【概要(yao)描(miao)述】兔抗(kang)-FITC抗體,抗(kang)體種(zhong)類,多(duo)種試劑現(xian)貨供(gong)應!

兔(tu)抗(kang)-FITC抗(kang)體*,兔(tu)抗(kang)-FITC抗(kang)體用(yong)於(yu)免(mian)疫組化實驗，WB實驗，相(xiang)應的(de)標(biao)記(ji)抗(kang)體有HRP標(biao)記(ji)抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等。

【貯(zhu)存條件(jian)】： 貯存於-20℃. 本品(pin)應在低溫下保存，長(chang)時間(jian)在暴(bao)露(lu)在空氣中，含量(liang)會(hui)有所(suo)降低。

規(gui)格(ge)：0.5ml

材(cai)料和(he)方(fang)法

　　. 材(cai)料 人(ren)成骨(gu)肉瘤(liu)MG63細胞為(wei)本實(shi)驗室(shi)保存。重組質(zhi)粒(li)MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以(yi)及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠(hui)贈(zeng)。脂質(zhi)體 2000( Invitrogen公司)。高糖(tang)DMEM培養(yang)基(ji)(美(mei)國(guo)Gibco 公司)，胎牛(niu)血(xue)清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)(邁(mai)晨科(ke)技(ji)有限公司)。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)實(shi)驗 MG63細胞鋪於35 mmol/L培(pei)養(yang)皿中，待(dai)細胞密(mi)度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染MycSSHL，48 h後換無(wu)血(xue)清培養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)3 h，分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)濃(nong)度(du)為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵(fu)育0 min後裂解(jie)細(xi)胞，離(li)心(xin)取(qu)上(shang)清加(jia)入(ru)凝膠(jiao)加(jia)樣緩(huan)沖(chong)液(ye),沸水浴(yu)上(shang)加(jia)熱5 min，上(shang)樣、電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交〔壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及(ji)CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。

　　.3 體外激(ji)酶測(ce)定 MycSSHL(WT)及其(qi)突(tu)變體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染至MG63細胞，48 h後采用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)方法及抗(kang)cmyc抗體，對(dui)照組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)以(yi)及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶反應緩(huan)沖(chong)液(ye)中，30℃反應40 min。反應產物(wu)進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜，應用放(fang)射自顯(xian)影技(ji)術(shu)檢測(ce)32P 標(biao)記(ji)的(de)SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸(suan)酶活性測(ce)定實驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細胞，48 h後，采用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)方法及抗(kang)cmyc抗體，對(dui)照組為(wei)抗(kang)IgG抗(kang)體。回收(shou)MycSSHL，加(jia)入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時加(jia)入(ru)抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反應緩(huan)沖(chong)液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產物(wu)進行SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉(zhuan)膜、雜(za)交(壹(yi)抗(kang)分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗(kang)體)、ECL顯(xian)色。

本公司更多產品(pin)優(you)惠(hui):

大(da)鼠內(nei)脂素/內(nei)臟脂肪素(su)visfatin抗體    390    兔(tu)抗(kang)人(ren)肌(ji)紅蛋(dan)白(bai)多(duo)克隆抗(kang)體    Myoglobin        溴脫(tuo)氧(yang)尿苷(gan)單(dan)克(ke)隆(long)抗體
大(da)鼠腦腸(chang)肽BGP/Gehrelin抗(kang)體    39    鼠(shu)抗(kang)人(ren)肌(ji)紅蛋(dan)白(bai)單(dan)克(ke)隆(long)抗體    Myoglobin        溴脫(tuo)氧(yang)尿苷(gan)抗體
大(da)鼠腦紅蛋白NGB抗(kang)體    
大(da)鼠腦鈉素/腦鈉(na)尿(niao)肽(tai)BNP抗體    392    兔(tu)抗(kang)人(ren)肌(ji)紅蛋(dan)白(bai)多(duo)克隆抗(kang)體    Myoglobin    
大(da)鼠腦源性神經(jing)營養(yang)因(yin)子BDNF抗(kang)體    393    兔(tu)抗(kang)人(ren)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白（骨(gu)骼肌(ji)）多克(ke)隆(long)抗(kang)體    Myosin (Skeletal Muscle)      
大(da)鼠UK抗體    394    鼠(shu)抗(kang)人(ren)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白（骨(gu)骼肌(ji)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體    Myosin (Skeletal Muscle)       0mg
大(da)鼠型(xing)纖溶(rong)酶原(yuan)激(ji)活物(wu)uPA抗體    395    鼠(shu)抗(kang)人(ren)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白（橫(heng)紋肌(ji)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體    Myosin (Skeletal Muscle)       50mg
大(da)鼠型(xing)纖溶(rong)酶原(yuan)激(ji)活物(wu)受(shou)體PLAUR/uPAR抗(kang)體    396    鼠(shu)抗(kang)人(ren)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白（平(ping)滑肌(ji)）單(dan)克(ke)隆(long)抗體    Myosin (Smooth Muscle)      00mg
大(da)鼠檸檬(meng)酸合酶CS抗體    397    鼠(shu)抗(kang)人(ren)神經(jing)粘附(fu)蛋(dan)白單(dan)克(ke)隆(long)抗體    N-Cadherin        000mg