當前(qian)位(wei)置:首(shou)頁 > 產品展示 > PCR檢測試劑盒(he) > 熒(ying)光-PCR法 > 禽傳染(ran)性(xing)支(zhi)氣管炎病(bing)毒(du)(AIBV)核酸(suan)檢測試劑盒(he)

使用(yong)方(fang)法:
壹(yi)、樣(yang)品 RNA 的制(zhi)備(bei)
、用(yong)自(zi)選方(fang)法抽(chou)提(ti)病(bing)毒(du)樣(yang)品 RNA。註(zhu)意:可以選(xuan)用(yong)本(ben)公司(si)的壹(yi)管式(shi)病(bing)毒(du) RNAout
2、或柱(zhu)式(shi)病(bing)毒(du) RNAout。
二:RT(逆(ni)轉錄)反(fan)應(ying)合成(cheng) cDNA
. 按下(xia)表(biao)配(pei)制 RT 反(fan)應(ying)體系(xi)(20 μL 體系(xi))
2. 70℃保(bao)溫 5 分(fen)鐘(zhong)變(bian)性(xing)模(mo)板後(hou)立(li)即冰(bing)浴(yu)。
3. 嚴(yan)格按順序加入 6μL RT Buffer(含(han) dNTP)和 2μL MMLV 逆(ni)轉錄酶(含(han) RI),
反(fan)應(ying)終體(ti)積為(wei) 20μL。
4. 42℃保(bao)溫 60 分(fen)鐘(zhong)。此(ci)步(bu)為 RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保(bao)溫 0 分(fen)鐘(zhong)以終(zhong)止反(fan)應(ying),然後(hou)放(fang)置在(zai)冰(bing)上待(dai)用(yong)。合(he)成(cheng)的 cDNA 可以直(zhi)接(jie)作(zuo)為 PCR 模(mo)板使用(yong),丌(ji)需要(yao)純(chun)化(hua)。
產品名(ming)稱(cheng):禽傳染(ran)性(xing)支(zhi)氣管炎病(bing)毒(du)(AIBV)核酸(suan)檢測試劑盒(he)品牌(pai)
規格:48T/盒(he)
類(lei)別(bie):熒光-PCR法
運(yun)輸(shu):低(di)溫、避(bi)光、快遞免費(fei)送(song)貨上門(men)。
用(yong)途:生化(hua)實(shi)驗(yan),合(he)成(cheng)實驗等試(shi)驗(yan)。
運(yun)輸(shu)及保(bao)存:低(di)溫運(yun)輸(shu),-20℃保(bao)存, 保(bao)存期(qi)限為(wei) 6 個(ge)月。
自(zi)備(bei)試(shi)劑:樣(yang)品 RNA。
性(xing)能(neng)指(zhi)標(biao):點(dian)擊(ji)了(le)解更多熒光-PCR法。
.試(shi)劑盒(he)檢測特異性(xing)為(wei)00%
2. 檢測試劑盒(he)重(zhong)現(xian)性(xing)為(wei)00%
3. 靈(ling)敏度(du)可達(da)到03/ml
4. 有(you)效(xiao)期(qi)為6個(ge)月
註(zhu)意事項(xiang):
①加入試劑的順序應(ying)*,以保(bao)證所有(you)反(fan)應(ying)板孔溫育(yu)的(de)時間(jian)壹樣(yang)。
②使用(yong)幹(gan)凈(jing)的(de)塑(su)料(liao)容器(qi)配(pei)置(zhi)洗滌液(ye)。
③按照雞血紅(hong)蛋(dan)白(HB)ELISA檢測試劑盒(he)說(shuo)明書(shu)中標(biao)明(ming)的時(shi)間(jian)、加液(ye)的(de)量(liang)及(ji)順序進(jin)行(xing)溫育(yu)操作(zuo)。
④底物A應(ying)揮(hui)發(fa),避免長時間(jian)打開(kai)蓋子(zi)。底物B對光敏感(gan),避免長時間(jian)暴露(lu)於(yu)光下(xia)。避(bi)免用(yong)手接(jie)觸(chu),有(you)毒(du)。實驗(yan)完成(cheng)後應(ying)立(li)即讀(du)取OD值。
⑤洗(xi)滌酶標(biao)板時(shi)應(ying)充(chong)分(fen)拍幹,不(bu)要(yao)將吸(xi)水紙直(zhi)接放(fang)入酶標(biao)反(fan)應(ying)孔中吸(xi)水。
⑥使用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)吸(xi)頭以免交(jiao)叉(cha)汙染(ran),吸(xi)取終止液(ye)和底物A、B液(ye)時(shi),避(bi)免使用(yong)帶(dai)金屬(shu)部分(fen)的(de)加樣(yang)器(qi) 。
⑦實(shi)驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板條應(ying)立(li)即放(fang)回包(bao)裝袋(dai)中,密(mi)封保(bao)存,以免變(bian)質。
⑧試劑應(ying)按標簽(qian)說(shuo)明書(shu)儲(chu)存(cun),使用(yong)前(qian)恢(hui)復(fu)到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後的標準(zhun)品應(ying)丟棄(qi),不可保(bao)存。
