【概要描述】小(xiao)鼠臍(qi)帶(dai)間充(chong)質(zhi)幹(gan)細(xi)胞公司正(zheng)在出售(shou)的(de)產品(pin)：U20S U-2OS人(ren)成(cheng)骨肉(rou)瘤細(xi)胞HPAF-II胰腺(xian)導(dao)管腺癌KLM-1胰腺導管(guan)腺癌MIA PaCa-2胰腺導管(guan)腺癌Panc 04.03胰腺導管(guan)腺癌Panc 08.13胰腺導管(guan)腺癌Panc 10.05胰腺導管(guan)腺癌PANC-1胰腺導管(guan)腺癌PK-1胰腺導管(guan)腺癌PK-8胰腺導管(guan)腺癌

小鼠臍(qi)帶(dai)間充(chong)質(zhi)幹(gan)分(fen)離自(zi)臍(qi)帶(dai)；臍(qi)帶(dai)是哺(bu)乳類的(de)連接胎(tai)兒(er)和(he)胎(tai)盤(pan)的(de)管(guan)狀(zhuang)結構(gou)。原(yuan)來是由羊膜(mo)包(bao)卷(juan)著卵(luan)黃(huang)囊(nang)和尿膜(mo)的柄(bing)狀(zhuang)伸(shen)長部而(er)形成(cheng)的。臍(qi)帶(dai)中通過尿膜(mo)的血(xue)管(guan)即臍(qi)動脈(mai)和臍(qi)靜脈(mai)，卵(luan)黃(huang)囊(nang)的血(xue)管(guan)即臍(qi)腸(chang)系膜(mo)動脈(mai)及臍(qi)腸(chang)系膜(mo)靜脈(mai)。當卵(luan)黃(huang)囊(nang)及其血(xue)管(guan)退(tui)化(hua)，臍(qi)動脈(mai)和臍(qi)靜脈(mai)就(jiu)發(fa)達起(qi)來，在這些間隙中可(ke)以看到疏松(song)的膠(jiao)狀(zhuang)的間(jian)充(chong)質(zhi)。在子宮(gong)中，子宮(gong)動脈(mai)在胎(tai)盤(pan)的(de)母體部分(fen)出的(de)毛細(xi)血(xue)管(guan)，與(yu)胎(tai)盤(pan)的(de)子(zi)體(ti)部胎(tai)兒(er)毛細(xi)血(xue)管(guan)靠近，在此處(chu)母體和(he)胎(tai)兒(er)的(de)血(xue)液(ye)間(jian)進(jin)行(xing)CO2和(he)O2，代謝產物(wu)即代(dai)謝廢物(wu)和營養(yang)物(wu)質的交(jiao)換。臍(qi)動脈(mai)將(jiang)胎(tai)兒(er)來的(de)廢(fei)物運送至胎(tai)盤(pan)，臍(qi)靜脈(mai)將(jiang)O2和營養(yang)物(wu)質從胎(tai)盤(pan)運送給胎(tai)兒(er)。最(zui)後由子宮(gong)靜脈(mai)將(jiang)來自(zi)胎(tai)兒(er)的(de)代(dai)謝廢物(wu)運走，某種(zhong)激素(su)和(he)抗體等(deng)也(ye)通過臍(qi)帶(dai)從母體移(yi)交(jiao)給胎(tai)兒(er)。臍(qi)帶(dai)中含有(you)大(da)量的(de)幹(gan)細(xi)胞，幹(gan)細(xi)胞是生命的種子，它會(hui)分(fen)化(hua)成(cheng)機(ji)體(ti)的(de)各(ge)種細(xi)胞，結出各(ge)種(zhong)不(bu)同(tong)的(de)果(guo)實——血(xue)液(ye)細(xi)胞、神(shen)經細(xi)胞、骨骼(ge)細(xi)胞等(deng)。幹(gan)細(xi)胞是具有(you)自我更新、高(gao)度(du)增殖和(he)多(duo)項分(fen)化(hua)潛能(neng)的(de)細(xi)胞群(qun)體(ti)；這些細(xi)胞可(ke)以通過分(fen)裂維(wei)持(chi)自(zi)身(shen)細(xi)胞的特(te)性(xing)和數(shu)量，又可(ke)進壹(yi)步(bu)分(fen)化(hua)為(wei)各(ge)種組織(zhi)細(xi)胞，從而(er)在組織(zhi)修(xiu)復等(deng)方(fang)面(mian)發(fa)揮(hui)積極(ji)作(zuo)用。間充(chong)質幹(gan)細(xi)胞（MSC）是壹種(zhong)具(ju)有(you)高度自我(wo)更新和(he)多(duo)向(xiang)分(fen)化(hua)潛能(neng)的(de)幹(gan)細(xi)胞。在不(bu)同(tong)的(de)誘導條(tiao)件(jian)下，可(ke)分(fen)化(hua)為(wei)多(duo)種造血(xue)細(xi)胞以外的(de)組(zu)織(zhi)細(xi)胞，並(bing)具(ju)有(you)造血(xue)支持(chi)、免(mian)疫(yi)調(tiao)節(jie)、組(zu)織(zhi)修(xiu)復等(deng)作(zuo)用；目前，多用於風濕免(mian)疫(yi)疾(ji)病的治療。間(jian)充質(zhi)幹(gan)細(xi)胞（MSCs）是壹種(zhong)具(ju)有(you)自我更新和(he)多(duo)向(xiang)分(fen)化(hua)潛能(neng)的(de)成(cheng)體幹(gan)細(xi)胞，存在於骨髓、脂肪組織(zhi)、臍(qi)血(xue)及多(duo)種(zhong)胎(tai)兒(er)組(zu)織(zhi)。它可(ke)分(fen)泌(mi)多(duo)種細(xi)胞因(yin)子(zi)及生長(chang)因(yin)子(zi)，促(cu)進造(zao)血(xue)幹(gan)細(xi)胞（HSC）的增殖與(yu)分(fen)化(hua)。MSCs還(hai)具(ju)有(you)免疫(yi)調(tiao)節(jie)、抗炎和(he)組(zu)織(zhi)修(xiu)復作(zuo)用，可(ke)減(jian)輕(qing)移(yi)植(zhi)物(wu)抗宿主(zhu)病（GVHD）及其他(ta)移植(zhi)相(xiang)關(guan)並(bing)發(fa)癥(zheng)。
方(fang)法(fa)簡介(jie)：

