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埃可(ke)病毒(du)PCR檢測試劑盒(he)供應(ying)商使(shi)用(yong)方(fang)法:
壹(yi)、樣(yang)品 RNA 的(de)制(zhi)備(bei)
、用(yong)自(zi)選方(fang)法抽提(ti)病(bing)毒(du)樣(yang)品 RNA。註(zhu)意:可(ke)以選用(yong)本(ben)公(gong)司的(de)壹(yi)管(guan)式(shi)病(bing)毒(du) RNAout
2、或(huo)柱式(shi)病(bing)毒(du) RNAout。
二:RT(逆轉錄(lu))反(fan)應(ying)合(he)成 cDNA
. 按(an)下表配(pei)制(zhi) RT 反(fan)應(ying)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保(bao)溫 5 分(fen)鐘變性(xing)模板(ban)後(hou)立即(ji)冰(bing)浴。
3. 嚴(yan)格(ge)按(an)順序(xu)加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄(lu)酶(mei)(含 RI),
反應(ying)終(zhong)體積為(wei) 20μL。
4. 42℃保(bao)溫(wen) 60 分鐘。此(ci)步(bu)為(wei) RT 反(fan)應(ying)。
5. 70℃保溫(wen) 0 分鐘以終(zhong)止反(fan)應(ying),然(ran)後(hou)放(fang)置在冰(bing)上(shang)待用(yong)。合(he)成的(de) cDNA 可(ke)以直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei) PCR 模板(ban)使(shi)用(yong),丌(ji)需要純(chun)化。
產品(pin)名(ming)稱(cheng):埃可(ke)病毒(du)PCR檢測試劑盒(he)供應(ying)商
英(ying)文名(ming)稱(cheng):ECHO VirusRTPCR
規格(ge):詳(xiang)見說(shuo)明(ming)書
類別:PCR檢測試劑盒(he)
運輸:低(di)溫(wen)、避光、快遞免(mian)費送貨上(shang)門。
用(yong)途(tu):生化實(shi)驗(yan),合(he)成實(shi)驗(yan)等(deng)試驗(yan)。
運輸及(ji)保(bao)存:低溫(wen)運輸,-20℃保(bao)存(cun), 保存期(qi)限(xian)為(wei) 6 個月。
自(zi)備試劑:樣(yang)品 RNA。

性(xing)能(neng)指標:點(dian)擊了(le)解(jie)更多PCR檢測試劑盒(he)。
.埃(ai)可(ke)病毒(du)PCR檢測試劑盒(he)供應(ying)商試劑盒(he)檢測特(te)異性(xing)為(wei)00%
2. 檢測試劑盒(he)重(zhong)現(xian)性(xing)為(wei)00%
3. 靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)到(dao)03/ml
4. 有效(xiao)期(qi)為(wei)6個月
註(zhu)意事項:
①加入試劑的(de)順序(xu)應(ying)*,以保(bao)證所(suo)有反(fan)應(ying)板(ban)孔(kong)溫(wen)育的(de)時間(jian)壹(yi)樣(yang)。
②使(shi)用(yong)幹(gan)凈的(de)塑料(liao)容器(qi)配置洗滌(di)液(ye)。
③按照雞(ji)血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒(he)說(shuo)明(ming)書中標明(ming)的(de)時間(jian)、加(jia)液(ye)的(de)量及(ji)順序(xu)進行(xing)溫育操(cao)作(zuo)。
④底物(wu)A應(ying)揮發(fa),避免(mian)長(chang)時間打(da)開蓋(gai)子。底物(wu)B對光敏感(gan),避(bi)免(mian)長(chang)時間暴(bao)露(lu)於(yu)光下。避免(mian)用(yong)手(shou)接觸,有毒(du)。實(shi)驗(yan)完(wan)成後(hou)應(ying)立即(ji)讀取(qu)OD值(zhi)。
⑤洗滌(di)酶(mei)標板(ban)時(shi)應(ying)充(chong)分拍(pai)幹(gan),不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水紙(zhi)直接放(fang)入酶(mei)標反(fan)應(ying)孔中(zhong)吸(xi)水。
⑥使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)以免(mian)交叉(cha)汙染,吸(xi)取(qu)終(zhong)止液(ye)和底物(wu)A、B液(ye)時,避免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金屬(shu)部(bu)分的(de)加樣(yang)器 。
⑦實(shi)驗(yan)中不用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立即(ji)放(fang)回包(bao)裝(zhuang)袋中(zhong),密(mi)封保(bao)存(cun),以免(mian)變質(zhi)。
⑧試劑應(ying)按標簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢復到(dao)室溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的(de)標準(zhun)品(pin)應(ying)丟(diu)棄,不可(ke)保存(cun)。
⑨不用(yong)的(de)其它(ta)試劑應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好(hao)。不同(tong)批號(hao)的(de)試劑不要混用(yong)。保(bao)質前使(shi)用(yong)。
反(fan)應(ying)五要素:
埃可(ke)病毒(du)PCR檢測試劑盒(he)供應(ying)商參(can)加PCR反(fan)應(ying)的(de)物質(zhi)主要(yao)有五種(zhong)即(ji)引物、酶(mei)、dNTP、模板(ban)和Mg2+
引物:引物是PCR特(te)異性(xing)反應(ying)的(de)關鍵(jian),PCR 產(chan)物的(de)特(te)異性(xing)取(qu)決於(yu)引物與模板(ban)DNA互補(bu)的(de)程度(du)。理(li)論上,只(zhi)要知道任何(he)壹(yi)段模板(ban)DNA序(xu)列, 就(jiu)能(neng)按其(qi)設計互補(bu)的(de)寡核(he)苷酸鏈做引物,利用(yong)PCR就(jiu)可(ke)將(jiang)模板(ban)DNA在體外大(da)量擴(kuo)增(zeng)。設(she)計引物應(ying)遵循以下(xia)原則(ze):
①引物長(chang)度: 5-30bp,常用(yong)為(wei)20bp左(zuo)右(you)。