⑨不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它試劑應(ying)包裝好(hao)或蓋好(hao)。不(bu)同批號(hao)的試劑不要混用(yong)。保(bao)質前(qian)使用(yong)。
反(fan)應(ying)五要(yao)素:
參(can)加PCR反(fan)應(ying)的物(wu)質主(zhu)要(yao)有(you)五(wu)種即引(yin)物、酶、dNTP、模(mo)板和Mg2+
引(yin)物:引(yin)物是PCR特異性(xing)反(fan)應(ying)的關(guan)鍵,PCR 產物(wu)的(de)特異(yi)性(xing)取決於(yu)引(yin)物與模(mo)板DNA互補(bu)的程(cheng)度(du)。理論上,只(zhi)要(yao)知道(dao)任(ren)何壹段模(mo)板DNA序(xu)列(lie), 就能(neng)按其設計(ji)互補(bu)的寡(gua)核苷(gan)酸鏈做引(yin)物,利(li)用(yong)PCR就可將模(mo)板DNA在(zai)體(ti)外大量(liang)擴(kuo)增(zeng)。設計(ji)引(yin)物應(ying)遵循以下(xia)原則(ze):
①引(yin)物長度(du): 5-30bp,常(chang)用(yong)為(wei)20bp左(zuo)右。
②引(yin)物擴增跨(kua)度(du): 以200-500bp為(wei)宜(yi),特(te)定條件(jian)下(xia)可擴(kuo)增長至(zhi)0kb的(de)片段。
③引(yin)物堿基:G+C含(han)量(liang)以40-60%為(wei)宜(yi),G+C太(tai)少(shao)擴增效果(guo)不(bu)佳,G+C過多易(yi)出(chu)現(xian)非(fei)特(te)異條帶(dai)。ATGC隨機分(fen)布(bu),避免5個(ge)以上的(de)嘌呤或嘧(mi)啶核苷(gan)酸的(de)成串(chuan)排(pai)列(lie)。
④避(bi)免引(yin)物內(nei)部(bu)出現(xian)二(er)級結(jie)構(gou),避免兩條引(yin)物間(jian)互補(bu),特別(bie)是3'端的互補(bu),否則(ze)會(hui)形成引(yin)物二聚體(ti),產生非(fei)特(te)異的擴增(zeng)條帶(dai)。
⑤引(yin)物3'端的堿基,特(te)別(bie)是末及倒數第(di)二個(ge)堿基,應(ying)嚴(yan)格要(yao)求配對,以避(bi)免因(yin)末端堿基不(bu)配(pei)對而導(dao)致PCR失(shi)敗。
⑥引(yin)物中有(you)或能加上合(he)適(shi)的酶切位(wei)點, 被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)序列有(you)適(shi)宜(yi)的(de)酶切位(wei)點, 這(zhe)對酶切分(fen)析(xi)或分(fen)子(zi)克(ke)隆很(hen)有(you)好(hao)處。
⑦引(yin)物的特異性(xing):引(yin)物應(ying)與核酸(suan)序列(lie)數據(ju)庫的其它序(xu)列(lie)無明顯(xian)同源(yuan)性(xing)。
引(yin)物量(liang):每(mei)條引(yin)物的濃度(du)0.~umol或0~00pmol,以低(di)引(yin)物量(liang)產生所需要(yao)的結(jie)果(guo)為(wei)好,引(yin)物濃度(du)偏(pian)高(gao)會引(yin)起錯(cuo)配(pei)和非(fei)特(te)異性(xing)擴(kuo)增(zeng),且(qie)可增(zeng)加引(yin)物之間(jian)形成二(er)聚體(ti)的(de)機會。
2,9-二(er)基-4,7-聯(lian)苯(ben)-,0-鄰二氮雜菲(fei) 4733-39-5 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
3,6-二(er)羥基鄰苯二甲(jia) 4733-50-0 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
2-溴丁(ding)乙(yi)酯(zhi) 533-68-6 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
(S)--溴-2-基丁(ding)烷 534-00-9 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
,2-戊二(er)醇 5343-92-0 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
4-溴-3-硝苯(ben)甲(jia)醚(mi) 5344-78-5 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
3-氯(lv)-4-甲(jia)氧(yang)苯胺(an) 5345-54-0 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
