【概(gai)要(yao)描(miao)述】羊(yang)抗BSA免(mian)疫(yi)血清抗體(ti),抗體(ti)種類,多(duo)種(zhong)試劑現(xian)貨供(gong)應!

羊(yang)抗BSA免(mian)疫(yi)血清抗體(ti)*,羊(yang)抗BSA免(mian)疫(yi)血清抗體(ti)用(yong)於(yu)免(mian)疫(yi)組(zu)化實驗(yan)，WB實驗(yan)，相(xiang)應的標(biao)記抗體(ti)有(you)HRP標(biao)記抗體(ti)，FITC標(biao)記，BIO等。

【貯(zhu)存(cun)條(tiao)件】： 貯(zhu)存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品應在(zai)低(di)溫下保(bao)存(cun)，長時(shi)間在(zai)暴露在(zai)空氣中，含(han)量會(hui)有(you)所(suo)降低(di)。

規(gui)格：0.5ml

材(cai)料和(he)方(fang)法(fa)

　　. 材(cai)料 人(ren)成(cheng)骨肉瘤MG63細(xi)胞(bao)為本(ben)實(shi)驗(yan)室保(bao)存(cun)。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由(you)王巖教授(shou)惠(hui)贈(zeng)。脂質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養基(美國(guo)Gibco 公司(si))，胎(tai)牛血清(Hyclone公司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(he)(邁晨科技(ji)有(you)限(xian)公司(si))。

　　.2 蛋(dan)白印(yin)跡(ji)實驗(yan) MG63細胞(bao)鋪(pu)於35 mmol/L培(pei)養皿(min)中，待細(xi)胞(bao)密度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無血(xue)清培(pei)養基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分(fen)別加入(ru)濃(nong)度(du)為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵(fu)育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細(xi)胞(bao)，離(li)心(xin)取上(shang)清加入(ru)凝膠加樣(yang)緩(huan)沖(chong)液,沸(fei)水浴上(shang)加熱(re)5 min，上(shang)樣(yang)、電(dian)泳、轉膜(mo)、雜(za)交(jiao)〔壹(yi)抗分(fen)別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體(ti)外(wai)激(ji)酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及其突變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染(ran)至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采用(yong)免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(he)的方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照組(zu)為抗IgG抗體(ti)。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活性CaMKⅡ(單獨或(huo)同時(shi)加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反應緩(huan)沖(chong)液中(zhong)，30℃反應40 min。反應產物進行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)，應用(yong)放射(she)自(zi)顯影(ying)技(ji)術(shu)檢測(ce)32P 標(biao)記的SSHL水(shui)平(ping)。

　　.4 體(ti)外(wai)SSHL磷(lin)酸酶活性(xing)測定(ding)實驗(yan) MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采用(yong)免(mian)疫(yi)共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(he)的方(fang)法(fa)及抗cmyc抗體(ti)，對(dui)照組(zu)為抗IgG抗體(ti)。回(hui)收(shou)MycSSHL，加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或(huo)同時(shi)加入(ru)抑(yi)制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反應緩(huan)沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反應2 h。反應產物進行SDSPAGE電泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜(za)交(jiao)(壹(yi)抗分(fen)別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體(ti))、ECL顯色。

本(ben)公司(si)更多(duo)產(chan)品優(you)惠(hui):

大鼠CXC趨化因子配(pei)體6CXCL6抗體(ti)    044    VEGF 免(mian)疫(yi)組(zu)化檢測(ce)抗體(ti) H,M,R,Rb       組(zu)織蛋(dan)白酶(mei)H抗體(ti)
大鼠CXC趨化因子受(shou)體(ti)3CXCR3抗體(ti)    045    VEGF免(mian)疫(yi)組(zu)化檢測(ce)抗體(ti)H       成骨特(te)異性(xing)轉(zhuan)錄因子抗體(ti)
大鼠C反應蛋(dan)白CRP抗體(ti)    046    人外(wai)周(zhou)血(xue)T亞群(qun)免(mian)疫(yi)組(zu)化檢測(ce)抗體(ti)H       CREB結合(he)蛋(dan)白抗體(ti)
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大鼠E選擇(ze)素E-Selectin/CD62E抗體(ti)    05    鼠抗人(ren)肌動蛋(dan)白單克隆抗體(ti)    Actin      瓜氨酸環肽抗體(ti)
大鼠FMS樣(yang)激(ji)酶3Flt3抗體(ti)    052    鼠抗人(ren)α橫(heng)紋(wen)肌肌動蛋(dan)白單克隆抗體(ti)    Actin（Alpha-Sarcomeric）