【概要(yao)描(miao)述(shu)】小(xiao)鼠(shu)三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)元(yuan)細(xi)胞(bao)公司(si)正在(zai)出(chu)售的產品(pin)：MUG-Chor1人骶(di)骨脊(ji)索瘤(liu)細(xi)胞(bao)HNE3鼻咽癌(ai)細(xi)胞(bao)HONE1鼻咽癌(ai)細(xi)胞(bao)CNE1鼻咽癌(ai)細(xi)胞(bao)CNE2鼻咽癌(ai)細(xi)胞(bao)CNE1-Lmpl轉lmp1基(ji)因(yin)鼻(bi)咽癌(ai)細(xi)胞(bao)SUNE-1SUNE-1 亞(ya)株9-4ESUNE-1低分(fen)化(hua)鼻咽癌(ai)細(xi)胞(bao)SUNE-1高成瘤F2-25-8轉基(ji)因(yin)鼻(bi)咽癌(ai)細(xi)胞(bao)系

小(xiao)鼠(shu)三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)元(yuan)分(fen)離自(zi)三叉(cha)神(shen)經(jing)組織(zhi)；三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)為(wei)最(zui)粗大(da)的混(hun)合性(xing)腦神(shen)經(jing)，含(han)壹般(ban)軀(qu)體感(gan)覺和特(te)殊(shu)內臟運(yun)動(dong)兩(liang)種(zhong)纖維。其特(te)殊(shu)內臟運(yun)動(dong)纖維起於(yu)腦橋中段的三叉(cha)神(shen)經(jing)運(yun)動(dong)核(he)，纖維組成三叉(cha)神(shen)經(jing)運(yun)動(dong)根(gen)，由腦橋基(ji)底部與(yu)腦橋臂(bi)交界(jie)處出腦，位於(yu)感(gan)覺根(gen)下內側(ce)，最(zui)後(hou)進入(ru)三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)第(di)3支(zhi)下頜神(shen)經(jing)中(zhong)，經(jing)卵(luan)圓孔出(chu)顱(lu)，隨下頜神(shen)經(jing)分(fen)支(zhi)分布於(yu)咀嚼肌(ji)等。運(yun)動(dong)根(gen)內還(hai)含(han)有三叉(cha)神(shen)經(jing)中(zhong)腦核(he)有關(guan)的纖維，主(zhu)要(yao)傳(chuan)導咀嚼(jiao)肌的本(ben)體感(gan)覺。三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)內(nei)以軀(qu)體感(gan)覺神(shen)經(jing)纖維為(wei)主(zhu)，這些纖維的細胞(bao)體位於(yu)三叉(cha)神(shen)經(jing)節(jie)（半月(yue)節(jie)）內，該(gai)神(shen)經(jing)節(jie)位於(yu)顱(lu)中窩顴(quan)骨巖部的前面(mian)三叉(cha)神(shen)經(jing)壓(ya)跡(ji)處，為硬腦膜形成的美克爾腔包(bao)裹(guo)。三叉(cha)神(shen)經(jing)節(jie)由假(jia)單(dan)極神(shen)經(jing)元(yuan)組成，其中(zhong)樞突(tu)集中構(gou)成了粗大(da)的三叉(cha)神(shen)經(jing)感(gan)覺根(gen)，由腦橋基(ji)底部與(yu)腦橋臂(bi)交界(jie)處入(ru)腦，止(zhi)於(yu)三叉(cha)神(shen)經(jing)諸(zhu)感(gan)覺核(he)，其中(zhong)傳(chuan)導痛(tong)溫覺(jiao)的纖維主(zhu)要(yao)終止(zhi)於(yu)三叉(cha)神(shen)經(jing)脊(ji)束(shu)核(he)；傳(chuan)導觸覺(jiao)的纖維主(zhu)要(yao)終止(zhi)於(yu)三叉(cha)神(shen)經(jing)腦橋核(he)。三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)節(jie)細胞(bao)的周(zhou)圍(wei)突(tu)組成三叉(cha)神(shen)經(jing)三(san)大(da)分支(zhi)，即第(di)1支(zhi)眼(yan)神(shen)經(jing)、第(di)2支(zhi)上(shang)頜(he)神(shen)經(jing)、第(di)3支(zhi)為下頜神(shen)經(jing)。從(cong)3大(da)分支(zhi)不斷(duan)分(fen)支(zhi)分布於(yu)面(mian)部皮(pi)膚(fu)、眼(yan)及(ji)眶(kuang)內、口腔、鼻腔、鼻(bi)旁(pang)竇的粘膜、牙、腦膜等，傳(chuan)導痛(tong)、溫、觸等(deng)多(duo)種感(gan)覺。
方(fang)法(fa)簡(jian)介：

