【概(gai)要描述(shu)】羊(yang)抗(kang)抗(kang)體(ti),抗(kang)體(ti)種(zhong)類,多(duo)種(zhong)試劑(ji)現貨(huo)供應(ying)!

羊(yang)抗(kang)抗(kang)體(ti)*,羊(yang)抗(kang)抗(kang)體(ti)用(yong)於(yu)免疫組(zu)化實驗(yan)，WB實驗(yan)，相應(ying)的標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)有(you)HRP標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條(tiao)件(jian)】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本品(pin)應在低(di)溫下保(bao)存(cun)，長時(shi)間在(zai)暴(bao)露(lu)在空(kong)氣(qi)中，含(han)量會(hui)有(you)所(suo)降低。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材(cai)料和方(fang)法

　　. 材(cai)料 人成骨肉瘤(liu)MG63細胞為(wei)本實驗(yan)室保(bao)存(cun)。重組質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由王巖(yan)教(jiao)授(shou)惠(hui)贈。脂質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司)。高(gao)糖DMEM培(pei)養基(ji)(美國(guo)Gibco 公司)，胎牛血清(qing)(Hyclone公(gong)司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨科技(ji)有限(xian)公(gong)司)。

　　.2 蛋(dan)白印(yin)跡實驗(yan) MG63細胞鋪於35 mmol/L培(pei)養皿中，待(dai)細胞密(mi)度達到60%～70%時(shi)，轉染MycSSHL，48 h後換(huan)無(wu)血清(qing)培(pei)養基(ji)培(pei)養3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入濃度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵(fu)育(yu)0 min後裂解細胞，離(li)心取上清(qing)加(jia)入凝膠(jiao)加(jia)樣(yang)緩(huan)沖液,沸(fei)水浴上加(jia)熱(re)5 min，上樣、電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜(za)交〔壹抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體(ti)外(wai)激(ji)酶測(ce)定 MycSSHL(WT)及其(qi)突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染至MG63細胞，48 h後采用(yong)免疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml重(zhong)組活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同時(shi)加(jia)入抑制(zhi)劑(ji)KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反應緩(huan)沖液中，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)，應(ying)用(yong)放射自顯(xian)影(ying)技(ji)術檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的SSHL水(shui)平。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷酸(suan)酶(mei)活(huo)性測(ce)定實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞，48 h後，采用(yong)免疫共(gong)沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的方(fang)法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體(ti)。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或(huo)同時(shi)加(jia)入抑制(zhi)劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜(za)交(壹抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體(ti))、ECL顯(xian)色。

本公司更多(duo)產品(pin)優惠(hui):

基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-2    兔子神經(jing)營養因(yin)子4NT-4抗(kang)體(ti)
基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-2    兔子神經(jing)營養因(yin)子3NT-3抗(kang)體(ti)
基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-2    兔子神經(jing)特異(yi)性烯(xi)醇化酶NSE抗(kang)體(ti)
基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-3    兔子神經(jing)生長因(yin)子NGF抗(kang)體(ti)
基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-8    兔子神經(jing)膠質纖(xian)維酸性蛋(dan)白(bai)GFAP抗(kang)體(ti)
基(ji)質金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)-9    兔子前(qian)列腺素E2PGE2抗(kang)體(ti)
甲(jia)胎蛋白(bai)(AFP)單克(ke)隆抗(kang)體(ti)    兔子前(qian)列腺素EPGE抗(kang)體(ti)
甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)球(qiu)蛋(dan)白(TG)    兔子葡(pu)萄糖(tang)依(yi)賴(lai)性胰(yi)島(dao)素釋(shi)放多(duo)肽(tai)GIP抗(kang)體(ti)
甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)轉錄(lu)因(yin)子-(TTF-)    兔子皮(pi)質酮(tong)/腎(shen)上腺酮(tong)CORT抗(kang)體(ti)
間(jian)變型(xing)淋巴(ba)瘤(liu)激(ji)酶    兔子Cortisol抗(kang)體(ti)
間(jian)變型(xing)淋巴(ba)瘤(liu)激(ji)酶磷酸(suan)化(hua)抗(kang)體(ti)    兔子ⅡFⅡ抗(kang)體(ti)
降血鈣(gai)素    兔子受(shou)體(ti)TR抗(kang)體(ti)
膠(jiao)質纖(xian)維酸性蛋(dan)白(bai)    兔子腦(nao)鈉(na)素/腦(nao)鈉(na)尿(niao)肽(tai)BNP抗(kang)體(ti)
膠(jiao)質纖(xian)維酸性蛋(dan)白(bai)(GFAP)    兔子內(nei)皮(pi)抑素ES抗(kang)體(ti)
結蛋(dan)白(bai)質    兔子內(nei)皮(pi)型壹氧(yang)化氮合(he)成酶(mei)3eNOS-3抗(kang)體(ti)
巨囊性病(bing)的液體(ti)蛋(dan)白5    兔子內(nei)皮(pi)素ET-抗(kang)體(ti)