0-溴--癸(gui)醇 53463-68-6 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
4-(溴乙(yi)酰基)啶(ding)鹽(yan) 5349-7-7 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
2-氟(fu)-5-三氟(fu)基胺(an) 535-52-4 20次 Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
(S)-3-羥(qiang)基丁(ding)酯(zhi) 53562-86-0 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
2-氯(lv)噻(sai)吩-5-胺(an) 53595-66-7 48 t Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
4-基酰(xian)芐(bian)溴 53606-06-7 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
alpha-溴代(dai)-4-氯(lv)苯(ben)乙(yi)酮 536-38-9 50 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
2-溴-3-基甲(jia) 53663-39- 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常(chang)溫保(bao)存
禽傳染(ran)性(xing)支(zhi)氣管炎病(bing)毒(du)(AIBV)核酸(suan)檢測試劑盒(he)品牌(pai)M-肉湯 規(gui)格: 0.2ml Rat Lactate Dehydrogenase,LDH
煌(huang)綠(lv)黃(huang)嘧(mi)啶瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.2ml Rat Lactoferrin,LTF/LF
BGS瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.ml Rat mammary carcinoma Marker-CA53
XLD培(pei)養(yang)基 規(gui)格: 0.ml Rat Tri-iodothyronine,T3
去氧(yang)膽(dan)鹽(yan)枸(gou)櫞(yuan)鹽(yan)瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.ml Rat pigment epithelium-derived factor,PEDF
去氧(yang)膽(dan)鹽(yan)枸(gou)櫞(yuan)鹽(yan)乳糖(tang)蔗糖(tang)瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.ml Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78
V-J瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.2ml Rat Nerve growth factor,NGF
NAC瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基 規(gui)格: 0.2ml Rat neuropeptide Y,NP-Y
馬(ma)鈴薯葡(pu)萄(tao)糖(tang)瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.ml Rat Neuron-specific enolase,NSE
(紅(hong))亮綠瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基 規(gui)格: 0.ml Rat Neurotrophin 3,NT-3
梭(suo)菌(jun)增菌(jun)培養(yang)基 規(gui)格: 0.ml Rat Neurotrophin 4,NT-4
哥(ge)倫(lun)比亞(ya)瓊(qiong)脂(zhi)培養(yang)基 規(gui)格: 0.2ml Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI
哥(ge)倫(lun)比亞(ya)MUG培養(yang)基 規(gui)格: 0.ml Rat adrenergic alpha-A receptor,ADRAA
哥(ge)倫(lun)比亞(ya)血瓊(qiong)脂(zhi)基礎 規(gui)格: 0.ml Rat adrenomedullin,ADM
226E瓊(qiong)脂(zhi) 規格: 0.2ml Rat Renin
企業(ye)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海(hai)谷(gu)研實(shi)業(ye)有(you)限(xian)公(gong)司(si)
3004918891發送(song)信件(jian)產品分(fen)類(lei)
CLASSIFICATION相(xiang)關(guan)文(wen)章(zhang)
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