②引物擴增跨(kua)度: 以200-500bp為(wei)宜,特(te)定(ding)條(tiao)件下可(ke)擴增(zeng)長(chang)至0kb的(de)片(pian)段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為(wei)宜,G+C太少擴增效果不佳(jia),G+C過多易出(chu)現(xian)非特(te)異條(tiao)帶(dai)。ATGC隨機分(fen)布(bu),避(bi)免(mian)5個以上(shang)的(de)嘌(piao)呤或(huo)嘧(mi)啶核(he)苷酸的(de)成串(chuan)排列(lie)。
④避(bi)免(mian)引物內(nei)部(bu)出(chu)現(xian)二級結構(gou),避(bi)免(mian)兩(liang)條(tiao)引物間互補(bu),特(te)別是(shi)3'端(duan)的(de)互補(bu),否則(ze)會形成引物二聚體,產生非(fei)特(te)異的(de)擴增(zeng)條(tiao)帶(dai)。
⑤引物3'端的(de)堿基,特(te)別是(shi)末(mo)及(ji)倒(dao)數(shu)第二個堿基,應(ying)嚴格(ge)要(yao)求(qiu)配(pei)對,以避(bi)免(mian)因末(mo)端堿基不(bu)配(pei)對而導(dao)致PCR失敗。
⑥引物中有或(huo)能(neng)加上(shang)合(he)適(shi)的(de)酶(mei)切(qie)位點(dian), 被擴(kuo)增(zeng)的(de)靶序(xu)列有適(shi)宜的(de)酶(mei)切(qie)位點(dian), 這對酶(mei)切(qie)分(fen)析(xi)或分(fen)子克隆(long)很(hen)有好(hao)處(chu)。
⑦引物的(de)特(te)異性(xing):引物應(ying)與核(he)酸序(xu)列數(shu)據庫(ku)的(de)其它(ta)序(xu)列無(wu)明(ming)顯同(tong)源(yuan)性(xing)。
引物量:每條(tiao)引物的(de)濃度(du)0.~umol或(huo)0~00pmol,以低(di)引物量產生所(suo)需要的(de)結果為(wei)好(hao),引物濃度偏高會引起(qi)錯配(pei)和非(fei)特(te)異性(xing)擴增,且(qie)可(ke)增加(jia)引物之間形(xing)成二聚體的(de)機會。
相關(guan)物質(zhi)B標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
相關(guan)物(wu)質(zhi)A標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:800-54-5
苯(ben)氧(yang)基乙(yi)醇標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:22-99-6
苯(ben)芴(wu)醇相關(guan)物質A標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
苯(ben)妥英(ying)相(xiang)關物(wu)質(zhi)B標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:6802-95-5
苯(ben)妥英(ying)標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:57-4-0
苯(ben)托沙(sha)敏相(xiang)關物質A標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
苯(ben)那(na)普(pu)利(li)相關化合(he)物G標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:0329-58-4
苯(ben)那(na)普(pu)利(li)相關化合(he)物E標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
苯(ben)硫(liu)咪唑(zuo)相關(guan)物質(zhi)B標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:
苯(ben)硫(liu)咪唑(zuo)相關(guan)物質(zhi)A標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:0605-2-7
苯(ben)基苯(ben)並(bing)咪唑(zuo)磺酸標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:27503-8-7
苯(ben)環(huan)丙(bing)胺(an)相關(guan)物(wu)質B標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:5586-89-0
苯(ben)並(bing)噻(sai)二相關(guan)物(wu)質A標準(zhun)品(pin) 英(ying)文名(ming)稱(cheng): CAS:2-30-2
埃可(ke)病毒(du)PCR檢測試劑盒(he)供應(ying)商電轉印(yin)DNA南(nan)方(fang)雜(za)交試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
DNA狹(xia)縫(feng)雜(za)交(SLOT BLOT)試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
寡(gua)核(he)苷酸探(tan)針同(tong)位素法DNA南方(fang)雜(za)交*試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
寡(gua)核(he)苷酸探(tan)針非同(tong)位素HRP化學(xue)發(fa)光法DNA南方(fang)雜(za)交*試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
寡(gua)核(he)苷酸探(tan)針非同(tong)位素AP化學(xue)發(fa)光法DNA南方(fang)雜(za)交*試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
寡(gua)核(he)苷酸探(tan)針非同(tong)位素HRP-DAB顯色法DNA南方(fang)雜(za)交*試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
寡(gua)核(he)苷酸探(tan)針非同(tong)位素AP-BCIP/NBT法DNA南方(fang)雜(za)交*試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
S核(he)酶(mei)保護(hu)法檢測試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
同(tong)位素法DNA斑(ban)點(dian)雜(za)交試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
非(fei)同(tong)位素HRP化學(xue)發(fa)光法DNA斑(ban)點(dian)雜(za)交試劑盒(he) 進口/國產 規(gui)格(ge):5次(ci)
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