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產(chan)品名(ming)稱(cheng):辛諾柏(bai)病毒(du)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)
英(ying)文名(ming)稱(cheng):Sin Nombre Virus(SNV)RTPCR
規格:詳見(jian)說(shuo)明書
類別(bie):PCR檢測(ce)試(shi)劑盒(he)
運(yun)輸:低(di)溫、避(bi)光、快(kuai)遞免費(fei)送(song)貨上(shang)門。
用(yong)途(tu):生化實驗(yan),合(he)成(cheng)實驗(yan)等試驗(yan)。
運(yun)輸及(ji)保存:低溫運(yun)輸,-20℃保(bao)存, 保存期限(xian)為 6 個(ge)月(yue)。
自(zi)備試劑:樣(yang)品(pin) RNA。
性(xing)能指(zhi)標(biao):點(dian)擊了(le)解(jie)更(geng)多PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)。
.試(shi)劑盒(he)檢(jian)測(ce)特異(yi)性(xing)為00%
2. 檢測(ce)試(shi)劑盒(he)重(zhong)現性(xing)為00%
3. 靈敏(min)度可(ke)達到03/ml
4. 有(you)效(xiao)期為(wei)6個月(yue)
使(shi)用(yong)方(fang)法:
壹、樣(yang)品(pin) RNA 的(de)制(zhi)備(bei)
、用(yong)自(zi)選方法抽提(ti)病(bing)毒樣(yang)品(pin) RNA。註意(yi):可(ke)以選用(yong)本公(gong)司的(de)壹管(guan)式(shi)病毒(du) RNAout
2、或柱(zhu)式病毒 RNAout。
二(er):RT(逆轉(zhuan)錄)反應合(he)成(cheng) cDNA
. 按下表(biao)配(pei)制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保(bao)溫 5 分鐘變(bian)性(xing)模板(ban)後立(li)即冰(bing)浴(yu)。
3. 嚴(yan)格按(an)順(shun)序(xu)加(jia)入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuan)錄酶(含 RI),
反應終體積為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然後放置(zhi)在冰(bing)上(shang)待用(yong)。合(he)成(cheng)的(de) cDNA 可(ke)以直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei) PCR 模板(ban)使(shi)用(yong),丌(ji)需要(yao)純(chun)化(hua)。
註意(yi)事(shi)項(xiang):
①加(jia)入試劑的(de)順(shun)序(xu)應(ying)*,以保證所有(you)反應板孔溫育(yu)的(de)時間壹樣(yang)。
②使(shi)用(yong)幹(gan)凈(jing)的(de)塑(su)料(liao)容(rong)器配置(zhi)洗滌(di)液。
③按(an)照(zhao)雞血(xue)紅蛋白(HB)ELISA檢測(ce)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書中標(biao)明的(de)時間、加(jia)液的(de)量(liang)及(ji)順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育(yu)操(cao)作(zuo)。
④底(di)物A應(ying)揮(hui)發,避免長(chang)時間打開蓋(gai)子。底(di)物B對光(guang)敏(min)感,避(bi)免長(chang)時間暴露(lu)於(yu)光(guang)下。避(bi)免用(yong)手(shou)接(jie)觸,有(you)毒。實(shi)驗(yan)完成(cheng)後應立(li)即讀(du)取OD值(zhi)。
⑤洗滌(di)酶標(biao)板時應充(chong)分拍幹(gan),不要(yao)將(jiang)吸水(shui)紙(zhi)直(zhi)接(jie)放入酶標(biao)反應孔中吸水(shui)。
⑥使(shi)用(yong)壹次(ci)性(xing)的(de)吸頭(tou)以免交(jiao)叉汙染(ran),吸取終(zhong)止液和底(di)物A、B液(ye)時,避免使(shi)用(yong)帶(dai)金屬(shu)部分的(de)加(jia)樣(yang)器 。
⑦實驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條應立(li)即放(fang)回(hui)包(bao)裝袋中,密封保(bao)存,以免變(bian)質(zhi)。
⑧試劑應(ying)按(an)標(biao)簽說(shuo)明書儲存,使(shi)用(yong)前(qian)恢復(fu)到室(shi)溫。稀(xi)稀過(guo)後的(de)標(biao)準(zhun)品應(ying)丟棄(qi),不(bu)可(ke)保存。
⑨不用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試劑應(ying)包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋(gai)好(hao)。不(bu)同批號的(de)試(shi)劑不(bu)要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質前使(shi)用(yong)。
反應五(wu)要(yao)素:
參(can)加PCR反應的(de)物質(zhi)主要(yao)有(you)五(wu)種(zhong)即(ji)引物、酶(mei)、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引物:引物是PCR特異(yi)性(xing)反應的(de)關鍵,PCR 產(chan)物的(de)特異(yi)性(xing)取決(jue)於(yu)引物與(yu)模板(ban)DNA互(hu)補的(de)程(cheng)度。理論(lun)上,只(zhi)要知道(dao)任何壹段模板(ban)DNA序(xu)列, 就能(neng)按其(qi)設計互(hu)補的(de)寡(gua)核苷(gan)酸(suan)鏈做(zuo)引物,利(li)用(yong)PCR就可(ke)將(jiang)模板(ban)DNA在(zai)體外(wai)大(da)量(liang)擴(kuo)增(zeng)。設計引物應(ying)遵循以下原(yuan)則:
①引物長(chang)度: 5-30bp,常用(yong)為(wei)20bp左右。
②引物擴(kuo)增(zeng)跨度: 以200-500bp為宜,特定(ding)條件下可(ke)擴增(zeng)長(chang)至(zhi)0kb的(de)片(pian)段。
③引物堿(jian)基(ji):G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增(zeng)效(xiao)果(guo)不(bu)佳(jia),G+C過(guo)多易出現非特異(yi)條帶。ATGC隨(sui)機分布,避(bi)免5個(ge)以上的(de)嘌呤(ling)或(huo)嘧啶核苷(gan)酸(suan)的(de)成(cheng)串(chuan)排列。
