【概(gai)要描述】兔(tu)抗(kang)小鼠IgG-FC免(mian)疫(yi)血清抗(kang)體,抗(kang)體(ti)種(zhong)類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑現(xian)貨(huo)供應(ying)!

兔(tu)抗(kang)小鼠IgG-FC免(mian)疫(yi)血清抗(kang)體*,兔(tu)抗(kang)小鼠IgG-FC免(mian)疫(yi)血清抗(kang)體用於(yu)免(mian)疫(yi)組化(hua)實驗(yan)，WB實驗，相應(ying)的(de)標記抗(kang)體有(you)HRP標記抗(kang)體，FITC標記，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條(tiao)件(jian)】： 貯(zhu)存於-20℃. 本(ben)品(pin)應(ying)在低(di)溫下(xia)保存，長時(shi)間(jian)在(zai)暴(bao)露在空(kong)氣中(zhong)，含(han)量(liang)會有(you)所(suo)降低(di)。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材(cai)料(liao)和(he)方法(fa)

　　. 材(cai)料(liao) 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤(liu)MG63細(xi)胞(bao)為(wei)本實驗室(shi)保存。重組(zu)質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖教(jiao)授(shou)惠(hui)贈。脂質體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖(tang)DMEM培(pei)養基(ji)(美國(guo)Gibco 公司(si))，胎牛(niu)血清(Hyclone公(gong)司)，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁(mai)晨(chen)科技有(you)限公(gong)司)。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)實驗(yan) MG63細(xi)胞(bao)鋪於35 mmol/L培(pei)養皿(min)中，待(dai)細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血清培(pei)養基(ji)培(pei)養3 h，分(fen)別加入濃度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細(xi)胞(bao)，離(li)心取(qu)上(shang)清加(jia)入凝(ning)膠(jiao)加樣(yang)緩(huan)沖液,沸(fei)水(shui)浴(yu)上(shang)加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹(yi)抗分(fen)別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體(ti)外(wai)激酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及其(qi)突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉染至MG63細(xi)胞(bao)，48 h後(hou)采(cai)用免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗IgG抗體(ti)。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml重(zhong)組活(huo)性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同時(shi)加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶(mei)反(fan)應(ying)緩(huan)沖液中(zhong)，30℃反(fan)應(ying)40 min。反(fan)應(ying)產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜，應(ying)用放(fang)射自(zi)顯(xian)影技術(shu)檢(jian)測(ce)32P 標記的(de)SSHL水(shui)平(ping)。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷(lin)酸酶(mei)活(huo)性(xing)測(ce)定(ding)實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細(xi)胞(bao)，48 h後(hou)，采(cai)用免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及抗(kang)cmyc抗體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗IgG抗體(ti)。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同時(shi)加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應(ying)2 h。反(fan)應(ying)產物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹(yi)抗分(fen)別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公司(si)更(geng)多(duo)產(chan)品(pin)優惠:

鼠(shu)抗人(ren)分(fen)泌(mi)成(cheng)分(fen)單(dan)克(ke)隆抗體    Secretory Component(SC)       小鼠基(ji)質細(xi)胞(bao)衍(yan)生因(yin)子(zi)βSDF-β/CXCL2抗(kang)體(ti)    0.5ml
470    鼠(shu)抗人(ren)血(xue)清素(su)單(dan)克(ke)隆抗體    Serotinin        小鼠基(ji)質細(xi)胞(bao)衍(yan)生因(yin)子(zi)aSDF-a/CXCL2抗(kang)體(ti)    0.5ml
47    兔(tu)抗(kang)人(ren)5-羥(qiang)色(se)胺(an)多(duo)克(ke)隆抗體    Serotonin       小鼠基(ji)質金(jin)屬蛋(dan)白(bai)酶(mei)2/明(ming)膠(jiao)酶(mei)AMMP-2/Gelatinase A抗(kang)體(ti)    0.5ml
472    鼠抗(kang)人(ren)血(xue)清素(su)（5-羥(qiang)色(se)胺(an)）單(dan)克(ke)隆抗體    Serotonin        小鼠肌(ji)球蛋(dan)白(bai)MYS抗(kang)體(ti)    0.5ml
473    鼠(shu)抗人(ren)Sialy-Tn單(dan)克(ke)隆抗體    Sialy-Tn(CD75s)        小鼠肌(ji)紅蛋(dan)白(bai)MYO/MB抗(kang)體(ti)    0.5ml
474    兔(tu)抗(kang)人(ren)多(duo)克(ke)隆抗體    Somatostatin      小鼠肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)TTn-T抗(kang)體(ti)     0.5ml
475    兔(tu)抗(kang)人(ren)受(shou)體多克(ke)隆抗體    Somatostatin Receptor-     小鼠肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)ⅠTn-Ⅰ抗(kang)體(ti)    0.5ml
476    兔(tu)抗(kang)人(ren)P物(wu)質多克(ke)隆抗體    Substance P        小鼠活(huo)化(hua)素(su)AACV-A抗(kang)體     0.5ml
477    鼠抗(kang)人(ren)表(biao)面(mian)活(huo)性(xing)蛋(dan)白(bai)B單(dan)克(ke)隆抗體    Surfactant Protein B       小鼠活(huo)化(hua)素(su)AACV-A抗(kang)體    0.5ml
478    兔(tu)抗(kang)人(ren)Survivin多(duo)克(ke)隆抗體    Survivin        小鼠活(huo)化(hua)蛋(dan)白(bai)CAPC抗(kang)體(ti)     0.5ml
479    鼠(shu)抗人(ren)突(tu)觸(chu)素(su)單(dan)克(ke)隆抗體    Synaptophysin        小鼠黃(huang)體(ti)生成(cheng)素(su)釋放(fang)激素(su)LHRH抗(kang)體    0.5ml