當(dang)前位(wei)置(zhi):首頁(ye) > 產品(pin)展(zhan)示(shi) > 蛋(dan)白/抗體(ti) > 免(mian)疫球蛋(dan)白抗體(ti) > 羊抗大(da)鼠(shu)IgG免(mian)疫血(xue)清抗體(ti)

羊抗大(da)鼠(shu)IgG免(mian)疫血(xue)清抗體(ti)*,羊抗大(da)鼠(shu)IgG免(mian)疫血(xue)清抗體(ti)用於免(mian)疫組化(hua)實(shi)驗,WB實(shi)驗,相(xiang)應的(de)標(biao)記(ji)抗體(ti)有HRP標(biao)記(ji)抗體(ti),FITC標(biao)記(ji),BIO等(deng)。
【貯(zhu)存(cun)條件】: 貯(zhu)存(cun)於-20℃. 本(ben)品應在(zai)低溫(wen)下保存(cun),長(chang)時(shi)間在(zai)暴露(lu)在(zai)空氣(qi)中,含量會有所(suo)降(jiang)低。
規格:0.5ml
材(cai)料(liao)和方法
. 材(cai)料(liao) 人成(cheng)骨肉(rou)瘤MG63細(xi)胞為(wei)本(ben)實(shi)驗室(shi)保存(cun)。重(zhong)組質(zhi)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈(zeng)。脂(zhi)質(zhi)體(ti) 2000( Invitrogen公(gong)司)。高糖(tang)DMEM培養基(ji)(美(mei)國Gibco 公(gong)司),胎牛(niu)血(xue)清(Hyclone公(gong)司),和EDTA(Sigma 公(gong)司)。A2387,KN93,CaM,重(zhong)組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain,Calbiochem)。抗體(ti):Myc (9E0;Roche),HA (3F0;Roche),Pcofilin,Cofilin(Santa Cruz), CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.),PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)(邁(mai)晨(chen)科技(ji)有限(xian)公司)。
.2 蛋(dan)白(bai)印(yin)跡實(shi)驗 MG63細(xi)胞鋪於35 mmol/L培養皿(min)中,待(dai)細(xi)胞密(mi)度達(da)到(dao)60%~70%時(shi),轉(zhuan)染MycSSHL,48 h後(hou)換(huan)無(wu)血(xue)清培養基(ji)培養3 h,分(fen)別(bie)加入(ru)濃(nong)度(du)為(wei)0.5,,2.5,5 μmol/L的A2387孵(fu)育(yu)0 min後(hou)裂(lie)解(jie)細(xi)胞,離(li)心取上清(qing)加入(ru)凝膠加樣緩(huan)沖液(ye),沸水(shui)浴上加熱(re)5 min,上樣、電泳(yong)、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)〔壹抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯(xian)色。
.3 體(ti)外激酶(mei)測定(ding) MycSSHL(WT)及其突變體(ti)MycSSHL(2 SA)分(fen)別(bie)轉(zhuan)染至MG63細胞,48 h後(hou)采用免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方法及(ji)抗cmyc抗體(ti),對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL,加入(ru)0.6 μg/ml重(zhong)組活性(xing)CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 於 20 μl 激(ji)酶(mei)反應緩(huan)沖液(ye)中,30℃反應40 min。反應產(chan)物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜(mo),應用放射(she)自顯(xian)影技(ji)術檢測32P 標記(ji)的(de)SSHL水(shui)平。
.4 體(ti)外SSHL磷酸(suan)酶(mei)活性(xing)測定實(shi)驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuan)染至MG63細胞,48 h後(hou),采用免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱(Protein Gagarose)試(shi)劑盒(he)的(de)方法及(ji)抗cmyc抗體(ti),對(dui)照(zhao)組為(wei)抗IgG抗體(ti)。回收MycSSHL,加入(ru)0.6 μg/ml CaMKⅡ(單(dan)獨(du)或同(tong)時(shi)加入(ru)抑(yi)制劑KN93),20 μg/ml CaM,以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 於 20 μl 反應緩(huan)沖液(ye)(50 mol/L HEPES,pH 7.4,0. mol/L CaCl2,0.5 mol/L EDTA,3 mol/L MgCl2,00 mmol/L NaCl, mol/L dithiothreitol,0.5 mg/ml BSA, μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產(chan)物(wu)進行(xing)SDSPAGE電(dian)泳、轉(zhuan)膜(mo)、雜交(jiao)(壹抗分(fen)別(bie)為(wei)Pcofilin,Cofilin, cmyc 抗體(ti))、ECL顯(xian)色。
本(ben)公司更(geng)多(duo)產品(pin)優(you)惠(hui):
大(da)鼠(shu)8異(yi)前列(lie)腺素(su)8-iso-PG抗體(ti) 033 p53免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti)H 白(bai)介(jie)素(su)-β轉(zhuan)化酶(mei)樣雕亡(wang)蛋(dan)白酶(mei)6抗體(ti)
大(da)鼠(shu)apelin 2AP2抗體(ti) 034 PCNA 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb 白(bai)介(jie)素(su)-β轉(zhuan)化酶(mei)樣雕亡(wang)蛋(dan)白酶(mei)6抗體(ti)
大(da)鼠(shu)Bcl-2相關(guan)X蛋白BAX抗體(ti) 035 PCNA免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti)H 細(xi)胞質(zhi)膜(mo)微(wei)囊蛋白(bai)-抗體(ti)
大(da)鼠(shu)BH3結(jie)構(gou)域雕(diao)亡誘導蛋(dan)白(bai)Bid抗體(ti) 036 P-Glycoprotein 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb α-連(lian)環(huan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)(α鏈(lian)接素(su))
大(da)鼠(shu)B細胞淋(lin)巴(ba)瘤因子2Bcl-2抗體(ti) 037 Ras p2 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb β-連(lian)環(huan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)(β鏈(lian)接素(su))
大(da)鼠(shu)B因子BF抗體(ti) 磷酸(suan)化(hua)β-連(lian)環(huan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)
大(da)鼠(shu)CD30分子CD30抗體(ti) 038 Rb p0 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb γ-連(lian)環(huan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)(γ-鏈(lian)接素(su))
大(da)鼠(shu)CD3分子CD3抗體(ti) 039 T3、T4、T8 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)B抗體(ti)
大(da)鼠(shu)CD44分子CD44抗體(ti) 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)E抗體(ti)
大(da)鼠(shu)CD8分子CD8抗體(ti) 040 omerase免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti)H 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)D抗體(ti)
大(da)鼠(shu)c-fos 抗體(ti) 04 TGFα 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)L抗體(ti)
大(da)鼠(shu)c-jun 抗體(ti) 042 TGFβ 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)G抗體(ti)
大(da)鼠(shu)c-Jun氨基末端激酶(mei)JNK抗體(ti) 043 TNFα 免(mian)疫組化(hua)檢測抗體(ti) H,M,R,Rb 組織(zhi)蛋白(bai)酶(mei)K抗體(ti)
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ENTERPRISE INFORMATION上海谷(gu)研(yan)實(shi)業有限(xian)公司
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