【概(gai)要(yao)描(miao)述(shu)】羊(yang)抗(kang)雞IgG免疫血清(qing)抗(kang)體,抗(kang)體種類(lei),多種試劑(ji)現貨(huo)供應!

羊(yang)抗(kang)雞IgG免(mian)疫血清(qing)抗(kang)體*,羊(yang)抗(kang)雞IgG免(mian)疫血清(qing)抗(kang)體用(yong)於免(mian)疫組(zu)化實驗，WB實驗，相應(ying)的(de)標(biao)記(ji)抗體有(you)HRP標(biao)記抗(kang)體，FITC標(biao)記(ji)，BIO等(deng)。

【貯存條(tiao)件(jian)】： 貯存於-20℃. 本(ben)品應(ying)在(zai)低(di)溫(wen)下保存，長(chang)時(shi)間(jian)在暴露在(zai)空(kong)氣(qi)中，含量(liang)會(hui)有(you)所降(jiang)低(di)。

規格(ge)：0.5ml

材料和方(fang)法(fa)

　　. 材料 人成骨肉瘤(liu)MG63細胞(bao)為(wei)本(ben)實驗室(shi)保存。重組質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及(ji)recombinant cofilinHis6由王(wang)巖教授(shou)惠贈。脂(zhi)質體 2000( Invitrogen公(gong)司)。高糖(tang)DMEM培養(yang)基(美國Gibco 公(gong)司)，胎(tai)牛血清(qing)(Hyclone公(gong)司)，*和(he)EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)。抗體：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)(邁晨(chen)科技(ji)有限(xian)公(gong)司)。

　　.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡(ji)實驗 MG63細胞(bao)鋪於35 mmol/L培(pei)養(yang)皿(min)中，待細(xi)胞(bao)密度達(da)到60%～70%時，轉染(ran)MycSSHL，48 h後(hou)換(huan)無血清(qing)培(pei)養(yang)基培養(yang)3 h，分別(bie)加入濃(nong)度為(wei)0.5，，2.5，5 μmol/L的(de)A2387孵育0 min後(hou)裂解細(xi)胞，離(li)心(xin)取上清(qing)加入凝(ning)膠(jiao)加樣緩(huan)沖(chong)液,沸水浴(yu)上加熱5 min，上樣、電泳、轉膜、雜(za)交(jiao)〔壹抗(kang)分別為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色(se)。

　　.3 體外(wai)激(ji)酶測(ce)定(ding) MycSSHL(WT)及(ji)其突(tu)變體MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉染(ran)至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)采用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方法(fa)及(ji)抗cmyc抗體，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗(kang)體。回(hui)收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活(huo)性CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加入抑制(zhi)劑KN93)以(yi)及(ji)00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液中，30℃反(fan)應(ying)40 min。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜，應(ying)用(yong)放射(she)自顯(xian)影(ying)技術(shu)檢測(ce)32P 標記(ji)的(de)SSHL水平(ping)。

　　.4 體外(wai)SSHL磷(lin)酸酶(mei)活(huo)性測(ce)定(ding)實驗 MycSSHL(WT)或(huo)MycSSHL (2 SA)轉染(ran)至MG63細胞(bao)，48 h後(hou)，采用(yong)免(mian)疫共沈(chen)澱(dian)(Protein Gagarose)試劑(ji)盒(he)的(de)方法(fa)及(ji)抗cmyc抗體，對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗(kang)體。回(hui)收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或(huo)同(tong)時(shi)加入抑制(zhi)劑KN93)，20 μg/ml CaM，以(yi)及(ji) 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反(fan)應(ying)2 h。反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳(yong)、轉膜、雜(za)交(jiao)(壹抗(kang)分別為(wei)Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯(xian)色(se)。

本(ben)公(gong)司更(geng)多產(chan)品優(you)惠(hui):

大(da)鼠26S蛋(dan)白(bai)酶體26S PSM抗(kang)體         MDR-免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體H        細(xi)胞(bao)雕(diao)亡敏(min)感(gan)性基因
大(da)鼠Ⅱ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅱ抗體       MMP2免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體H        天冬氨(an)酸-特(te)異(yi)性蛋白(bai)酶家(jia)族(zu)抗體
大(da)鼠Ⅲ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅲ抗體        MMP9免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體H        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶-0抗體
大(da)鼠Ⅲ型(xing)前膠(jiao)原氨(an)基端肽PⅢNT抗體        MRP免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體H        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-2抗體（大(da)、小鼠(shu)）
大(da)鼠Ⅲ型(xing)前膠(jiao)原肽PⅢNP抗體        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-2抗體(人)
大(da)鼠Ⅳ型(xing)膠(jiao)原Col Ⅳ抗體         NM23免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體H       半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-3抗體
大(da)鼠5核(he)苷酸酶(mei)5-NT抗(kang)體    028    P5 免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體 H,M,R        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-3抗體
大(da)鼠5羥色胺5-HT抗體    029    P6 免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體 H,M,R       半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-6抗體（C端）
大(da)鼠6酮(tong)前列腺素6-K-PG抗體    030    P2 免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體 H,M,R        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-6抗體(N端)
大(da)鼠6酮(tong)前列腺素Fa6-keto-PGFa抗體    03    P53 免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體 H        半(ban)胱(guang)胺酸蛋(dan)白(bai)酶蛋白(bai)-6抗體(N端)
大(da)鼠8羥基脫氧鳥(niao)苷8-OHdG抗(kang)體     032    P53 免(mian)疫組(zu)化檢(jian)測(ce)抗體 H,M,R        半(ban)蛋(dan)白(bai)酶8抗體