【概(gai)要(yao)描述】il-6 elisa試劑盒(he)說明書(shu)標本采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早進(jin)行提取，提(ti)取按(an)相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行，提取後(hou)應盡(jin)快進(jin)行實(shi)驗。若不能(neng)馬(ma)上(shang)進(jin)行試驗，可(ke)將(jiang)標本放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但應避(bi)免反(fan)復凍融(rong)

                                                                                                          il-6 elisa試(shi)劑盒(he)說明書(shu)
使(shi)用(yong)目(mu)的(de)：

本(ben)試(shi)劑盒(he)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)大(da)鼠血(xue)清(qing)，血(xue)漿(jiang)及(ji)相關(guan)液體樣(yang)本(ben)中(zhong)含量(liang)。

試劑盒(he)組(zu)成(cheng)：

標本要(yao)求(qiu)：

1．標本采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早進(jin)行提取，提(ti)取按(an)相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行，提取後(hou)應盡(jin)快進(jin)行實(shi)驗。若不能(neng)馬(ma)上(shang)進(jin)行試驗，可(ke)將(jiang)標本放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但應避(bi)免反(fan)復凍融(rong)

2．不能(neng)檢測(ce)含(han)NaN3的(de)樣(yang)品，因(yin)NaN3抑制(zhi)辣根過氧化(hua)物(wu)酶的(de)（HRP）活(huo)性。

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1.標準(zhun)品的(de)稀(xi)釋(shi)：本(ben)試劑盒(he)提(ti)供(gong)原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品壹(yi)支(zhi)，用(yong)戶可(ke)按(an)照(zhao)下列圖表在小(xiao)試管(guan)中進(jin)行稀(xi)釋(shi)。

2.加樣(yang)：分別設(she)空白孔（空白對照孔不(bu)加樣(yang)品及(ji)酶標試劑，其(qi)余(yu)各步(bu)操(cao)作(zuo)相同(tong)）、標準(zhun)孔、待測(ce)樣(yang)品孔。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品孔中(zhong)先(xian)加樣品稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後再(zai)加待測(ce)樣(yang)品10μl（樣(yang)品最(zui)終(zhong)稀(xi)釋(shi)度(du)為5倍(bei)）。加樣(yang)將樣品加(jia)於酶標板孔底(di)部，盡量(liang)不(bu)觸及孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)。

3.溫育(yu)：用(yong)封板膜封板後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘。   

4.配液：將30倍(bei)濃縮洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用(yong)

5.洗(xi)滌(di)：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封板膜，棄(qi)去(qu)液體，甩幹，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液，靜置(zhi)30秒後棄(qi)去(qu)，如(ru)此重復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

6.加(jia)酶：每孔加(jia)入酶標試劑50μl，空白孔除(chu)外(wai)。 

7.溫育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

8.洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同(tong)5。

9.顯色：每(mei)孔先(xian)加入顯色劑A50μl，再(zai)加入顯色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯色10分鐘.

10.終(zhong)止(zhi)：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)（此時(shi)藍色立(li)轉(zhuan)黃色）。

11.測(ce)定(ding)：以空白孔調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依序(xu)測(ce)量(liang)各孔的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終(zhong)止(zhi)液後15分鐘以內進(jin)行。

操作(zuo)程序(xu)總(zong)結：

il-6 elisa試(shi)劑盒(he)說明書(shu)計(ji)算(suan)

  以標準(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)為橫坐(zuo)標，OD值為縱(zong)坐(zuo)標，在坐(zuo)標紙上(shang)繪出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)，根(gen)據樣品的(de)OD值由標準(zhun)曲(qu)線(xian)查出(chu)相應(ying)的(de)濃(nong)度(du)；再(zai)乘以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或(huo)用(yong)標準(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)與(yu)OD值計(ji)算(suan)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸方程(cheng)式，將樣品的(de)OD值代入方程(cheng)式，計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品濃(nong)度(du)，再(zai)乘以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為樣品的(de)實(shi)際(ji)濃度(du)。 

註(zhu)意事(shi)項

1．試(shi)劑盒(he)從冷藏環境中(zhong)取出(chu)應(ying)在室(shi)溫平(ping)衡(heng)15-30分鐘後(hou)方可(ke)使(shi)用(yong)，酶標包(bao)被(bei)板(ban)開(kai)封後如(ru)未(wei)用(yong)完，板(ban)條(tiao)應裝入密(mi)封袋中保(bao)存。

2．濃(nong)洗(xi)滌(di)液可能(neng)會(hui)有(you)結晶析出(chu)，稀(xi)釋(shi)時(shi)可在水(shui)浴(yu)中加(jia)溫助(zhu)溶(rong)，洗(xi)滌(di)時不(bu)影響(xiang)結果(guo)。

3．各步(bu)加(jia)樣均(jun)應(ying)使(shi)用(yong)加(jia)樣(yang)器，並經常(chang)校對其(qi)準(zhun)確性，以避(bi)免試(shi)驗誤(wu)差(cha)。壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間最(zui)好(hao)控制(zhi)在5分鐘內，如(ru)標本數量(liang)多，推薦(jian)使(shi)用(yong)排(pai)槍加(jia)樣。

4．請(qing)每次測(ce)定(ding)的(de)同(tong)時做標準(zhun)曲(qu)線(xian)，最(zui)好(hao)做復孔。如(ru)標本中(zhong)待測(ce)物(wu)質含(han)量(liang)過高(gao)（樣本(ben)OD值大(da)於標準(zhun)品孔第壹(yi)孔的(de)OD值），請(qing)先(xian)用(yong)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹(yi)定(ding)倍(bei)數（n倍(bei)）後再(zai)測(ce)定(ding)，計(ji)算(suan)時請(qing)最(zui)後(hou)乘以總(zong)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。

5．封板膜只(zhi)限壹(yi)次(ci)性使(shi)用(yong)，以避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。

6．底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保存(cun)。

7．嚴格按(an)照說明書(shu)的(de)操(cao)作(zuo)進(jin)行，試驗結果(guo)判定(ding)必(bi)須(xu)以酶標儀讀(du)數為準(zhun).

8．所(suo)有(you)樣(yang)品，洗(xi)滌(di)液和(he)各種(zhong)廢(fei)棄(qi)物(wu)都應(ying)按(an)傳染(ran)物(wu)處(chu)理。

9．本(ben)試劑不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組分不得(de)混用(yong)。

保(bao)存(cun)條件及(ji)有效(xiao)期

1．試(shi)劑盒(he)保(bao)存：；2-8℃。

2．有效(xiao)期：6個(ge)月