公司(si)實驗(yan)室(shi)分(fen)離的小(xiao)鼠(shu)三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)元(yuan)采(cai)用(yong)yi蛋(dan)白(bai)酶(mei)消(xiao)化法(fa)結合(he)神(shen)經(jing)元(yuan)專用(yong)培(pei)養基(ji)培(pei)養、化學(xue)試(shi)劑(ji)抑制法(fa)篩選(xuan)制(zhi)備(bei)而來，細(xi)胞(bao)總量約(yue)為(wei)5×10?cells/瓶。
質(zhi)量檢(jian)測(ce)：

公司(si)實驗(yan)室(shi)分(fen)離的小(xiao)鼠(shu)三(san)叉(cha)神(shen)經(jing)元(yuan)經(jing)β-Tubulin免疫熒(ying)光(guang)鑒定(ding)，純(chun)度可(ke)達(da)90%以上(shang)，且不含(han)有HIV-1、HBV、HCV、支(zhi)原(yuan)體、細菌(jun)、酵母和真菌(jun)等。

本(ben)公司(si)所有產品(pin)僅供(gong)科學(xue)實驗(yan)，不做其他(ta)科學(xue)實驗(yan)外(wai)的使用(yong)！

包被(bei)條(tiao)件 PLL（0.1mg/ml）

培(pei)養基(ji) 含(han)B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換(huan)液頻(pin)率(lv) 每(mei)2-3天換(huan)液壹(yi)次(ci)

生長特(te)性(xing) 貼壁

細胞(bao)形態 神(shen)經(jing)元(yuan)細(xi)胞(bao)樣

傳(chuan)代特(te)性(xing) 屬於(yu)終末分(fen)化細(xi)胞(bao)；屬於(yu)不增殖細(xi)胞(bao)群(qun)

消(xiao)化液(ye) 0.25%yi蛋(dan)白(bai)酶(mei)

培(pei)養條(tiao)件 氣(qi)相(xiang)：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準備(bei)工作

1. 實驗(yan)器材準備(bei)：準備(bei)無菌的培(pei)養皿、培(pei)養瓶、移(yi)液(ye)管(guan)、離心管(guan)、手術(shu)器(qi)械(xie)等，並進行(xing)高壓(ya)滅(mie)菌或(huo)其他(ta)合適(shi)的消(xiao)毒處理。

2. 試劑(ji)準備(bei)：配制或(huo)購買合適的培(pei)養基(ji)、消(xiao)化酶(mei)（如、膠(jiao)原(yuan)酶等(deng)）、胎牛(niu)血(xue)清(qing)、雙(shuang)抗等試劑，確保(bao)其無(wu)菌(jun)且在(zai)有效期(qi)內。

3. 實驗(yan)動物(wu)或(huo)組織(zhi)來(lai)源(yuan)準備(bei)：根(gen)據實(shi)驗需求，選(xuan)擇合(he)適(shi)的動物(wu)並進行(xing)相(xiang)應(ying)的麻醉或(huo)處死(si)，獲取所(suo)需(xu)組織(zhi)；或(huo)從(cong)已有的組織(zhi)樣本(ben)庫(ku)中(zhong)獲取組織(zhi)。

取材與(yu)處理

1. 取材：在(zai)無(wu)菌(jun)條(tiao)件下，迅(xun)速(su)取(qu)出(chu)目(mu)標組織(zhi)，盡量減(jian)少(shao)對(dui)組織(zhi)的損傷，並去除(chu)多(duo)余的脂肪、結締(di)組織(zhi)等(deng)非(fei)目的組織(zhi)。

2. 清(qing)洗(xi)：將(jiang)取出的組織(zhi)用(yong)預(yu)冷(leng)的無菌PBS沖洗數(shu)次(ci)，以去除(chu)血(xue)液(ye)和雜(za)質(zhi)。

3. 剪切：將(jiang)組織(zhi)剪(jian)成約(yue)1 - 2mm³的小(xiao)塊(kuai)，以便後(hou)續(xu)消(xiao)化。

細胞(bao)分離

1. 消(xiao)化：將(jiang)剪碎(sui)的組織(zhi)塊(kuai)放(fang)入(ru)含(han)有適量(liang)消(xiao)化酶(mei)的離心管(guan)中，在(zai)37℃恒溫搖床或(huo)培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化壹(yi)段時間(jian)。期(qi)間(jian)可(ke)輕輕搖晃(huang)離心管(guan)，使消(xiao)化更(geng)均勻。

2. 終止(zhi)消(xiao)化：當(dang)組織(zhi)塊(kuai)大(da)部分被(bei)消(xiao)化成單(dan)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)或(huo)小(xiao)細(xi)胞(bao)團時，加入(ru)含(han)血清(qing)的培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。

3. 過濾(lv)與(yu)離心：用(yong)細胞(bao)篩過(guo)濾(lv)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，去除(chu)未(wei)消(xiao)化的組織(zhi)碎(sui)片，然(ran)後(hou)將(jiang)濾(lv)液(ye)以適(shi)當(dang)的轉速離心，收集(ji)細胞(bao)沈(chen)澱。