公司實驗室(shi)分(fen)離的(de)小鼠臍(qi)帶(dai)間充(chong)質(zhi)幹(gan)采(cai)用組織(zhi)貼(tie)塊法(fa)制(zhi)備(bei)而(er)來，細(xi)胞總量約(yue)為(wei)5×10?cells/瓶(ping)。
質量檢(jian)測(ce)：

公司實驗室(shi)分(fen)離的(de)小鼠臍(qi)帶(dai)間充(chong)質(zhi)幹(gan)經(jing)CD29、CD44免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)鑒(jian)定(ding)，純(chun)度(du)可(ke)達90%以上，且不(bu)含(han)有(you)HIV-1、HBV、HCV、支原(yuan)體、細(xi)菌(jun)、酵母和真(zhen)菌(jun)等(deng)。

本(ben)公司所有(you)產品(pin)僅(jin)供科學(xue)實驗，不(bu)做其他(ta)科學(xue)實驗外的(de)使用！

培養(yang)基(ji) 含(han)FBS、生長(chang)添加(jia)劑、Penicillin、Streptomycin等(deng)

換液頻(pin)率(lv) 每(mei)2-3天換(huan)液壹(yi)次(ci)

生長(chang)特(te)性 貼(tie)壁

細(xi)胞形態 成(cheng)纖維細(xi)胞樣

傳(chuan)代特(te)性 可(ke)傳(chuan)2-3代

消(xiao)化(hua)液 0.25%yi蛋白(bai)酶(mei)

培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian) 氣(qi)相(xiang)：空(kong)氣(qi)，95%；CO2，5%

準(zhun)備(bei)工(gong)作(zuo)

