【概(gai)要(yao)描(miao)述】PCR試(shi)劑盒是(shi)即(ji)用型(xing)PCR試劑盒的(de)改(gai)良產(chan)品(pin)， 含(han)有(you)Taq DNA 聚(ju)合酶(mei)、dNTPs、MgCl2、反(fan)應(ying)緩沖液、PCR 增(zeng)強劑、上(shang)樣(yang)染(ran)料等(deng)所有(you)PCR 所需(xu)要(yao)的(de)成分，用戶(hu)只(zhi)需(xu)加入(ru)模板(ban)和引物即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)PCR 反(fan)應(ying)，具有(you)廣泛(fan)的(de)用途。

產品(pin)名(ming)稱：PCR試劑盒
規(gui)格：48T/盒
運(yun)輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光(guang)、快(kuai)遞免費(fei)送貨(huo)上(shang)門(men)。
用途：生化實驗，合成實驗等(deng)試驗。
運(yun)輸及(ji)保存:低溫(wen)運(yun)輸,-20℃保存, 保存期限(xian)為(wei) 6 個月(yue)。
自備試劑：樣(yang)品(pin) RNA。?
性能指(zhi)標(biao)：點(dian)擊了解更(geng)多熒光(guang)-PCR法(fa)。
.試(shi)劑盒檢(jian)測(ce)特(te)異(yi)性為00%
2. 檢(jian)測(ce)試劑盒重(zhong)現性為00%
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有(you)效期(qi)為6個月(yue)

?

