【概(gai)要(yao)描(miao)述】羊(yang)抗牛(niu)IgG免疫血清抗體(ti),抗體(ti)種類(lei),多種試劑現(xian)貨(huo)供應(ying)!

羊(yang)抗牛(niu)IgG免疫血清抗體(ti)*,羊(yang)抗牛(niu)IgG免疫血清抗體(ti)用於免(mian)疫組化(hua)實驗(yan)，WB實驗(yan)，相(xiang)應(ying)的(de)標記抗體(ti)有HRP標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)，FITC標記，BIO等(deng)。

【貯存條件(jian)】： 貯(zhu)存(cun)於(yu)-20℃. 本(ben)品應(ying)在(zai)低溫(wen)下保(bao)存，長時(shi)間(jian)在(zai)暴露(lu)在(zai)空氣(qi)中，含(han)量會有所(suo)降(jiang)低。

規格：0.5ml

材(cai)料(liao)和方法

　　. 材(cai)料(liao) 人成(cheng)骨肉瘤(liu)MG63細胞(bao)為(wei)本實驗(yan)室保(bao)存。重(zhong)組(zu)質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由(you)王(wang)巖教授惠贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司(si))。高(gao)糖(tang)DMEM培(pei)養基(ji)(美(mei)國(guo)Gibco 公(gong)司(si))，胎(tai)牛(niu)血清(qing)(Hyclone公(gong)司(si))，和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司(si))。A2387，KN93，CaM，重(zhong)組(zu)Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗(kang)體(ti)：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技(ji)有限(xian)公(gong)司(si))。

　　.2 蛋白印(yin)跡實驗(yan) MG63細胞(bao)鋪(pu)於(yu)35 mmol/L培養皿(min)中，待(dai)細胞(bao)密度(du)達(da)到(dao)60%～70%時(shi)，轉(zhuan)染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無(wu)血清培養基(ji)培(pei)養3 h，分別(bie)加(jia)入濃(nong)度(du)為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵(fu)育0 min後(hou)裂(lie)解細胞(bao)，離(li)心(xin)取上清(qing)加(jia)入凝膠(jiao)加樣緩(huan)沖液(ye),沸水浴上加熱(re)5 min，上樣、電泳、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)〔壹(yi)抗分別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體(ti)外激(ji)酶(mei)測定 MycSSHL(WT)及其(qi)突變(bian)體(ti)MycSSHL(2 SA)分別(bie)轉(zhuan)染至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采(cai)用免疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重(zhong)組(zu)活(huo)性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨或同時(shi)加(jia)入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於(yu) 20 μl 激(ji)酶(mei)反應(ying)緩(huan)沖液(ye)中，30℃反應(ying)40 min。反應(ying)產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜(mo)，應(ying)用放射(she)自(zi)顯影(ying)技(ji)術(shu)檢(jian)測32P 標記的SSHL水(shui)平(ping)。

　　.4 體(ti)外SSHL磷酸酶(mei)活(huo)性(xing)測定實驗(yan) MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染(ran)至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采(cai)用免疫共沈澱(dian)(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗(kang)cmyc抗(kang)體(ti)，對照組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨或同時(shi)加(jia)入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於(yu) 20 μl 反應(ying)緩(huan)沖液(ye)(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(ying)2 h。反應(ying)產(chan)物進(jin)行SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)(壹(yi)抗分別(bie)為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體(ti))、ECL顯色(se)。

本公(gong)司(si)更(geng)多(duo)產(chan)品優惠:

大鼠5脂(zhi)加(jia)氧(yang)酶(mei)5-LO/LOX抗體(ti)        FAS 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb        鈣激(ji)活(huo)的(de)2抗體(ti)
大鼠7羥皮質(zhi)類(lei)固醇7-OHCS抗體(ti)       FAS 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb       鈣調節蛋白-抗體(ti)
大鼠7羥孕(yun)酮7-OHP抗體(ti)       FAS-L 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb        鈣/鈣調素依賴(lai)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)2α抗體(ti)
大鼠7-酮類(lei)固醇7-KS抗體(ti)        磷酸化(hua)鈣(gai)/鈣(gai)調素依賴(lai)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)2α抗體(ti)
大鼠Ⅰ型膠(jiao)原Col Ⅰ抗(kang)體(ti)       Fas免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti)H        鈣/鈣調蛋白依賴(lai)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)IG抗體(ti) 
大鼠Ⅰ型膠(jiao)原C端(duan)肽CTX-Ⅰ抗(kang)體(ti)        FGF2 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb        鈣/鈣調素依賴(lai)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)2b抗體(ti)
大鼠Ⅰ型膠(jiao)原N末(mo)端肽NTX抗(kang)體(ti)         Park7/DJ-/CAP抗體(ti)
大鼠Ⅰ型膠(jiao)原交(jiao)聯羧基(ji)末(mo)端肽ⅠCTP抗(kang)體(ti)         FGFR 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb       環化(hua)酶(mei)相關(guan)蛋白CAP-2抗體(ti)
大鼠Ⅰ型前膠(jiao)原C末(mo)端肽CⅠCP抗(kang)體(ti)       HSP70 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb        心肌肌鈣蛋(dan)白抗體(ti)
大鼠Ⅰ型前膠(jiao)原N端(duan)前肽PⅠNP抗(kang)體(ti)       JUN 免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti) H,M,R,Rb       碳(tan)酸酐酶(mei)抗體(ti)
大鼠Ⅰ型前膠(jiao)原羧基(ji)端(duan)肽PⅠCP抗(kang)體(ti)       Ki-67免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti)H        粘(zhan)附分子(zi)相(xiang)關(guan)蛋白a抗體(ti)
大鼠25羥基(ji)325OHD3/25 HVD3抗(kang)體(ti)        LRP免疫組化(hua)檢(jian)測抗體(ti)H        碳(tan)酸酐酶(mei)2抗體(ti)