1. 實驗器(qi)材(cai)準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)無(wu)菌(jun)的培養(yang)皿、培(pei)養(yang)瓶(ping)、移(yi)液管、離心管(guan)、手(shou)術(shu)器(qi)械(xie)等(deng)，並(bing)進(jin)行(xing)高壓滅(mie)菌(jun)或其他(ta)合適的消毒(du)處理(li)。

2. 試劑準備(bei)：配(pei)制(zhi)或購買(mai)合適的培養(yang)基(ji)、消化(hua)酶(mei)（如、膠(jiao)原酶(mei)等(deng)）、胎(tai)牛血(xue)清(qing)、雙(shuang)抗等(deng)試(shi)劑，確(que)保(bao)其無(wu)菌(jun)且在有(you)效期內(nei)。

3. 實驗動物或組織(zhi)來源(yuan)準(zhun)備(bei)：根(gen)據實驗需(xu)求(qiu)，選擇(ze)合適的動物並(bing)進(jin)行(xing)相(xiang)應(ying)的(de)麻(ma)醉或處死，獲取(qu)所需(xu)組織(zhi)；或從已(yi)有(you)的組織(zhi)樣本(ben)庫中獲取(qu)組(zu)織(zhi)。

取(qu)材(cai)與(yu)處理

1. 取(qu)材(cai)：在無(wu)菌(jun)條件(jian)下，迅(xun)速取(qu)出目標(biao)組(zu)織(zhi)，盡量減(jian)少(shao)對組織(zhi)的損(sun)傷，並(bing)去除多(duo)余的脂肪、結締組織(zhi)等(deng)非(fei)目的(de)組(zu)織(zhi)。

2. 清(qing)洗(xi)：將(jiang)取(qu)出的(de)組(zu)織(zhi)用預(yu)冷的無(wu)菌(jun)PBS沖洗(xi)數(shu)次(ci)，以去除血(xue)液(ye)和(he)雜質(zhi)。

3. 剪(jian)切(qie)：將(jiang)組織(zhi)剪(jian)成(cheng)約1 - 2mm³的(de)小塊，以便後(hou)續(xu)消(xiao)化(hua)。

細(xi)胞分(fen)離

1. 消(xiao)化(hua)：將(jiang)剪(jian)碎(sui)的組織(zhi)塊放(fang)入(ru)含(han)有(you)適量消(xiao)化(hua)酶(mei)的(de)離心管(guan)中，在37℃恒溫(wen)搖(yao)床或培養(yang)箱(xiang)中消化(hua)壹段(duan)時間。期間可(ke)輕(qing)輕(qing)搖(yao)晃(huang)離心管(guan)，使消化(hua)更均(jun)勻。

2. 終(zhong)止消化(hua)：當組(zu)織(zhi)塊大(da)部分(fen)被消化(hua)成(cheng)單(dan)細(xi)胞懸(xuan)液或小細(xi)胞團時，加(jia)入(ru)含(han)血(xue)清(qing)的(de)培養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。

3. 過濾(lv)與(yu)離心：用細(xi)胞篩(shai)過濾(lv)細(xi)胞懸(xuan)液，去除未(wei)消化(hua)的組(zu)織(zhi)碎片，然(ran)後(hou)將(jiang)濾(lv)液以適當的(de)轉(zhuan)速離心，收集(ji)細(xi)胞沈澱(dian)。

細(xi)胞觀(guan)察與(yu)檢(jian)測(ce)

1. 日常(chang)觀(guan)察：每天(tian)用倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡觀(guan)察細(xi)胞的形態、生長(chang)狀(zhuang)態、密(mi)度(du)等(deng)，記(ji)錄細(xi)胞的變(bian)化(hua)情(qing)況，如發(fa)現細(xi)胞汙染(ran)或異常，及時(shi)采(cai)取(qu)相(xiang)應(ying)措施(shi)。
2. 細(xi)胞計數(shu)與(yu)活力檢(jian)測(ce)：在需(xu)要時，可(ke)采(cai)用臺(tai)盼(pan)藍染(ran)色等(deng)方(fang)法(fa)對細(xi)胞進行(xing)計數(shu)和(he)活力檢(jian)測(ce)，以了解細(xi)胞的生長(chang)情(qing)況和(he)健康(kang)狀(zhuang)態。