使用方法(fa):
壹(yi)、樣(yang)品(pin) RNA 的(de)制(zhi)備
、用自選方(fang)法(fa)抽提病毒樣(yang)品(pin) RNA。註(zhu)意：可(ke)以(yi)選用本(ben)公(gong)司(si)的(de)壹(yi)管(guan)式(shi)病(bing)毒(du) RNAout
2、或柱(zhu)式(shi)病(bing)毒 RNAout。
二(er)：RT（逆(ni)轉錄）反(fan)應(ying)合成 cDNA
. 按下表配(pei)制(zhi) RT 反(fan)應(ying)體(ti)系（20 μL 體(ti)系）
2. 70℃保溫(wen) 5 分(fen)鐘變性模板(ban)後(hou)立(li)即(ji)冰(bing)浴(yu)。
3. 嚴格按順序(xu)加入(ru) 6μL RT Buffer（含 dNTP）和(he) 2μL MMLV 逆(ni)轉錄酶（含 RI），
反(fan)應(ying)終(zhong)體(ti)積為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫(wen) 60 分(fen)鐘。此步為 RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保溫(wen) 0 分(fen)鐘以(yi)終(zhong)止反(fan)應(ying)，然後(hou)放(fang)置(zhi)在(zai)冰(bing)上(shang)待(dai)用。合成的 cDNA 可(ke)以(yi)直(zhi)接作為(wei) PCR 模(mo)板使(shi)用，丌需(xu)要(yao)純(chun)化。
註意事(shi)項(xiang)：
①加入(ru)試劑的順(shun)序(xu)應(ying)*，以保證所有(you)反(fan)應(ying)板孔(kong)溫(wen)育(yu)的時(shi)間(jian)壹樣(yang)。
②使用幹(gan)凈的(de)塑(su)料容(rong)器配(pei)置(zhi)洗(xi)滌(di)液。
③按照雞(ji)血(xue)紅蛋白(HB)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)中標(biao)明(ming)的時(shi)間(jian)、加液的(de)量(liang)及(ji)順序進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)操作。
④底(di)物A應揮發(fa)，避免長(chang)時(shi)間(jian)打開蓋子。底(di)物B對(dui)光(guang)敏感，避免長(chang)時(shi)間(jian)暴(bao)露(lu)於(yu)光(guang)下(xia)。避免用手接觸，有(you)毒。實(shi)驗完(wan)成後(hou)應(ying)立(li)即(ji)讀(du)取(qu)OD值。
⑤洗(xi)滌(di)酶(mei)標(biao)板時(shi)應(ying)充分拍幹(gan)，不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入(ru)酶標(biao)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水。
⑥使(shi)用壹次(ci)性的吸(xi)頭以(yi)免交叉汙(wu)染(ran)，吸(xi)取終(zhong)止液和(he)底(di)物A、B液時(shi)，避免使(shi)用帶(dai)金(jin)屬部分的(de)加樣(yang)器 。
⑦實驗中(zhong)不(bu)用的板(ban)條(tiao)應立即(ji)放(fang)回(hui)包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲存，使用前(qian)恢復到室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀過(guo)後(hou)的(de)標(biao)準品(pin)應(ying)丟棄(qi)，不(bu)可(ke)保存。
⑨不(bu)用的其(qi)它(ta)試(shi)劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好。不(bu)同批號的(de)試(shi)劑不(bu)要(yao)混(hun)用。保質前(qian)使用。
反(fan)應(ying)五要(yao)素(su)：
參加PCR反(fan)應(ying)的物質主(zhu)要(yao)有(you)五種(zhong)即(ji)引(yin)物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是(shi)PCR特(te)異(yi)性反(fan)應(ying)的關鍵(jian)，PCR 產物的特(te)異(yi)性取決(jue)於(yu)引(yin)物與(yu)模(mo)板DNA互補的程(cheng)度。理(li)論(lun)上(shang)，只(zhi)要(yao)知(zhi)道任(ren)何(he)壹段模板DNA序(xu)列(lie)， 就(jiu)能(neng)按其設(she)計(ji)互補的寡核苷酸(suan)鏈做引(yin)物，利用PCR就可(ke)將(jiang)模(mo)板(ban)DNA在(zai)體(ti)外大量(liang)擴(kuo)增(zeng)。設(she)計(ji)引物應遵(zun)循以(yi)下原(yuan)則：
①引(yin)物長(chang)度： 5-30bp，常(chang)用為20bp左(zuo)右(you)。
②引(yin)物擴(kuo)增(zeng)跨度(du)： 以200-500bp為宜，特(te)定(ding)條(tiao)件下可(ke)擴(kuo)增(zeng)長(chang)至0kb的(de)片段。
③引物堿(jian)基：G+C含量(liang)以(yi)40-60%為(wei)宜，G+C太少(shao)擴(kuo)增(zeng)效果不(bu)佳，G+C過多易出(chu)現非特(te)異(yi)條(tiao)帶(dai)。ATGC隨(sui)機分布(bu)，避免5個以上(shang)的(de)嘌(piao)呤(ling)或嘧(mi)啶核苷酸(suan)的(de)成串排(pai)列。
④避免引(yin)物內部出(chu)現二(er)級結構(gou)，避免兩(liang)條(tiao)引物間互補，特(te)別是(shi)3'端的(de)互補，否(fou)則會(hui)形成引物二(er)聚(ju)體(ti)，產生(sheng)非特(te)異(yi)的(de)擴(kuo)增(zeng)條(tiao)帶(dai)。
⑤引(yin)物3'端的堿(jian)基，特(te)別是(shi)末及(ji)倒數(shu)第(di)二(er)個堿(jian)基，應嚴格要(yao)求(qiu)配(pei)對(dui)，以(yi)避免因(yin)末端堿(jian)基不(bu)配對(dui)而(er)導致PCR失敗(bai)。
⑥引(yin)物中有(you)或能(neng)加上(shang)合適(shi)的酶(mei)切位點(dian)， 被(bei)擴(kuo)增(zeng)的靶(ba)序列有(you)適(shi)宜的(de)酶切位點(dian)， 這(zhe)對(dui)酶(mei)切分析(xi)或分(fen)子克(ke)隆很(hen)有(you)好處(chu)。
⑦引物的特(te)異(yi)性：引物應與(yu)核酸(suan)序(xu)列(lie)數(shu)據(ju)庫的其(qi)它序(xu)列(lie)無明(ming)顯(xian)同源性。
引物量(liang)：每(mei)條(tiao)引物的濃(nong)度0.～umol或0～00pmol，以(yi)低引(yin)物量(liang)產(chan)生(sheng)所需(xu)要(yao)的(de)結果為好(hao)，引(yin)物濃(nong)度偏高(gao)會引起錯配和非特(te)異(yi)性擴(kuo)增(zeng)，且可(ke)增(zeng)加引物之(zhi)間(jian)形成二(er)聚(ju)體(ti)的機(ji)會。
?乙氧甲酰基亞乙基三苯(ben)基膦 577-37-3　0U　ATP Sulfurylase　-20℃保存

