【概要描(miao)述(shu)】羊抗(kang)小(xiao)鼠(shu)IgG免(mian)疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體,抗(kang)體種(zhong)類,多種(zhong)試劑(ji)現(xian)貨(huo)供應!

羊抗(kang)小(xiao)鼠(shu)IgG免(mian)疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體*,羊抗(kang)小(xiao)鼠(shu)IgG免(mian)疫(yi)血(xue)清(qing)抗(kang)體用於(yu)免(mian)疫(yi)組化實(shi)驗，WB實(shi)驗，相(xiang)應的(de)標(biao)記(ji)抗(kang)體有HRP標(biao)記(ji)抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯(zhu)存條(tiao)件】： 貯(zhu)存於(yu)-20℃. 本品應(ying)在低(di)溫下(xia)保(bao)存，長(chang)時(shi)間在(zai)暴露(lu)在(zai)空氣中，含量會有所降低(di)。

規格：0.5ml

材料(liao)和(he)方法(fa)

　　. 材料(liao) 人(ren)成骨(gu)肉(rou)瘤(liu)MG63細胞為(wei)本實(shi)驗室(shi)保(bao)存。重(zhong)組質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖(yan)教授(shou)惠(hui)贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培(pei)養(yang)基(美(mei)國(guo)Gibco 公司)，胎牛血清(qing)(Hyclone公司)，和(he)EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(邁晨科技有限(xian)公司)。

　　.2 蛋(dan)白印跡實(shi)驗 MG63細胞鋪於(yu)35 mmol/L培(pei)養(yang)皿中，待細胞密度達(da)到60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)基培(pei)養(yang)3 h，分別加(jia)入(ru)濃度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細胞，離心(xin)取上(shang)清(qing)加(jia)入(ru)凝膠加(jia)樣緩沖(chong)液(ye),沸水浴上(shang)加(jia)熱(re)5 min，上樣、電泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹(yi)抗(kang)分別為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體外激酶測定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後采(cai)用免(mian)疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重組活(huo)性CaMKⅡ(單獨(du)或同(tong)時(shi)加(jia)入(ru)抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激酶反(fan)應(ying)緩沖(chong)液(ye)中，30℃反(fan)應(ying)40 min。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜，應用放(fang)射(she)自(zi)顯影技術(shu)檢(jian)測32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸(suan)酶活(huo)性測定(ding)實(shi)驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至(zhi)MG63細胞，48 h後，采(cai)用免(mian)疫(yi)共(gong)沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(du)或同(tong)時(shi)加(jia)入(ru)抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應(ying)緩沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應(ying)2 h。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行SDSPAGE電泳、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹(yi)抗(kang)分別為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯色(se)。

本公司更(geng)多產(chan)品優(you)惠:

突觸(chu)素(Synaptophysin)    兔(tu)子基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶9MMP-9抗(kang)體
拓(tuo)撲異構酶(mei)Ⅱα(TopoⅡα)    兔(tu)子基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶5MMP-5抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 0    兔(tu)子基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶4MMP-4抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 5    兔(tu)子基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶3MMP-3抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 6    兔(tu)子骨(gu)膠原(yuan)交聯(lian)Cr抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 7    兔(tu)子睪酮T抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 8    兔(tu)子高遷移(yi)率族(zu)蛋(dan)白BHMGB-抗(kang)體 
細胞角蛋(dan)白 9    兔(tu)子肝細胞生(sheng)長(chang)因(yin)子HGF抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 9(CK9)    兔(tu)子端粒酶(mei)TE抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 20    兔(tu)子酯轉(zhuan)移蛋(dan)白CETP抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 5    兔(tu)子單核(he)細胞趨(qu)化蛋(dan)白MCP-/CCL2/MCAF抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 6    兔(tu)子催乳(ru)素PRL抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 7    兔(tu)子促腎上(shang)腺(xian)皮質(zhi)激素ACTH抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 7(CK7)    兔(tu)子促卵(luan)泡(pao)素FSH抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 8    兔(tu)子促甲(jia)狀(zhuang)腺素TSH抗(kang)體
細胞角蛋(dan)白 8(CK 8)    兔(tu)子促黃體激素LH抗(kang)體