【概(gai)要描述】羊(yang)抗(kang)馬(ma)IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體,抗(kang)體種(zhong)類,多種試(shi)劑現(xian)貨(huo)供(gong)應(ying)!

羊(yang)抗(kang)馬(ma)IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體*,羊(yang)抗(kang)馬(ma)IgG免(mian)疫血(xue)清抗(kang)體用(yong)於(yu)免疫組化(hua)實(shi)驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相應(ying)的(de)標(biao)記(ji)抗(kang)體有HRP標記(ji)抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等。

【貯(zhu)存(cun)條件(jian)】： 貯(zhu)存(cun)於(yu)-20℃. 本品(pin)應(ying)在低溫下(xia)保存，長時間(jian)在暴(bao)露(lu)在空氣(qi)中(zhong)，含(han)量會(hui)有所降低。

規(gui)格：0.5ml

材(cai)料和(he)方法(fa)

　　. 材(cai)料 人成骨肉瘤(liu)MG63細(xi)胞(bao)為本實(shi)驗(yan)室保存。重組質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖(yan)教(jiao)授(shou)惠贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培養(yang)基(美國(guo)Gibco 公(gong)司(si))，胎牛血清(qing)(Hyclone公司(si))，*和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(邁晨科技(ji)有限公司(si))。

　　.2 蛋白(bai)印(yin)跡(ji)實(shi)驗(yan) MG63細(xi)胞(bao)鋪於35 mmol/L培養(yang)皿中(zhong)，待(dai)細(xi)胞(bao)密度達到(dao)60%～70%時，轉染MycSSHL，48 h後換無(wu)血(xue)清(qing)培養(yang)基培養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育(yu)0 min後裂解(jie)細(xi)胞(bao)，離(li)心(xin)取上清(qing)加(jia)入(ru)凝膠加(jia)樣緩沖液(ye),沸水浴上加(jia)熱(re)5 min，上(shang)樣、電泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體外(wai)激酶(mei)測定 MycSSHL(WT)及(ji)其突變體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞(bao)，48 h後采(cai)用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性CaMKⅡ(單獨或(huo)同(tong)時加(jia)入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激酶(mei)反(fan)應(ying)緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反應(ying)40 min。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜，應(ying)用(yong)放(fang)射(she)自顯(xian)影技術(shu)檢(jian)測32P 標記(ji)的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體外(wai)SSHL磷酸酶(mei)活(huo)性測定實(shi)驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至(zhi)MG63細(xi)胞(bao)，48 h後，采(cai)用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑盒的方法(fa)及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對(dui)照組(zu)為抗(kang)IgG抗(kang)體。回(hui)收MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或(huo)同(tong)時加(jia)入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應(ying)緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反應(ying)2 h。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進(jin)行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹抗(kang)分(fen)別(bie)為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色。

本公(gong)司(si)更多產品(pin)優(you)惠:

調節活化(hua)的正(zheng)常T細(xi)胞(bao)表達和(he)分(fen)泌(mi)的因(yin)子(zi)（趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)）
大鼠(shu)FMS樣*激酶(mei)3配(pei)體(ti)Flt3L抗(kang)體    053    鼠(shu)抗(kang)人肌動(dong)蛋(dan)白(bai)單克隆(long)抗(kang)體(廣(guang)譜）    Actin（HHF35)        巨噬細(xi)胞(bao)炎(yan)性蛋(dan)白(bai)3α抗(kang)體
大鼠(shu)GATA結合蛋(dan)白(bai)4GATA4抗(kang)體    054    鼠(shu)抗(kang)人橫紋(wen)肌肌動(dong)蛋(dan)白(bai)單克隆(long)抗(kang)體    Actin（Sarcomeric）      嗜(shi)酸粒細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白(bai)抗(kang)體
大鼠(shu)L苯解(jie)氨(an)酶(mei)PAL抗(kang)體    055    鼠(shu)抗(kang)人平(ping)滑(hua)肌肌動(dong)蛋(dan)白(bai)單克隆(long)抗(kang)體    Actin(SmoothMuscle)        巨噬細(xi)胞(bao)來源的(de)趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)抗(kang)體
大鼠(shu)L-鼠乳酸脫(tuo)氫(qing)酶(mei)L-LDH 抗(kang)體     056    兔抗(kang)人促(cu)腎上腺(xian)皮質(zhi)激素多克隆(long)抗(kang)體    Adrenocorticotropic Hormone(ACTH)        淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)CCL2抗(kang)體
大鼠(shu)L選擇素L-Selectin/CD62L抗(kang)體    057    兔抗(kang)人甲胎蛋白(bai)多克(ke)隆(long)抗(kang)體    AFP       嗜(shi)酸粒細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白(bai)22抗(kang)體
大鼠(shu)N端前腦鈉(na)素NT-proBNP抗(kang)體    058    兔抗(kang)人甲胎蛋白(bai)多克(ke)隆(long)抗(kang)體    AFP(Alpha Fetoprotein)        嗜(shi)酸粒細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白(bai)3抗(kang)體
大鼠(shu)N-乙酰(xian)-β-D-氨(an)基葡(pu)萄(tao)糖(tang)苷酶(mei)NAG抗(kang)體        細(xi)胞(bao)表面趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)受(shou)體(ti)抗(kang)體
大鼠(shu)N-乙酰(xian)基(ji)-絲氨酰(xian)-天(tian)門冬酰(xian)-賴(lai)氨酰(xian)-*AcSDKP抗(kang)體    059    鼠(shu)抗(kang)人甲胎蛋白(bai)單克隆(long)抗(kang)體    AFP(Alpha Fetoprotein)      細(xi)胞(bao)表面趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)受(shou)體(ti)2/5抗(kang)體
大鼠(shu)P53P53抗(kang)體    060    兔抗(kang)* a鏈多(duo)克隆(long)抗(kang)體    a-Human Chorionic Gonadotropin (hCG)        細(xi)胞(bao)表面趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)受(shou)體(ti)2A抗(kang)體