4-甲苯(ben)硼(peng) 395356　000U　E. coli DNA Ligase　-20℃保存

2-甲氧苯(ben)硼(peng) 395388　200U　T4 DNA Ligase　-20℃保存

4-甲氧苯(ben)硼(peng) 5720-07-0　000U　T5 DNA Ligase　-2℃保存

2,3,4,6-四(si)乙酰(xian)氧基-alpha-D-吡喃葡(pu)萄糖(tang)溴化物 572-09-8　000U　Taq DNA Ligase　-20℃保存

-叔丁氧羰(tang)基哌 57260-7-6　2500U　9°N  DNA  Ligase　-20℃保存

3-氯-2-啶甲 57266-69-0　000U　T4 RNA Ligase　-20℃保存

2-溴蒽(en)醌(kun) 572-83-8　000U　T4 RNA Ligase 　-20℃保存

N-BOC-GAMMA-氨(an)基丁 57294-38-9　50U　T4 RNA Ligase 2　-20℃保存

9-溴菲(fei) 573-7-　2000U　T4 RNA Ligase 2(truncated)　-20℃保存

戊*鈉(na) 57-33-0　2000U　T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)　-20℃保存

2-氨(an)基-4-氯-6-甲氧基嘧啶 5734-64-5　200U　ATP Dependent DNase　-20℃保存

5-氯-2-氟苯(ben) 5738-34-7　00mg　DNase I Powder　4℃或-20℃保存

2-溴-5-氟(fu)苯(ben) 5738-39-2　.5mL　DNase I Solution　4℃（短(duan)期(qi)）或-20℃（*）保存

PCR試劑盒肉(rou)浸(jin)液瓊脂(zhi)  規(gui)格: 0.ml  Rat Insulin Receptor β,ISR-β

Hugh-Leifson培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.ml  Rat Insulin-like growth factor ,IGF-

西蒙氏檸(ning)檬(meng)鹽培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2

克氏(shi)檸(ning)檬鹽培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein ,IGFBP-

亞鐵(tie)瓊脂(zhi)  規(gui)格: 0.5ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2

乳糖(tang)膽鹽發(fa)酵(jiao)管(guan)培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3

乳糖(tang)發(fa)酵(jiao)管(guan)培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4

乳糖(tang)復(fu)發(fa)酵(jiao)管(guan)培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.2ml  Rat Proinsulin,PI

煌綠(lv)瓊脂(zhi)  規(gui)格: 0.ml  Rat insulin autoantibodies,IAA

煌綠(lv)增(zeng)菌液  規(gui)格: 0.ml  Rat islet cell antibody,ICA  

GN增(zeng)菌液  規(gui)格: 0.ml  Rat Amylin

*培(pei)養(yang)基  規(gui)格: 0.ml  Rat ghcagons-like pepfide ,GLP-

WS瓊脂(zhi)  規(gui)格: 0.ml  Rat alcohol dehydrogenase,ADH

5%純(chun)度乳(ru)糖(tang)發(fa)酵(jiao)管(guan)  規(gui)格: 0.2ml  Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH

Honda氏產(chan)毒(du)肉湯基礎(chu)  規(gui)格: 0.ml  Rat acetylcholine,ACH