④避免引物內部出現二(er)級結構(gou),避(bi)免兩(liang)條引物間(jian)互(hu)補,特別(bie)是3'端的(de)互(hu)補,否(fou)則會形成(cheng)引物二(er)聚(ju)體,產生非特異(yi)的(de)擴(kuo)增(zeng)條帶。
⑤引物3'端的(de)堿(jian)基(ji),特別(bie)是末及倒(dao)數第二(er)個堿基(ji),應嚴(yan)格要(yao)求(qiu)配(pei)對,以避免因(yin)末端堿(jian)基(ji)不配(pei)對而導致(zhi)PCR失(shi)敗(bai)。
⑥引物中有(you)或能(neng)加上(shang)合(he)適的(de)酶(mei)切(qie)位點(dian), 被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)序(xu)列有(you)適宜(yi)的(de)酶(mei)切(qie)位點(dian), 這(zhe)對酶(mei)切分析或(huo)分子克隆很(hen)有(you)好(hao)處(chu)。
⑦引物的(de)特異(yi)性(xing):引物應(ying)與(yu)核(he)酸(suan)序(xu)列數據庫(ku)的(de)其(qi)它(ta)序(xu)列無明顯同源性(xing)。
引物量(liang):每(mei)條引物的(de)濃(nong)度0.~umol或0~00pmol,以低引物量(liang)產(chan)生所需要(yao)的(de)結(jie)果(guo)為(wei)好(hao),引物濃(nong)度偏高(gao)會引起錯配和非特異(yi)性(xing)擴增(zeng),且可(ke)增(zeng)加引物之(zhi)間形成(cheng)二(er)聚(ju)體的(de)機(ji)會(hui)。
pMA09-H英(ying)文名(ming)(EN):-Bromotetradecane,97%CAS No.:2-7-0規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMA09-J英(ying)文名(ming)(EN):2-Chloro-2-methylpropane,≥99.5%CAS No.:507-20-0規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMA5英(ying)文名(ming)(EN):-Chlorodecane,98%CAS No.:002-69-3規(gui)格(SP):50ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMA5MCS英(ying)文名(ming)(EN):-Iodobutane,99%CAS No.:542-69-8規(gui)格(SP):00G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMA-27s-英(ying)文名(ming)(EN):-Iodopentane,98%CAS No.:628-7-規(gui)格(SP):25G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMA-27s-2英(ying)文名(ming)(EN):Isoamyl iodide,97%CAS No.:54-28-6規(gui)格(SP):5G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAD英(ying)文名(ming)(EN):-Iodopropane,99%CAS No.:07-08-4規(gui)格(SP):00G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAl-c2E英(ying)文名(ming)(EN):Dimethylchlorosilane,99%CAS No.:066-35-9規(gui)格(SP):0ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL- c2x英(ying)文名(ming)(EN):Chlorotrimethylsilane,≥99%CAS No.:75-77-4規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL-c2G英(ying)文名(ming)(EN):Methyltrichlorosilane,99%CAS No.:75-79-6規(gui)格(SP):00G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL- c4x英(ying)文名(ming)(EN):Triethoxymethylsilane,99%CAS No.:203-67-6規(gui)格(SP):50G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL-c5X英(ying)文名(ming)(EN):Diethoxydimethylsilane,97%CAS No.:78-62-6規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMal-p2E英(ying)文名(ming)(EN):Chlorotriphenylsilane,96%CAS No.:76-86-8規(gui)格(SP):5G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAl-p2G英(ying)文名(ming)(EN):Tetramethoxysilane,≥99.0%CAS No.:68-84-5規(gui)格(SP):25G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL- p2x英(ying)文名(ming)(EN):tert-Butyldimethylsilyl chloride ,97%CAS No.:862-48-6規(gui)格(SP):25G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL-p4x英(ying)文名(ming)(EN):Triethoxyvinylsilane,97%CAS No.:78-08-0規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL-p5E英(ying)文名(ming)(EN):Pyrrolidine,≥99.5%CAS No.:23-75-規(gui)格(SP):00ML類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
pMAL-p5X英(ying)文名(ming)(EN):,,-Tris(hydroxymethyl)propane,≥98.0%CAS No.:77-99-6規(gui)格(SP):00G類別(bie)(Key):通用(yong)試(shi)劑
辛(xin)諾柏(bai)病毒(du)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)精(jing)油標(biao)準(zhun)品,Essential Oil0×LGibco
dyes染(ran)料(liao)標(biao)準(zhun)品0×LGibco
偶氮染(ran)料(liao)代謝物標(biao)準(zhun)品0×LGibco
氯(lv)乙烯(xi)標(biao)準(zhun)品500mlGibco
4,4'-聯(lian)醌和4,4'--二(er)羥聯等標(biao)準(zhun)品0mlGibco
企業(ye)信息(xi)
ENTERPRISE INFORMATION上海谷(gu)研實(shi)業(ye)有(you)限公(gong)司
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