當(dang)前(qian)位(wei)置(zhi):首(shou)頁 > 產品(pin)展示 > PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒 > 熒(ying)光-PCR法(fa) > 促(cu)生長(chang)轉(zhuan)ScGH基(ji)因成分核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑(ji)盒品(pin)牌

使(shi)用方法(fa):
壹(yi)、樣(yang)品(pin) RNA 的制備(bei)
、用(yong)自選(xuan)方(fang)法(fa)抽(chou)提病毒(du)樣(yang)品(pin) RNA。註意(yi):可(ke)以(yi)選用本公(gong)司的(de)壹(yi)管(guan)式病(bing)毒(du) RNAout
2、或(huo)柱(zhu)式病(bing)毒(du) RNAout。
二(er):RT(逆(ni)轉(zhuan)錄)反應(ying)合成 cDNA
. 按(an)下表配制 RT 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)(20 μL 體(ti)系(xi))
2. 70℃保溫 5 分鐘(zhong)變(bian)性模板(ban)後(hou)立(li)即(ji)冰(bing)浴。
3. 嚴格(ge)按(an)順序(xu)加入(ru) 6μL RT Buffer(含(han) dNTP)和 2μL MMLV 逆(ni)轉(zhuan)錄酶(mei)(含(han) RI),
反應(ying)終體(ti)積(ji)為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘(zhong)。此(ci)步(bu)為(wei) RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保溫 0 分鐘(zhong)以(yi)終止反應(ying),然後(hou)放(fang)置(zhi)在(zai)冰上(shang)待(dai)用(yong)。合成的 cDNA 可(ke)以(yi)直接作(zuo)為(wei) PCR 模(mo)板(ban)使用(yong),丌需要(yao)純化(hua)。
產(chan)品(pin)名稱(cheng):促(cu)生(sheng)長(chang)轉(zhuan)ScGH基(ji)因成分核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑(ji)盒品(pin)牌
規(gui)格(ge):48T/盒(he)
類(lei)別:熒(ying)光-PCR法(fa)
運輸:低(di)溫、避光(guang)、快遞免費送(song)貨上(shang)門。
用途:生(sheng)化(hua)實驗,合成實驗等試驗。
運輸及(ji)保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限(xian)為(wei) 6 個月。
自備(bei)試(shi)劑(ji):樣(yang)品(pin) RNA。
性能指(zhi)標:點擊(ji)了(le)解(jie)更(geng)多熒(ying)光-PCR法(fa)。
.試(shi)劑(ji)盒檢測特(te)異性為(wei)00%
2. 檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒重(zhong)現(xian)性為(wei)00%
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有效期為(wei)6個月
註意(yi)事項(xiang):
①加入(ru)試劑(ji)的順序(xu)應(ying)*,以(yi)保證所有反應(ying)板(ban)孔溫育的時間壹樣(yang)。
②使用(yong)幹(gan)凈的(de)塑(su)料(liao)容器(qi)配置(zhi)洗(xi)滌液(ye)。
③按(an)照雞(ji)血(xue)紅蛋(dan)白(bai)(HB)ELISA檢測試(shi)劑(ji)盒說明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時間、加液(ye)的量及(ji)順序(xu)進(jin)行(xing)溫育操作(zuo)。
④底(di)物(wu)A應(ying)揮發,避免長(chang)時間打開蓋子。底(di)物(wu)B對光(guang)敏(min)感(gan),避免長(chang)時間暴露於光下。避免用手(shou)接觸,有毒。實驗完成後(hou)應(ying)立即讀取(qu)OD值。
⑤洗(xi)滌酶(mei)標板(ban)時應(ying)充分拍幹(gan),不(bu)要(yao)將吸水(shui)紙直(zhi)接放(fang)入(ru)酶(mei)標反應(ying)孔中(zhong)吸(xi)水(shui)。
⑥使(shi)用(yong)壹次性的吸(xi)頭(tou)以(yi)免交叉(cha)汙(wu)染,吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和底(di)物(wu)A、B液(ye)時,避免使用(yong)帶(dai)金屬(shu)部分(fen)的(de)加樣(yang)器(qi) 。