壹(yi)、取(qu)材(cai)與(yu)分(fen)離

1. 快速(su)操作(zuo)

- 組(zu)織(zhi)取(qu)材(cai)後(hou)需(xu)立即處(chu)理，避免長時間暴露於室(shi)溫(wen)或非(fei)營養(yang)環境。

- 使用無(wu)菌(jun) PBS 或生理(li)鹽(yan)水沖(chong)洗(xi)組(zu)織(zhi)，去除血(xue)液(ye)、雜質(zhi)。

2. 消化(hua)酶(mei)選(xuan)擇

- 根(gen)據組(zu)織(zhi)類型(xing)選(xuan)擇(ze)消(xiao)化(hua)酶(mei)，避(bi)免過度消化(hua)導致細(xi)胞損傷。

- 消化(hua)時間(jian)需(xu)嚴格控制(zhi)（通(tong)常 10-30 分(fen)鐘），可(ke)通過顯(xian)微(wei)鏡觀(guan)察細(xi)胞解離狀(zhuang)態。

二(er)、培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)優化(hua)

1. 培養(yang)基(ji)選擇

- 使用含血(xue)清(qing)或特定生長(chang)因(yin)子(zi)的培養(yang)基(ji)（如 DMEM、RPMI 1640 等(deng)），部分(fen)細(xi)胞需(xu)添加(jia)胰島素(su)、EGF 等(deng)。

- 避(bi)免(mian)頻繁更換培(pei)養(yang)基(ji)品(pin)牌或批次(ci)，減(jian)少(shao)細(xi)胞適應(ying)壓(ya)力。

2. 貼(tie)壁與(yu)傳(chuan)代

- 原(yuan)代(dai)細(xi)胞貼(tie)壁能(neng)力較(jiao)弱，可(ke)能(neng)需(xu)要包(bao)被培養(yang)皿（如膠(jiao)原蛋白(bai)、多聚賴氨(an)酸(suan)）。

- 傳(chuan)代時(shi)密度(du)建(jian)議控制(zhi)在 70%-80%，過度匯(hui)合會導致接觸(chu)抑制(zhi)和(he)分(fen)化(hua)。

三(san)、汙(wu)染(ran)控制(zhi)

1. 無(wu)菌(jun)操作(zuo)

- 全(quan)程(cheng)在超凈(jing)臺(tai)操作(zuo)，使用壹次(ci)性耗(hao)材(cai)，避(bi)免交(jiao)叉汙(wu)染(ran)。

- 培養(yang)基(ji)中可(ke)添加(jia)雙(shuang)抗，但長(chang)期使用可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)細(xi)胞活性。

2. 支原(yuan)體檢(jian)測(ce)

- 定期(qi)檢(jian)測(ce)支原(yuan)體汙(wu)染(ran)（如 PCR 法(fa)），汙染(ran)後需(xu)及時(shi)丟(diu)棄細(xi)胞。

四、狀(zhuang)態監控(kong)

1. 日(ri)常觀(guan)察

- 每天(tian)檢(jian)查細(xi)胞形態、密(mi)度及培(pei)養(yang)基(ji)顏色，及時(shi)更換培(pei)養(yang)基(ji)（通常每(mei) 2-3 天換液壹(yi)次(ci)）。

- 異(yi)常(chang)形態（如細(xi)胞變圓(yuan)、碎(sui)片增多）可(ke)能(neng)提(ti)示(shi)汙染(ran)或營養(yang)不(bu)足(zu)。

2. 傳(chuan)代與(yu)凍存

- 原(yuan)代細(xi)胞分(fen)裂次(ci)數(shu)有(you)限（壹般 5-10 代），需(xu)及時(shi)凍(dong)存早期代(dai)次(ci)細(xi)胞。

- 凍(dong)存液建(jian)議使用 DMSO+血(xue)清(qing)（或專用凍存培養(yang)基(ji)），梯度(du)降溫(wen)後(hou)液(ye)氮保存。