當前(qian)位(wei)置:首(shou)頁 > 產品展(zhan)示(shi) > 蛋(dan)白(bai)/抗體(ti) > 免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)抗體(ti) > 羊抗人血清抗體(ti)

羊抗人血清抗體(ti)*,羊抗人血清抗體(ti)用於(yu)免疫(yi)組化(hua)實(shi)驗,WB實(shi)驗,相應的標(biao)記(ji)抗體(ti)有(you)HRP標記(ji)抗體(ti),FITC標(biao)記(ji),BIO等(deng)。
【貯存條(tiao)件】: 貯存於(yu)-20℃. 本(ben)品應在低(di)溫下保(bao)存,長時間在暴露(lu)在空(kong)氣中,含量(liang)會(hui)有所(suo)降(jiang)低。
規格(ge):0.5ml
材(cai)料(liao)和方(fang)法(fa)
. 材(cai)料(liao) 人成骨(gu)肉(rou)瘤MG63細胞(bao)為本(ben)實(shi)驗室保(bao)存。重(zhong)組質粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖教授惠(hui)贈。脂(zhi)質體 2000( Invitrogen公(gong)司)。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(美國Gibco 公(gong)司),胎(tai)牛(niu)血清(Hyclone公(gong)司),*和EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387,KN93,CaM,重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain,Calbiochem)。抗體(ti):Myc (9E0;Roche),HA (3F0;Roche),Pcofilin,Cofilin(Santa Cruz), CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.),PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁晨(chen)科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司)。
.2 蛋(dan)白(bai)印跡(ji)實(shi)驗 MG63細胞(bao)鋪於(yu)35 mmol/L培養(yang)皿中,待細胞(bao)密度達到60%~70%時,轉(zhuan)染(ran)MycSSHL,48 h後(hou)換無血清培養(yang)基培養3 h,分(fen)別(bie)加入(ru)濃(nong)度為0.5,,2.5,5 μmol/L的(de)A2387孵育0 min後(hou)裂(lie)解(jie)細胞(bao),離(li)心取(qu)上清加入(ru)凝(ning)膠(jiao)加(jia)樣緩沖液(ye),沸(fei)水浴上加熱5 min,上(shang)樣、電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜交(jiao)〔壹(yi)抗分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。
.3 體外激酶(mei)測定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變(bian)體MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉染(ran)至MG63細胞(bao),48 h後(hou)采(cai)用免疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的方(fang)法(fa)及(ji)抗cmyc抗體(ti),對(dui)照組為抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL,加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組活性(xing)CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同(tong)時加入(ru)抑制(zhi)劑(ji)KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶(mei)反(fan)應緩沖液(ye)中,30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產物(wu)進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo),應用放射(she)自顯(xian)影技術(shu)檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的SSHL水平(ping)。
.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸酶(mei)活性(xing)測定(ding)實(shi)驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細胞(bao),48 h後(hou),采(cai)用免疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的方(fang)法(fa)及(ji)抗cmyc抗體(ti),對(dui)照組為抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL,加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(du)或(huo)同(tong)時加入(ru)抑制(zhi)劑(ji)KN93),20 μg/ml CaM,以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES,pH 7.4,0. mol/L CaCl2,0.5 mol/L EDTA,3 mol/L MgCl2,00 mmol/L NaCl, mol/L dithiothreitol,0.5 mg/ml BSA, μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產物(wu)進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜(mo)、雜交(jiao)(壹(yi)抗分(fen)別(bie)為Pcofilin,Cofilin, cmyc 抗體(ti))、ECL顯(xian)色。
本(ben)公(gong)司更(geng)多(duo)產(chan)品(pin)優(you)惠:
雷帕(pa)黴素靶(ba)蛋(dan)白(bai) 兔子免疫(yi)球蛋(dan)白(bai)GIgG抗體(ti)
末端(duan)脫(tuo)氧核苷(gan)酸轉(zhuan)移(yi)酶(mei)(TdT) 兔子(zi)免疫(yi)球蛋(dan)白(bai)EIgE抗體(ti)
前(qian)列腺(xian)特異抗原 兔(tu)子(zi)免疫(yi)球蛋(dan)白(bai)AIgA抗體(ti)
前(qian)列腺(xian)特異性(xing)抗原(PSA)單克(ke)隆抗體(ti) 兔(tu)子可(ke)溶(rong)性(xing)粘附(fu)分子Sam抗體(ti)
熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)27 兔子可溶(rong)性(xing)血管(guan)細胞(bao)粘(zhan)附(fu)分子(zi)sVCAM-抗體(ti)
人波形(xing)蛋(dan)白(bai)(Vimentin) 兔子可溶(rong)性(xing)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao)蛋(dan)白(bai)C受體sEPCR抗體(ti)
人-S-轉移(yi)酶(mei)-π(GST-π) 兔子(zi)可溶(rong)性(xing)細胞(bao)間粘附分子(zi)sICAM-抗體(ti)
人結蛋(dan)白(bai)(Desmin) 兔子可溶(rong)性(xing)P選擇(ze)素sP-selectin抗體(ti)
人絨毛蛋(dan)白(bai)(Villin) 兔子可溶(rong)性(xing)E選擇(ze)素sE-selectin抗體(ti)
絨毛膜(mo)*β亞(ya)基(β-hCG) 兔子可溶(rong)性(xing)CD40配體(ti)sCD40L抗體(ti)
乳頭(tou)瘤(liu)病毒(du) 廣譜(HPV-,6,,6-6,8,3) 兔子(zi)抗中性(xing)粒(li)細胞(bao)顆粒(li)抗體(ti)ANGA抗體(ti)
上(shang)皮抗原 兔(tu)子(zi)巨(ju)噬細胞(bao)炎性(xing)蛋(dan)白(bai)5MIP-5抗體(ti)
上(shang)皮膜(mo)抗原(EMA) 兔(tu)子(zi)巨(ju)噬細胞(bao)炎性(xing)蛋(dan)白(bai)αMIP-α/CCL3抗體(ti)
神(shen)經元特異性(xing)烯醇(chun)化酶(mei)(NSE) 兔子(zi)膠原酶(mei)IICollagenase II抗體(ti)
嗜(shi)鉻素 A(Chromogranin A) 兔子膠(jiao)原酶(mei)ICollagenase I抗體(ti)
嗜(shi)鉻素A 兔子堿(jian)性(xing)成纖(xian)維細胞(bao)生長因(yin)子bFGF抗體(ti)
胎(tai)盤堿(jian)性(xing)磷酸酶(mei) 兔子(zi)甲狀(zhuang)腺素T4抗體(ti)
胎(tai)盤堿(jian)性(xing)磷酸酶(mei)(PLAP) 兔子(zi)基質金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制(zhi)因(yin)子TIMP-抗體(ti)
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