⑦實驗中(zhong)不(bu)用(yong)的板(ban)條應(ying)立即放回(hui)包裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密(mi)封保存,以(yi)免變質(zhi)。
⑧試劑(ji)應(ying)按(an)標簽說明(ming)書(shu)儲(chu)存,使用(yong)前(qian)恢(hui)復(fu)到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的(de)標準(zhun)品(pin)應(ying)丟棄(qi),不(bu)可(ke)保存。
⑨不(bu)用(yong)的其它試(shi)劑(ji)應(ying)包裝(zhuang)好或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑(ji)不(bu)要(yao)混用。保質(zhi)前(qian)使(shi)用。
反(fan)應(ying)五要素:
參(can)加PCR反(fan)應(ying)的物(wu)質(zhi)主(zhu)要有五種即引物(wu)、酶(mei)、dNTP、模(mo)板(ban)和Mg2+
引物(wu):引物(wu)是(shi)PCR特異性反應(ying)的關鍵(jian),PCR 產(chan)物(wu)的(de)特異性取(qu)決於引物(wu)與模板(ban)DNA互(hu)補的(de)程度。理(li)論(lun)上,只要(yao)知(zhi)道(dao)任何壹(yi)段模(mo)板(ban)DNA序列, 就(jiu)能按(an)其設計互(hu)補的(de)寡核(he)苷(gan)酸(suan)鏈做(zuo)引物(wu),利(li)用PCR就(jiu)可(ke)將模板(ban)DNA在(zai)體(ti)外(wai)大量(liang)擴(kuo)增。設計引物(wu)應(ying)遵(zun)循(xun)以(yi)下原則:
①引物(wu)長(chang)度: 5-30bp,常用(yong)為(wei)20bp左(zuo)右(you)。
②引物(wu)擴(kuo)增跨(kua)度(du): 以(yi)200-500bp為(wei)宜(yi),特(te)定條件(jian)下可(ke)擴(kuo)增長(chang)至(zhi)0kb的(de)片段(duan)。
③引物(wu)堿(jian)基:G+C含(han)量以(yi)40-60%為(wei)宜(yi),G+C太少(shao)擴(kuo)增效果不(bu)佳(jia),G+C過(guo)多(duo)易(yi)出(chu)現非(fei)特(te)異(yi)條帶(dai)。ATGC隨(sui)機分布(bu),避免5個以(yi)上的嘌呤或(huo)嘧(mi)啶(ding)核(he)苷(gan)酸(suan)的成串(chuan)排列。
④避免引物(wu)內部出現二(er)級結構,避免兩條引物(wu)間互(hu)補,特(te)別是(shi)3'端(duan)的(de)互(hu)補,否則會(hui)形成引物(wu)二(er)聚(ju)體(ti),產(chan)生(sheng)非(fei)特(te)異(yi)的(de)擴(kuo)增條帶(dai)。
⑤引物(wu)3'端(duan)的(de)堿(jian)基(ji),特別是(shi)末(mo)及(ji)倒數第二(er)個堿(jian)基,應(ying)嚴格(ge)要(yao)求配(pei)對,以(yi)避免因末(mo)端(duan)堿(jian)基(ji)不(bu)配(pei)對而導(dao)致(zhi)PCR失敗。
⑥引物(wu)中(zhong)有或能加上(shang)合適的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點, 被(bei)擴(kuo)增的靶(ba)序(xu)列有適宜(yi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點, 這(zhe)對酶(mei)切(qie)分析(xi)或分(fen)子(zi)克(ke)隆(long)很(hen)有好處。
⑦引物(wu)的(de)特異性:引物(wu)應(ying)與核(he)酸(suan)序列數據庫(ku)的其它序(xu)列無明(ming)顯(xian)同(tong)源(yuan)性。
引物(wu)量(liang):每條引物(wu)的(de)濃度0.~umol或(huo)0~00pmol,以(yi)低引物(wu)量(liang)產生所需要(yao)的結果為(wei)好(hao),引物(wu)濃度偏高會(hui)引起錯配和非(fei)特(te)異(yi)性擴(kuo)增,且可(ke)增加引物(wu)之(zhi)間形成二(er)聚(ju)體(ti)的(de)機(ji)會(hui)。
3-二(er)酰苯(ben)硼 50T 低溫運輸,-20℃保存
3-甲(jia)酰苯(ben)硼 50T 低溫運輸,-20℃保存
氟溴(xiu)甲(jia)烷(wan) 50T 低溫運輸,-20℃保存
2-硝(xiao)苯(ben)乙(yi) 50T 低溫運輸,-20℃保存
BOC-DL-丙氨(an) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