細胞(bao)觀察與(yu)檢(jian)測(ce)

1. 日常(chang)觀察：每(mei)天用(yong)倒置顯(xian)微鏡觀察細胞(bao)的形態、生長狀(zhuang)態、密(mi)度等，記錄(lu)細(xi)胞(bao)的變化情況，如發(fa)現(xian)細胞(bao)汙染(ran)或(huo)異(yi)常，及(ji)時(shi)采(cai)取相(xiang)應(ying)措施(shi)。
2. 細(xi)胞(bao)計數與(yu)活力(li)檢(jian)測(ce)：在(zai)需(xu)要(yao)時，可(ke)采(cai)用(yong)臺(tai)盼(pan)藍(lan)染色(se)等方(fang)法(fa)對(dui)細(xi)胞(bao)進行(xing)計數和活力(li)檢(jian)測(ce)，以了(le)解(jie)細胞(bao)的生長情況和健(jian)康狀(zhuang)態。

壹、取(qu)材與(yu)分(fen)離

1. 快速(su)操作

- 組織(zhi)取(qu)材後(hou)需(xu)立(li)即(ji)處理，避(bi)免長時間(jian)暴(bao)露於(yu)室(shi)溫(wen)或(huo)非(fei)營養環(huan)境(jing)。

- 使用(yong)無菌 PBS 或(huo)生理鹽水沖洗(xi)組織(zhi)，去除(chu)血(xue)液(ye)、雜(za)質(zhi)。

2. 消(xiao)化酶(mei)選(xuan)擇

- 根(gen)據組織(zhi)類(lei)型選(xuan)擇消(xiao)化酶(mei)，避(bi)免過度消(xiao)化導致細(xi)胞(bao)損傷。

- 消(xiao)化時(shi)間(jian)需(xu)嚴(yan)格控制(zhi)（通常 10-30 分鐘），可(ke)通過顯(xian)微鏡觀察細胞(bao)解離狀(zhuang)態。

二、培(pei)養條(tiao)件優(you)化(hua)

1. 培(pei)養基(ji)選(xuan)擇

- 使用(yong)含(han)血清(qing)或(huo)特(te)定(ding)生長因子的培(pei)養基(ji)（如(ru) DMEM、RPMI 1640 等(deng)），部分細(xi)胞(bao)需添加胰島(dao)素、EGF 等。

- 避(bi)免頻(pin)繁(fan)更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)品(pin)牌(pai)或(huo)批(pi)次(ci)，減(jian)少(shao)細(xi)胞(bao)適應壓(ya)力(li)。

2. 貼壁與(yu)傳(chuan)代

- 原(yuan)代細(xi)胞(bao)貼壁能力(li)較(jiao)弱，可(ke)能需要(yao)包被(bei)培(pei)養皿（如(ru)膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白(bai)、多(duo)聚賴氨(an)酸(suan)）。

- 傳(chuan)代時(shi)密(mi)度建議控(kong)制(zhi)在(zai) 70%-80%，過(guo)度匯(hui)合會(hui)導致接(jie)觸抑制和分(fen)化(hua)。

三、汙染(ran)控制(zhi)

1. 無菌(jun)操作

- 全程(cheng)在(zai)超凈臺(tai)操作，使用(yong)壹次(ci)性(xing)耗材，避(bi)免交叉(cha)汙染(ran)。

- 培(pei)養基(ji)中(zhong)可(ke)添加雙(shuang)抗，但(dan)長期(qi)使用(yong)可(ke)能影響細(xi)胞(bao)活性(xing)。

2. 支(zhi)原(yuan)體檢測(ce)

- 定(ding)期(qi)檢測(ce)支(zhi)原(yuan)體汙染(ran)（如 PCR 法(fa)），汙染(ran)後(hou)需(xu)及(ji)時(shi)丟(diu)棄(qi)細胞(bao)。

四(si)、狀(zhuang)態監(jian)控

1. 日常(chang)觀察

- 每(mei)天檢查細(xi)胞(bao)形態、密(mi)度及(ji)培(pei)養基(ji)顏(yan)色(se)，及(ji)時(shi)更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)（通常每(mei) 2-3 天換(huan)液壹(yi)次(ci)）。

- 異(yi)常形態（如(ru)細(xi)胞(bao)變圓、碎(sui)片增多(duo)）可(ke)能提示(shi)汙染(ran)或(huo)營(ying)養不足(zu)。

2. 傳(chuan)代與(yu)凍存(cun)

- 原(yuan)代細(xi)胞(bao)分裂(lie)次(ci)數有限(xian)（壹(yi)般 5-10 代），需及(ji)時(shi)凍存(cun)早(zao)期(qi)代次(ci)細胞(bao)。

- 凍存(cun)液(ye)建(jian)議使用(yong) DMSO+血清(qing)（或(huo)專用(yong)凍存(cun)培(pei)養基(ji)），梯(ti)度降溫後(hou)液(ye)氮保(bao)存(cun)。