【概要(yao)描述(shu)】兔(tu)抗(kang)FITCIgG-FITC抗(kang)體,抗體種類(lei),多(duo)種(zhong)試(shi)劑(ji)現貨供應!

兔(tu)抗(kang)FITCIgG-FITC抗(kang)體*,兔(tu)抗(kang)FITCIgG-FITC抗(kang)體用(yong)於免(mian)疫組化實驗，WB實驗，相(xiang)應(ying)的(de)標記(ji)抗體有(you)HRP標記(ji)抗體，FITC標記(ji)，BIO等(deng)。

【貯存(cun)條件】： 貯存於-20℃. 本品(pin)應在(zai)低(di)溫(wen)下保(bao)存，長時(shi)間(jian)在暴露在空(kong)氣(qi)中(zhong)，含(han)量(liang)會(hui)有(you)所(suo)降低。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材料(liao)和(he)方(fang)法

　　. 材料(liao) 人成骨肉(rou)瘤(liu)MG63細胞(bao)為本實(shi)驗室(shi)保(bao)存。重組質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教(jiao)授惠(hui)贈。脂質(zhi)體 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高糖DMEM培(pei)養基(美(mei)國(guo)Gibco 公(gong)司(si))，胎牛血(xue)清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試劑盒(邁(mai)晨科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司(si))。

　　.2 蛋白(bai)印跡(ji)實(shi)驗 MG63細胞(bao)鋪於35 mmol/L培養皿(min)中(zhong)，待(dai)細胞(bao)密度達到60%～70%時(shi)，轉染MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無血(xue)清培(pei)養基培(pei)養3 h，分(fen)別加(jia)入(ru)濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解細胞(bao)，離(li)心取(qu)上(shang)清(qing)加入(ru)凝膠加(jia)樣(yang)緩(huan)沖液(ye),沸水浴上加(jia)熱(re)5 min，上樣(yang)、電(dian)泳、轉膜、雜交〔壹抗(kang)分(fen)別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體外(wai)激(ji)酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其(qi)突變(bian)體MycSSHL(2 SA)分別轉染至MG63細(xi)胞(bao)，48 h後(hou)采用(yong)免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重組活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加(jia)入(ru)抑制劑(ji)KN93)以及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶反(fan)應緩(huan)沖液(ye)中(zhong)，30℃反(fan)應(ying)40 min。反應產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉膜，應用(yong)放(fang)射(she)自顯(xian)影技術(shu)檢測(ce)32P 標記(ji)的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸(suan)酶活(huo)性測定(ding)實(shi)驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細(xi)胞(bao)，48 h後(hou)，采用(yong)免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試劑盒的(de)方(fang)法及(ji)抗(kang)cmyc抗(kang)體，對照組為抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加(jia)入(ru)抑制劑(ji)KN93)，20 μg/ml CaM，以及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應(ying)緩沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中(zhong)30℃反(fan)應(ying)2 h。反應產(chan)物(wu)進(jin)行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉膜、雜交(壹抗(kang)分(fen)別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色。

本公(gong)司(si)更多(duo)產(chan)品(pin)優惠(hui):

大鼠(shu)淋巴細胞(bao)功能相(xiang)關(guan)抗(kang)原(yuan)3LFA-3/CD58抗(kang)體    3ml     蛇毒(du)巴曲酶抗(kang)體
大鼠(shu)淋巴細胞(bao)趨化因子Lptn/LTN/XCL抗(kang)體    , 366    鼠(shu)抗人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶0單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MMP-0/Stromelysin-2/Transin-2     Bax（小鼠(shu)來源(yuan)抗體）
大鼠(shu)淋巴細胞(bao)因子抗(kang)體    367    鼠(shu)抗人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶3單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MMP-3/Collagenase-3        Bax抗體
大鼠(shu)磷(lin)酸(suan)化蛋白(bai)激(ji)酶CP-PKC抗(kang)體    368    鼠(shu)抗人(ren)MMP-2單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MMP-2        Bcl-2抗體
大鼠(shu)磷(lin)酸(suan)化核因子κB抑(yi)制蛋(dan)白(bai)αpIKBα抗(kang)體    369    鼠(shu)抗人(ren)基質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶7單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MMP-7/Matrilysin/PUMP-      Bcl-xL蛋白(bai)抗體
大鼠(shu)磷(lin)酸(suan)化細胞(bao)外(wai)信號(hao)調(tiao)節激(ji)酶pERK抗(kang)體    370    鼠(shu)抗人(ren)MMP-9單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MMP-9        p53正向細(xi)胞(bao)雕(diao)亡(wang)調(tiao)控因(yin)子抗(kang)體
大鼠(shu)磷(lin)酸(suan)化腺(xian)苷(gan)酸(suan)活(huo)化蛋白(bai)激(ji)酶AMPK抗(kang)體        抗磷(lin)酸(suan)化Bcl-xL(pSer62)蛋白(bai)抗體
大鼠(shu)磷(lin)酸(suan)化乙酰羧(suo)化酶pACCase抗(kang)體    37    鼠(shu)抗人(ren)MOC3單(dan)克隆(long)抗(kang)體    MOC3       丁(ding)酰脂酶抗(kang)體(N端(duan))