【概要(yao)描(miao)述】羊抗人(ren)白蛋白-RBITC抗體,抗體(ti)種類,多(duo)種試劑(ji)現(xian)貨(huo)供應!

羊抗人(ren)白蛋白-RBITC抗體*,羊抗人(ren)白蛋白-RBITC抗體用於(yu)免(mian)疫(yi)組化實驗(yan)，WB實(shi)驗(yan)，相應的(de)標記抗體(ti)有(you)HRP標記抗體(ti)，FITC標記，BIO等。

【貯(zhu)存(cun)條件(jian)】： 貯存於(yu)-20℃. 本品應在(zai)低溫(wen)下(xia)保存(cun)，長(chang)時間在(zai)暴(bao)露(lu)在(zai)空(kong)氣中(zhong)，含(han)量會(hui)有(you)所降低。

規格(ge)：0.5ml/ml

材(cai)料(liao)和方(fang)法(fa)

　　. 材(cai)料(liao) 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉(rou)瘤(liu)MG63細(xi)胞為本實驗(yan)室(shi)保存。重組質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及(ji)recombinant cofilinHis6由王(wang)巖(yan)教授惠(hui)贈。脂(zhi)質(zhi)體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖(tang)DMEM培(pei)養(yang)基(ji)(美國Gibco 公(gong)司(si))，胎牛(niu)血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，和EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁晨科技有(you)限(xian)公(gong)司(si))。

　　.2 蛋白印跡實(shi)驗(yan) MG63細(xi)胞鋪於(yu)35 mmol/L培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，待(dai)細(xi)胞密度(du)達到(dao)60%～70%時，轉染MycSSHL，48 h後(hou)換無血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分(fen)別加入濃(nong)度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育(yu)0 min後(hou)裂解細(xi)胞，離心取上(shang)清(qing)加入凝(ning)膠(jiao)加樣緩沖液(ye),沸(fei)水(shui)浴(yu)上(shang)加熱5 min，上(shang)樣、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)〔壹(yi)抗(kang)分別為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色(se)。

　　.3 體(ti)外激(ji)酶(mei)測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突(tu)變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別轉(zhuan)染至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)采用免疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單(dan)獨或同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶(mei)反(fan)應緩沖液(ye)中(zhong)，30℃反(fan)應40 min。反(fan)應產物(wu)進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜，應用放(fang)射自(zi)顯影技術檢(jian)測(ce)32P 標記的(de)SSHL水(shui)平。

　　.4 體(ti)外SSHL磷(lin)酸(suan)酶(mei)活性測(ce)定(ding)實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染至(zhi)MG63細(xi)胞，48 h後(hou)，采用免疫(yi)共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方(fang)法(fa)及(ji)抗cmyc抗(kang)體(ti)，對(dui)照(zhao)組(zu)為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同(tong)時加入抑(yi)制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反(fan)應緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應2 h。反(fan)應產物(wu)進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜交(jiao)(壹(yi)抗(kang)分別為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯色(se)。

本公(gong)司(si)更(geng)多產品(pin)優(you)惠(hui):

大(da)鼠雕(diao)亡誘導因(yin)子(zi)AIF抗體(ti)    85    鼠抗人(ren)Cdk4單(dan)克隆(long)抗體(ti)    Cdk4        細(xi)胞雕(diao)亡關(guan)聯(lian)激(ji)酶(mei)抗體(ti)
大鼠AZT抗體(ti)    86    鼠抗人(ren)Cdk5單(dan)克隆(long)抗體(ti)    Cdk5        拮抗雕(diao)亡轉錄因(yin)子(zi)抗體(ti)
大鼠毒(du)蕈(xun)堿型(xing)乙酰(xian)受(shou)體(ti)M-AChR抗體(ti)     87    鼠抗人(ren)Cdk6單(dan)克隆(long)抗體(ti)    Cdk6        腺苷(gan)三(san)磷酸(suan)結合(he)盒(he)轉運體A抗體
大鼠端粒(li)酶(mei)TE抗體(ti)    88    鼠抗人(ren)CDw75單(dan)克隆(long)抗體(ti)    CDw75        ATP結合(he)蛋白家族(zu)5抗體(ti)
大鼠多巴胺(an)D受體(ti)DR抗體    89    兔抗人(ren)多(duo)克隆(long)抗體(ti)    C-erbB-2        ATP結合(he)蛋白家族(zu)6抗體(ti)
大鼠多巴胺(an)D2受體(ti)D2R抗體    90    鼠抗人(ren)單(dan)克隆(long)抗體(ti)    C-erbB-2      ATP結合(he)盒(he)蛋白家族(zu)GCN20F家族(zu)抗體(ti)
大鼠多巴胺(an)DA抗體(ti)    9    兔抗人(ren)C-erbB-2克隆(long)抗體(ti)    C-erbB-2  Oncoprotein       三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)結(jie)合(he)盒(he)亞家族(zu)G抗體(ti)
大鼠多巴胺(an)轉運蛋白DAT抗體    92    鼠抗人(ren)C-erbB-2單(dan)克隆(long)抗體(ti)    C-erbB-2/neu Oncoprotein        ABCG抗體(ti)
大鼠兒茶(cha)酚(fen)胺CA抗體    93    兔抗人(ren)胰多克隆(long)抗體(ti)    AACT        三(san)磷酸(suan)腺苷(gan)結(jie)合(he)轉(zhuan)運蛋白G超家族(zu)成員(yuan)2抗體