四(si)丁基銨(水(shui)合物(wu)) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
2-羥基(ji)-3,4-二(er)氫吡喃 50T 低溫運輸,-20℃保存
3-(2-啶(ding)基)-D-丙氨(an) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
Boc-3-(4-啶(ding)基)-D-丙氨(an) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
N-苯(ben)基雙(三氟甲(jia)烷(wan)酰)亞(ya)胺(an) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
2,4,6-三氯嘧(mi)啶(ding) 50T 低溫運輸,-20℃保存
(S)-3-哌(pai)啶(ding)甲(jia)乙(yi)酯 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
5-溴-2-甲(jia)氧(yang) 50T 低(di)溫運輸,-20℃保存
2-氯-6-羥基(ji)煙(yan) 50T 低溫運輸,-20℃保存
4-氨(an)基(ji)四(si)氫吡喃 50T 低溫運輸,-20℃保存
促生(sheng)長(chang)轉(zhuan)ScGH基(ji)因成分核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑(ji)盒品(pin)牌parathyroid hormone-like protein,PLP 人(ren)甲(jia)狀(zhuang)旁腺(xian)激素樣(yang)蛋白(bai) CAS: 規(gui)格(ge): 500mg
visfatin 人(ren)內脂(zhi)素/內臟脂(zhi)肪(fang)素 CAS: 52-76-6 規(gui)格(ge): 20mg
apelin 2,AP2 人(ren)apelin 2 CAS: 57282-49-2 規(gui)格(ge): 200mg
Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP 人(ren)葡萄(tao)糖(tang)依(yi)賴性胰島(dao)素釋放(fang)多肽 CAS: 657-27-2 規(gui)格(ge): 200mg
Proinsulin,PI 人(ren)胰島(dao)素原(yuan) CAS: 9008-30-4 規(gui)格(ge): 350mg
Insulin Receptor Beta,ISR- Beta 人(ren)胰島(dao)素受(shou)體(ti)β CAS: 9004-96-0 規(gui)格(ge): 500mg
Glycated hemoglobin Ac,GHbAc 人(ren)糖(tang)化(hua)血(xue)紅蛋白(bai)Ac CAS: 9005-00-9 規(gui)格(ge): g
ghcagons-like pepfide ,GLP- 人(ren)胰高血糖(tang)素樣(yang)肽 CAS: 3009-99-9 規(gui)格(ge): 400mg
thyroid stimulating immunoglobulin,TSI 人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺刺(ci)激免疫球蛋(dan)白(bai) CAS: 74978-6-8 規(gui)格(ge): 200mg
Parathyroid hormone,PTH 人(ren)甲(jia)狀(zhuang)旁腺(xian)激素 CAS: 546-93-0 規(gui)格(ge): 2g
Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX 人(ren)甲(jia)肟前(qian)列腺素D2 CAS: 779-8-6 規(gui)格(ge): g
Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 人(ren)高敏(min)甲(jia)狀(zhuang)腺素 CAS: 309-42-8 規(gui)格(ge): g
ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH 人(ren)高靈敏(min)度(du)促(cu)甲(jia)狀(zhuang)腺激(ji)素 CAS: 7757-87- 規(gui)格(ge): 2g
dopamine,DA 人(ren)多(duo)巴(ba)胺 CAS: 897-95-8 規(gui)格(ge): 200mg
Azidothymidine,AZT 人(ren) CAS: 557-04-0 規(gui)格(ge): 5g
企(qi)業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上(shang)海谷(gu)研(yan)實業有限公(gong)司
3004918891發(fa)送(song)信件(jian)產(chan)品(pin)分類(lei)
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