3抗(kang)體(ti) 程(cheng)序性死(si)亡配(pei)體(ti)2抗體
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